Banca de QUALIFICAÇÃO: PÂMELLA THALITA SOUZA SENA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : PÂMELLA THALITA SOUZA SENA
DATA : 13/12/2022
HORA: 09:00
LOCAL: Prédio Prof. Mateus Rosas Ribeiro
TÍTULO:

Microbioma de Palma Forrageira e Prospecção de Bactéria Endofíticas Promotoras de Crescimento e Mitigadores de Estresse Abiótico

PALAVRAS-CHAVES:

metatrascriptoma; semiárido; seca; temperatura; produção de AIA

PÁGINAS: 34
RESUMO:

A intensificação dos estresses abióticos, como seca e altas temperaturas, é uma ameaça a agricultura cada vez mais presente. Esses estresses têm impactos sobre a produção agrícola de modo geral e em áreas sob baixa precipitação como o semiárido podem ser ainda mais importantes. Culturas como a palma forrageira (Nopalea e Opuntia) ganham destaque nesse cenário pela adaptação a seca e altas temperaturas e a provável interação com microrganismos endofíticos. Este trabalho tem como objetivo investigar o microbioma endofítico de palma forrageira dos gêneros Nopalea e Opuntia cultivada em sequeiro, sob influência de estação chuvosa e seca, e prospectar bactérias endofíticas com capacidade de promover o crescimento e mitigar estresse hídrico quando inoculadas em milho (Zea mays L.). Para isso, serão coletados cladódios das palmas IPA Sertânia (Nopalea cochenillifera), F 21 (Nopalea cochenillifera), Miúda de Nopalea (Nopalea cochenillifera), IPA Clone 20 (Opuntia fucus-indica), Orelha de Elefante Mexicana (Opuntia stricta), e Orelha de Elefante Africana (Opuntia undulata) nas estações seca e de chuva. A amostras terão o RNA extraído para análise de metatranscriptoma do microbioma, pela construção da biblioteca de cDNA usando TruSeq RNA Sample Prep v2 (Illumina, San Diego, CA), um kit de remoção de rRNA Ribo-Zero e primers poli-T para enriquecer poli-A contendo mRNA. As amostras de cDNA serão sequenciadas usando HighSeq 2000. Para a prospecção de bactérias endofíticas, serão isoladas as bactérias endofíticas dos cladódios e purificadas até obtenção de colônias puras. As bactérias terão o DNA extraído, serão avaliados genotipicamente por BOX-PCR, em seguida as estirpes selecionadas terão a diversidade verificada pela Análise de Restrição do DNA Ribossomal Amplificado (ARDRA), os genes nifH e acds amplificados e os representantes dos grupos formados após a restrição enzimática e positivos para amplificação do gene acds terão o gene 16S rRNA sequenciado. As bactérias sequenciadas serão inoculadas em experimentos in vivo em casa de vegetação em milho destinados a verificar cada mecanismo separadamente (produção de AIA pelo cultivo sob déficit hídrico, cultivo sob déficit de N, solubilização de P e produção de sideróforos pelo fornecimento de P e Fe de baixa solubilidade, respectivamente). Os mecanismos serão avaliados pelos parâmetros de crescimento (área foliar, altura, comprimento radicular e diâmetro do colmo), concentração dos nutrientes avaliados e troca de gás da folha (experimento sob estresse hídrico). Os experimentos in vivo terão controles definidas para cada mecanismo. Para promoção de crescimento sob estresse hídrico, irrigação na capacidade de vaso sem inoculação (sem estresse), inoculante comercial com Azospirillum brasilense e sem inoculação serão os controles; para fixação de nitrogênio um controle com 100% da dose recomendada (dose de cobertura equivalente a 61,3 g N vaso-1), controle não inoculado, inoculação com produto comercial com Azospirillum brasilense e um inoculante líquido para milho contendo as cepas Ab-V5 e Ab-V6; para a capacidade de produzir sideróforos, controle com inoculante comercial com Azospirillum brasilense, sem inoculação, aplicação de Fe solúvel e sem Fe; Para a capacidade de solubilizar fosfato, controle com 60 kg ha-1 de P2O5, inoculante comercial com Azospirillum brasilense e sem inoculação. Os resultados serão submetidos a análise de variância e quando apropriado ao teste de Dunnet ao nível de 5% de significância em relação ao tratamento inoculado com o produto comercial.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - CAROLINE MIRANDA BIONDI
Interno - EDIVAN RODRIGUES DE SOUZA
Interno - EMIDIO CANTIDIO ALMEIDA DE OLIVEIRA