Banca de QUALIFICAÇÃO: WELTON AARON DE ALMEIDA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : WELTON AARON DE ALMEIDA
DATA : 28/02/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Recife/PE
TÍTULO:

INVESTIGAÇÃO DE ATIVIDADES ANTIMICROBIANA E INSETICIDA DE PREPARAÇÕES DE FOLHAS DE Plectranthus barbatus

PALAVRAS-CHAVES:

Aedes aegypti; inibidor de trpsina; lectina; Plectranthus barbatus; Streptococcus pyogenes

PÁGINAS: 100
RESUMO:

Plectranthus barbatus (Lamiaceae), conhecida como falso boldo, é utilizada na medicina popular e foi relatada como fonte de compostos antioxidantes e atividades anti-inflamatória, antimicrobiana e inibidora de acetilcolinesterase. Nessa perspectiva, esta Tese hipotetizou que preparações de folhas de P. barbatus podem ser ativas contra microrganismos causadores de doenças e fase larval de mosquito vetor de arboviroses. Assim, o trabalho teve como objetivos caracterizar preparações (extrato, infusão e decocto) de folhas de P. barbatus quanto à presença de metabólitos secundários e proteínas (lectinas e inibidores de tripsina) e investigá-las quanto ao potencial antimicrobiano para bactérias patogênicas e larvicida para Aedes aegypti. Para isso, foram obtidos um extrato de folhas em NaCl 0,15 M, bem como um decoto e uma infusão em água destilada. As três preparações foram investigadas quanto à atividade antimicrobiana pelo método de microdiluição em placa. Foi determinada a CMI (concentração mínima inibitória) do extrato para Streptococcus pyogenes, bem como seu efeito sobre a viabilidade e morfologia das células bacterianas por citometria de fluxo e ação sinérgica utilizando antibióticos comerciais. Em seguida, extrato, infusão e decocto foram estudados quanto ao efeito na sobrevivência das larvas de A. aegypti no terceiro instar (L₃), e caracterizados quanto à presença de metabólitos secundários, lectinas, inibidores de tripsina. O efeito do extrato na atividade das proteases digestivas, permeabilidade da membrana peritrófica e morfofisiologia do intestino médio de larvas de Aedes aegypti, bem como no crescimento da microbiota intestinal e na melanogênese foi determinado. O tratamento com a infusão e o decocto não interferiu no crescimento e sobrevivência das bactérias patogênicas, enquanto o extrato apenas inibiu o crescimento de S. pyogenes (CMI de 2,0 mg/mL). A citometria de fluxo revelou que a maioria das células bacterianas estavam viáveis, indicando predominância de um efeito bacteriostático. Por outro lado, as plotagens de pontos FL1 vs. FL3 mostram que nos tratamentos com o extrato houve deslocamentos das células para valores maiores de FL3-H, indicando dano celular. O extrato em combinação com os antibióticos Cephalexina e Ciprofloxacino apresentou efeito indiferente frente a S. pyogenes. Quando investigados como agentes larvicidas, o extrato matou L₃ (LC₅₀ de 0,48%, m/v), enquanto o decoto e a infusão não afetaram a sobrevivência das larvas. Análise por HPLC identificou ácido caféico e flavonoides nas três preparações. Uma lectina ligadora de ribose/galactose e polipeptídios com atividade inibidora de tripsina (34, 63 e 66 kDa) resistentes à hidrólise pelas proteases do intestino de L₃ foram também encontrados no extrato. A incubação do extrato com proteases larvais não alterou as atividades de lectina e inibidora de tripsina. O tratamento de L₃ com o extrato na CL₅₀ aumentou a permeabilidade da membrana peritrófica e impediu que as larvas passassem para o quarto instar. A morfologia do intestino médio das larvas não foi afetada pelo extrato, mas o conteúdo de polissacarídeos neutros nas células epiteliais foi reduzido. O extrato estimulou in vitro a proliferação da microbiota intestinal de L₃ e aumentou in vivo a produção de melanina pelas larvas. O aquecimento (100°C, 5 h) do extrato acarretou no aumento das atividades de lectina, inibidora de tripsina e larvicida. Em conclusão, o extrato salino foi a preparação de folhas de P. barbatus com melhor atividade, constituindo um novo bioproduto vegetal com potencial farmacológico por inibir o crescimento e causar dano celular em S. pyogenes, e larvicida por inibir proteases digestivas, danificar a morfofisiologia do intestino médio e   induzir disbiose, causando a morte de L₃. Os resultados sugerem que essa atividade pode estar ligada à presença de lectina e inibidor de tripsina.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - EMMANUEL VIANA PONTUAL
Externo à Instituição - NATALY DINIZ DE LIMA SANTOS - UFRPE
Externo à Instituição - THIAGO HENRIQUE NAPOLEÃO - UFPE