Banca de QUALIFICAÇÃO: TANIA ALEXANDRA ORTEGA SIERRA
Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.DISCENTE : TANIA ALEXANDRA ORTEGA SIERRA
DATA : 01/11/2022
HORA: 08:00
LOCAL: remoto
TÍTULO:
Determinantes genéticos de resistência a antimicrobianos em Staphylococcus spp. e bactérias da família Enterobacteriaceae isolados de leite de vacas e cabras em ecossistemas agropecuários do Nordeste brasileiro
PALAVRAS-CHAVES:
resistência aos antimicrobianos, Staphylococcus spp., família Enterobacteriaceae, BLEE, MLS, MRS.
PÁGINAS: 84
RESUMO:
Objetivou-se estudar o perfil fenotípico e genético de resistência aos antimicrobianos em bactérias do gênero Staphylococcus e da família Enterobacteriaceae isoladas de leite de vacas e cabras com mastite no estado de Pernambuco. Foram coletadas amostras de leite de 426 vacas e 323 cabras, em 6 e 17 propriedades leiteiras bovinas e caprinas, respectivamente. As amostras de leite das vacas foram semeadas em ágar sangue ovino e incubadas a 37°C por até 48 horas. Colônias que se apresentaram como cocos Gram positivos foram submetidas ao teste de catalase para a identificação de Staphylococcus spp. e posteriormente identificadas. S. aureus, S. epidermidis, S haemolyticus e S. chromogenes foram identificadas utilizando técnicas moleculares. As bactérias Gram negativos foram identificadas utilizando provas bioquímicas (fermentação de glicose, fermentação de lactose, motilidade, utilização de citrato, descarboxilação da lisina, produção de H2S, produção de gás, produção de indol, produção de urease e produção de fenilalanina desaminase). Vinte seis isolados de leite de vaca foram identificados como Escherichia coli (53,85% [14/26]), Proteus mirabilis (15,38% [4/26]), Klebsiella spp. (26,92% [7/26]) e Citrobacter spp. (3,85% [1/26]). Estas bactérias foram submetidas a um teste de triagem para identificação de bactérias produtoras de BLEE (β-lactamase de espetro estendido) e prova confirmatória (Teste de disco duplo), utilizando cefotaxima (30 µg), ceftriaxona (30 µg), ceftazidina (30 µg) e amoxicilina com ácido clavulânico (30 µg). Dos 26 isolados de enterobactérias, 61,54% (16/26) foram positivos no teste de triagem para BLEE e 12,5% (2/16) foram positivos no DDT. Posteriormente, todos os 26 isolados foram analisados para os genes codificadores de BLEE, blaSHV e blaTEM, sendo que 53,85% (14/26) foram positivos para um ou os dois genes e 71,43% (10/14) foram identificados como Escherichia coli. Por outro lado, foram identificados 148 e 119 isolados de Staphylococcus spp. de vacas e cabras, respectivamente para o estudo do perfil fenotípico de resistência na técnica de difusão em ágar Muller Hinton com os discos de antibióticos: penicilina (10 UI), tetraciclina (30 µg), cefoxitina (30 µg), eritromicina (15 µg), Clindamicina (2 µg) e ceftiofur (30 µg). Nos isolados de bovinos observou-se expressiva frequência de resistência à penicilina (52,03% [77/148]), seguido à tetraciclina (10,14% [15/148]), e nenhum isolado foi resistente a ceftiofur. Em relação as determinantes genéticas de resistência, o padrão mais observado foi a presença do gene blaZ (40,54% [60/148]) e do gene tetK (22,3% [22/148]). Nos isolados de cabras observou-se o mesmo padrão de resistência que nos isolados de vacas com a frequência de resistências à penicilina e à tetraciclina de 45,0% (53/119) e 30,3% (36/119), respectivamente. Em relação aos genes de resistência observou-se uma maior frequência do gene blaZ com 50,4% (60/119) seguido de tetK com 45,0% (53/119). Nos Staphylococcus spp. de ambas espécies foi realizada o D – test para a identificar cepas capazes de induzir resistência à lincosamidas e estreptogramina, utilizando-se discos de eritromicina (15 µg) e clindamicina (2 µg) colocados a uma distância de 20 mm entre eles em ágar Muller Hinton. Nos isolados de Staphylococcus spp. de vacas foi obtido 0,7% (1/148) de D – test positivo, 7,4% (11/148) foram resistentes aos MLS, 1,4% (2/148) apresentaram resistência somente aos MS (D – teste negativo) e 2,7% (3/148) foram L+. para os isolados de cabras foi obtido 3,4% (4/119) D - test positivo, 0,8% (1/119) foram resistentes aos MLS e 0,8% (1/119) resistentes à clindamicina (L+). Os resultados obtidos demonstram a circulação de cepas resistentes aos antimicrobianos no sistema agropecuário do estado de Pernambuco, representando um risco à saúde animal e pública .
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - RINALDO APARECIDO MOTA
Interno - JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
Externo à Instituição - ANDRE DE SOUZA SANTOS