Banca de DEFESA: BRENO BARROS DE SANTANA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : BRENO BARROS DE SANTANA
DATA : 31/05/2023
HORA: 09:00
LOCAL: AUDITÓRIO
TÍTULO:

EFEITO DAS VARIÁVEIS TEMPO, TEMPERATURA NA MANUTENÇÃO DE OÓCITOS EQUINOS E DO RESVERATROL NA VITRIFICAÇÃO DE OÓCITOS ASININOS

PALAVRAS-CHAVES:

Oócitos, asininos, vitrificação.

PÁGINAS: 94
RESUMO:

O objetivo do presente estudo foi avaliar a viabilidade de oócitos equinos durante um período de 24 horas em
três diferentes temperaturas. E avaliar a expressão gênica e ultra estrutura de oócitos de equus asinus
vitrificados em dois dispositivos de armazenamento em meio suplementado com resveratrol (resv). Dezéguas
foram selecionadas para aspiração transvaginal de oócitos. Após a coleta, os oócitos foram selecionados e
divididos em 4 grupos: G0-corado pós-aspiração; G1-mantido por 24 horasà37°C; G2–mantido por 24hà
22,5°C; G3–mantido por 24hà5°C. Após esse período, os oócitos foram corados com 4 mM-calceína-AM e
2mM de homodímero etidio-1 para avaliação da viabilidade. Após a coloração, os oócitos foram fixados,
lavados e mantidos refrigeradosà5°C atéa avaliação. Para os oócitos de asininos foram utilizados complexos
cumulus oócitos obtidos de ovários provenientes de jumentas de abatedouro. Os 200 oócitos colhidos foram
selecionados e divididos em 4 grupos onde foram lavados em meio base (MB): MB composto por TCM-199 +
0,014% de BSA.E vitrificados nos seguintes Dispositivos: VIT A–palhetas vitrificação vitrific (WTA®) e
VIT B–palhetas de 0,25ml, onde foram vitrificados 5 oócitos por dispositivo da seguinte forma : VIT A 1 e
VIT B 1–Controle: MB + 10% (v/v) etilenoglicol-EG + 10% (v/v) dimetilsulfóxido-DMSO; VIT A 2 e
VIT B 2 Controle MB + 20% (v/v) EG, 20% (v/v) DMSO + 0,5 M sucrose; VIT A1 eVIT B 1 Resv: MB +
10% (v/v) EG + 10% (v/v) DMSO + 20 uM de Resv; VIT A 2 e VIT B 2 Resv: MB + 20% (v/v) EG, 20% (v/v)
DMSO + 0.5 M sucrose + 20 uM Resv. Após a vitrificação os oócitos foram mantidos congelados em nitrogênio
líquido atéa avaliação. Os oócitos equinos foram avaliados em microscópio de epifluorescência, considerando
citoplasma viável marcado em verde e cromatina não marcada com homodímero etidio-1 (vermelho). Sessenta e dois oócitos foram obtidos de 126 folículos aspirados (taxa de recuperação de 49,2%). Nenhuma diferença estatística foi observada entre os grupos; Para avaliação dos oócitos asininos os mesmo foram desvitrificados (37°C), a análise gênica foi realizada através do método de real-time PCR quantitativo (qRT-PCR) para os genesBax, Mater e Bmp15, podemos observar que não ouve diferença entre a expressão dos genes nos grupos estudados. Jápara a ultraestrutura dos oócitos após a desvitrificação foram selecionados pelo menos 3 e avaliados em microscópio eletrônico de transmissão(MET) quanto a integridade de suas estruturas, onde foi observado que a adição do resveratrol ao meio foi prejudicial a ultraestrutura quando comparado aos demais grupos. Em conclusão, os resultados observados na manutenção da temperatura dos  oócitos equinos nos mostra que oócitos equinos podem ser mantidos por 24 horas nas temperaturas de 22, 5 e 37°C sem alterações na sua viabilidade. Jápara os oócitos asininos foi observado que a adição do resveratrol na concentração 20 uM não altera a expressão genica, porém apresenta lesões na estrutura dos oócitos. Por se tratar do primeiro estudo da adição do resveratrol no meio de vitrificação de oócitos da espécie asinina são necessários mais estudos para que possa avaliar, por exemplo, outras concentrações do resveratrol como também o desenvolvimento desses oócitos após desvitrificação no processo de maturação fecundação e desenvolvimento embrionário.

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 3085776 - ANDRE MARIANO BATISTA - nullExterno ao Programa - 1511486 - CLAUDIO COUTINHO BARTOLOMEU - nullExterna à Instituição - FERNANDA PEREIRA DA SILVA BARBOSA
Interno - GUSTAVO FERRER CARNEIRO
Externa à Instituição - LÚCIA CRISTINA PEREIRA ARRUDA - UFRPE
Externo à Instituição - RAFAEL ARTUR DA SILVA JÚNIOR
Externo ao Programa - 1234222 - VICTOR NETTO MAIA - null