Banca de DEFESA: LÍGIA MARIA GONÇALVES FERNANDES

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LÍGIA MARIA GONÇALVES FERNANDES
DATA : 19/07/2024
HORA: 14:00
LOCAL: sala do PGBA
TÍTULO:

PRODUÇÃO, PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE PROTEASES COM ATIVIDADE COLAGENOLÍTICA DE Aspergillus heteromorphus URM0269 E IMOBILIZAR A ENZIMA EM HIDROGEL BIOPOLIMÉRICO

PALAVRAS-CHAVES:

Aspergillus heteromorphus, Protease com atividade colagenolítica, Fermentação em estado sólido, Fermentação submersa, Biorreator, Cromatografia de troca iônica, Caracterização bioquímica, Cinética e termodinâmica

PÁGINAS: 146
RESUMO:

Esta tese objetivou a produção, purificação e caracterização de proteases com atividade colagenolítica de Aspergillus heteromorphus URM0269 e imobilização da enzima em hidrogel biopolimérico. A produção da enzima utilizou substratos como farelo de trigo para fermentação em estado sólido (FES) e farinha de soja e extrato de levedura para fermentação submersa (FS). Posteriormente, as enzimas foram purificadas através de cromatografia de troca iônica, e a caracterização bioquímica, cinética e termodinâmica foi realizada. A imobilização da enzima foi realizada em hidrogel de galactomanana e k-carragenana foi realizada para avaliar uma possível aplicação biotecnológica. No experimento de FES, observou-se que a produção ocorreu com sucesso, resultando em uma atividade proteolítica de 57,43 U/mL e colagenolítica de 394,6 U/mL. Tanto a protease como a colagenase demonstraram estabilidade em um intervalo de pH (de 5,0 a 10,0) e temperatura (de 20°C a 30°C), com maior atividade em pH 7,0 e 50°C. A serino-protease foi purificada (fator de purificação 7,2, e massa molar 14,7 kDa) e a colagenase foi purificada (fator de purificação 16,1). A produção otimizada de protease e colagenase foi realizada por FS, utilizando um planejamento experimental e escalonada de 50 mL (Erlenmeyer) para 1,5 L em um biorreator de tanque agitado. A produção de colagenase aumentou em função do escalonamento em 343%, enquanto a produção de protease diminuiu 30%. O hidrogel contendo a colagenase purificada imobilizada apresentou a maior atividade colagenolítica (92%) após ser armazenada por 100 dias a 4 °C. Estes resultados demonstram o potencial do Aspergillus heteromorphus URM0269 para produzir protease e colagenase por dois processos fermentativos e substratos distintos com potencial uso na área industrial, bem como a utilização do hidrogel de galactomanana e k-carragenana contendo colagenase imobilizada para possíveis utilizações na indústria médica e farmacêutica

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - TATIANA SOUZA PORTO
Interno - EMMANUEL VIANA PONTUAL
Externo ao Programa - 2170781 - ANDRE FELIPE DE MELO SALES SANTOS - UFRPEExterna à Instituição - MARIA DAS GRAÇAS CARNEIRO DA CUNHA - UFPE
Externo à Instituição - THIAGO PAJEÚ NASCIMENTO - UFPI