Banca de DEFESA: RAQUEL RODRIGUES GONÇALVES

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : RAQUEL RODRIGUES GONÇALVES
DATA : 31/07/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Videoconferência Google Meet
TÍTULO:

DIVERSIDADE E POTENCIAL DE PROMOÇÃO DE CRESCIMENTO DE BACTÉRIAS ENDOFÍTICAS DE DIFERENTES GENÓTIPOS DE PALMA FORRAGEIRA

PALAVRAS-CHAVES:

 Opuntia. Nopalea. BOX-PCR. 16S. Mecanismo.

PÁGINAS: 70
RESUMO:

As bactérias endofíticas são encontradas em todas as espécies vegetais. Plantas em regiões secas, como as cactáceas abrigam microrganismos endofíticos benéficos que podem ser uma solução promissora, pois têm o potencial de aliviar o estresse. Desse modo, o trabalho teve como objetivo avaliar a diversidade e o potencial de bactérias endofíticas isoladas de diferentes genótipos da palma forrageira para promoção de crescimento de plantas. Foram avaliados seis cultivares de palma, IPA-20 (Opuntia ficus-indica), orelha de elefante africana (O. undulata Griffiths), orelha de elefante mexicana (O. stricta Haw), miúda de nopalea, IPA Sertânia, F 21 (todas Nopalea ochenillifera Salm Dyck). Foram isolados 241 estirpes, usando o BOX-PCR para analise de diversidade, culminando em 186 grupos a 100% de similaridade. O sequenciamento do gene 16S rRNA foi feito para bactérias que apresentavam o gene acdS, que codifica para a enzima ACC deaminase. Os grupos formados pelo BOX, foram testados para os mecanismos de promoção de crescimento. A presença do gene acdS e nifH foi detectada por PCR. A quantificação da produção de AIA se deu pelo enriquecimento do meio com L-triptofano e usando reagente Salkowski para coloração e espectrometria para leitura. A solubilização de fosfato foi indicada pelo surgimento de um halo em meio contendo fosfato insolúvel. A produção de sideróforos foi feita em meio sem ferro, utilizando o reagente CAS para coloração e análise por espectrometria. A adaptação osmótica foi testada em três níveis de estresse (10%, 20% e 30% de PEG8000) e analisada por densidade óptica. 24 isolados foram positivos para o gene acdS e enviadas para o sequenciamento. 15 estirpes mostraram 95,04% - 99,76% de similaridade com estirpes descritas no BLAST, identificados em, 3 filos, 4 classes, 7 ordens, 9 famílias e 10 gêneros: Ralstonia, Bacillus, Pseudomonas, Staphylococcus, Desertihabitans, Stenotrophomonas, Priestia, Citrobacter, Micrococcus e Acinetobacter. Na avaliação in vitro, 41 estirpes amplificaram para o gene nifH. 30 estirpes foram produtores de AIA, 15 estirpes conseguiram solubilizar fosfato de cálcio, 75 estirpes produziram sideróforos e 66 isolados suportaram estresse osmótico em ao menos um nível. As estirpes foram agrupadas pela quantidade de mecanismos que produziram, 75 produziram apenas um mecanismo, 55 tinham dois mecanismos, 17 tinham três mecanismos e apenas 4 apresentaram 4 mecanismos. Os testes estatísticos demostram não haver diferença significativa entre a quantidade de isolados dos gêneros da palma, entretanto o gênero Opuntia teve mais isolados produtores de mecanismo que o gênero Nopalea, além de que das 15 estirpes classificadas ao nível de gênero 14 são Opuntia. As bactérias isoladas da palma forrageira demostraram in vitro terem capacidade de serem promotoras de crescimento, entretanto é necessário ainda realizar testes in vivo para comprovar a eficiência em diferentes situações.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - MARIO DE ANDRADE LIRA JUNIOR
Interna - GISELLE GOMES MONTEIRO FRACETTO
Externo à Instituição - ERIC XAVIER DE CARVALHO - IPA