Desenvolvimento de preparação em pó contendo proteases para potencial uso em medicina veterinária
Proteases fúngicas; Aspergillus heteromorphus; Liofilização; Estabilidade enzimática; Medicina veterinária.
As colagenases têm amplo potencial de uso em áreas como couro, cosméticos, alimentos e medicina, especialmente na cicatrização de feridas. Microrganismos, como fungos filamentosos (Aspergillus heteromorphus), são fontes vantajosas dessas enzimas devido à alta produtividade e secreção extracelular. Para melhorar estabilidade e vida útil, avanços tecnológicos vêm sendo aplicados, incluindo métodos de secagem como spray drying e liofilização, que permitem obter preparados enzimáticos em pó de forma eficiente e economicamente viável. Assim, este trabalho teve como objetivo produzir um preparado contendo proteases colagenolíticas de A. heteromorphus com potencial aplicação na medicina veterinária. Inicialmente foi realizada uma análise bibliométrica para avaliar tendências nas aplicações das proteases com atividade colagenolítica na área da medicina veterinária. Para obtenção do extrato enzimático o microrganismo foi cultivado utilizando 3g de farelo de trigo, 20% de umidade, a 30ºC por 96 horas. O extrato bruto contendo a protease A. heteromorphus foi submetido à pré-purificação por precipitação com acetona a 70% e subsequente purificação por cromatografia de troca iônica (DEAE-Sephadex A50) utilizando Tris-HCl 0,1M, PH 8,0. A estabilidade das formulações em pó e líquida das amostras purificadas de proteases foram acompanhadas durante o armazenamento em temperatura de geladeira por 60 dias. A análise bibliométrica apresentou que a colagenase, ainda que aplicada indiretamente, mostra-se uma ferramenta prática, segura e promissora, reforçando a necessidade de estudos mais aprofundados em medicina veterinária. A análise bibliométrica evidencia a liderança asiática e europeia na produção científica, impulsionada por maior acesso a investimentos e tecnologias. Observou-se, porém, baixa interação entre grupos internacionais, indicando que o avanço desse campo depende também da consolidação de redes globais de colaboração. A protease produzida por A. heteromorphus teve uma atividade proteolítica de 58,31 (U/mL) e colagenolítica de 28 (U/mL). Apresentou uma purificação de 5,755 vezes com um rendimento de recuperação de 3,190%, atividade enzimática de 20,018 (U/ml) e uma atividade específica de 25904 U/mg. A formulação em pó liofilizado apresentou maior resistência à degradação, mantendo cerca de 68% da atividade residual, enquanto a formulação líquida exibiu maior suscetibilidade à perda de atividade. Portanto o método de secagem mostrou-se eficaz para melhorar a estabilidade da enzima, possibilitando o uso por mais tempo e viabilizando uma futura aplicação veterinária.