Banca de DEFESA: KASSIA REGINA DA SILVA CARNEIRO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : KASSIA REGINA DA SILVA CARNEIRO
DATA : 02/10/2024
HORA: 14:00
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Atividade imunomoduladora da lectina de Canavalia brasiliensis contra Listeria monocytogenes em modelos infecciosos experimentais ex vivo e in vivo

PALAVRAS-CHAVES:

ConBr, Listeria monocytogenes, listeriose, adjuvantes terapêuticos, ação imunomodulatória.

PÁGINAS: 130
RESUMO:

Listeria monocytogenes é o agente causador da listeriose, uma doença de origem alimentar que afeta seres humanos e animais. Considerando o desenvolvimento de formulações imunoterapêuticas para o controle de infecções microbianas, estudos anteriores apontam diversas ações biológicas da lectina vegetal Canavalia brasiliensis (ConBr), tais como imunomodulatória, antimicrobiana, cicatrizante, neuroprotetora, ativação in vivo de linfócitos T e indução de apoptose celular. Neste estudo, objetivou-se esclarecer o potencial imunomodulatório da ConBr no tratamento de infecções experimentais causadas por Listeria monocytogenes. Ensaios de citotoxicidade com diferentes dosagens de ConBr (100 a 0,78 µg/mL) foram realizados com culturas primárias de macrófagos obtidas da cavidade peritoneal de animais, sendo a viabilidade celular determinada por meio de avaliação da atividade metabólica celular utilizando resazurina. Posteriormente, foi realizada a quantificação intracelular bacteriana nos macrófagos. No desenho experimental, camundongos Swiss foram inoculados com uma suspensão de L. monocytogenes (2 x  UFC/mL) por via oral ou intraperitoneal e, após 30 min, tratados via intraperitoneal ou endovenosa, com dosagens atóxicas de ConBr (1mg/kg e 10mg/kg). Após 24h de tratamento, os animais foram submetidos à eutanásia para coleta de sangue, fluido peritoneal, baço e fígado para análises de Unidades Formadoras de Colônia (UFC), extração de RNA e contagem total e diferencial de leucócitos. Em outro experimento, 40 animais foram tratados e monitorados durante 7 dias para análise da taxa de sobrevivência. No último experimento, simulamos o mesmo modelo de infecção oral e tratamento intraperitoneal em animais machos e, dessa vez, adicionamos uma formulação da lectina ConBr (1mg/kg e 10mg/kg) associada ao antibiótico gentamicina. Os resultados das análises in vitro mostraram que a ConBr não diminuiu a viabilidade celular dos macrófagos infectados por Listeria monocytogenes e contribuiu para uma maior eliminação de bactérias intracelulares, sem apresentar um efeito antimicrobiano direto contra L. monocytogenes. Nos testes in vivo, a administração de ConBr reduziu significativamente o recrutamento de leucócitos para a cavidade peritoneal e a quantidade de leucócitos circulantes no sangue. Houve uma diferença significativa na redução da carga bacteriana no fígado, baço, fluido peritoneal e sangue entre os grupos tratados com ConBr (1mg/kg e 10mg/kg) e o grupo infectado não tratado (PBS). A análise da taxa de sobrevivência revelou que 50% dos animais sobreviveram ao tratamento com doses de ConBr (1mg/kg e 10mg/kg), enquanto todos os animais do grupo infectado sem tratamento foram a óbito. Em macrófagos peritoneais e células do baço, citocinas pró-inflamatórias como IL-1β, IL-6 e TNF-α diminuíram sua expressão, enquanto a citocina TGF-β teve sua expressão aumentada. Houve aumento na expressão gênica de IL-10 no tecido esplênico de camundongos administrados com a formulação da lectina ConBr + gentamicina. Em tecido hepático, a ConBr preveniu a lesão tecidual decorrente de esteatose e necrose. Concluímos que o tratamento com ConBr foi capaz de prevenir o processo inflamatório durante a fase aguda da infecção por L. monocytogenes.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - JOAQUIM EVENCIO NETO
Interno - JOSE VITOR MOREIRA LIMA FILHO
Externa à Instituição - VÂNIA MARIA MACIEL MELO - UFC
Externo à Instituição - MÁRCIO VIANA RAMOS - UFC
Externa à Instituição - ROSSANA DE AGUIAR CORDEIRO - UFC