Prospecção de bactérias ácido láticas isoladas de leite cru: avaliação da inocuidade e de características tecnológicas
Culturas conservantes; Segurança microbiológica; Caracterização funcional; Aplicação biotecnológica
As bactérias ácido-láticas desempenham papel essencial na fermentação de alimentos, contribuindo para a segurança microbiológica, conservação, qualidade sensorial e desenvolvimento de produtos com propriedades funcionais. Além de sua aplicação tradicional, essas bactérias destacam-se pela produção de metabólitos antimicrobianos, como bacteriocinas e ácidos orgânicos, capazes de inibir microrganismos patogênicos e deteriorantes. Nesse contexto, o leite cru constitui uma importante fonte de diversidade microbiana, possibilitando a prospecção de cepas com potencial tecnológico e probiótico, desde que avaliadas quanto à sua inocuidade. O presente estudo teve como objetivo isolar, identificar e caracterizar bactérias ácido-láticas provenientes de leite cru, avaliando sua atividade antimicrobiana, segurança para o hospedeiro e propriedades tecnológicas, visando sua aplicação como culturas conservantes e/ou probióticas em produtos lácteos. As amostras de leite cru foram coletadas em propriedades rurais do estado de Pernambuco, Brasil, e submetidas ao isolamento em meio MRS. Os isolados foram inicialmente caracterizados por análises morfológicas, coloração de Gram e teste de catalase, sendo posteriormente identificados por espectrometria de massa MALDI-TOF e PCR do gene 16S rRNA. A diversidade genética das cepas foi avaliada por RAPD-PCR, permitindo a seleção de isolados geneticamente distintos. A atividade antimicrobiana das cepas selecionadas foi avaliada frente a microrganismos indicadores por métodos de difusão em ágar, bem como a estabilidade dos compostos antimicrobianos sob diferentes condições de pH, temperatura e exposição a enzimas. Cepas pertencentes principalmente aos gêneros Enterococcus e Streptococcus apresentaram atividade antimicrobiana relevante, mantendo efeito inibitório mesmo após tratamentos físicos e químicos, sugerindo potencial aplicação tecnológica. A avaliação da segurança incluiu testes de citotoxicidade em células intestinais humanas Caco-2, atividade hemolítica e perfil de suscetibilidade a antibióticos. Os resultados indicaram ausência de atividade hemolítica, baixa citotoxicidade e perfis de sensibilidade compatíveis com critérios de segurança para microrganismos com potencial probiótico. Adicionalmente, foram avaliadas características funcionais, como a capacidade de adesão às células Caco-2 e a tolerância a condições simuladas do trato gastrointestinal. As propriedades tecnológicas investigadas incluíram tolerância a diferentes concentrações de cloreto de sódio e produção de enzimas de interesse industrial, como proteases, β-galactosidase e amilase. De forma geral, os resultados demonstram que cepas de bactérias ácido-láticas isoladas de leite cru apresentam potencial promissor para aplicação como culturas conservantes e/ou probióticas, desde que submetidas a criteriosa avaliação de segurança. Este estudo contribui para a valorização da microbiota do leite cru e para o desenvolvimento de estratégias inovadoras voltadas à melhoria da qualidade e segurança de produtos lácteos.