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Dissertações |
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DENNY PARENTE DE SÁ BARRETO MAIA LEITE
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Identificação e perfil de resistência fenotípico e genotípico de Staphylococcus aureus isolados de médicos veterinários, tutores, animais e ambiente hospitalar na cidade do Recife, Brasil
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Orientador : TATIANA SOUZA PORTO
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MEMBROS DA BANCA :
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TATIANA SOUZA PORTO
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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JOSÉ GIVANILDO DA SILVA
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Data: 17/02/2022
Ata de defesa assinada:
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A resistência antimicrobiana é uma das dez principais ameaças à saúde pública e entre os agentes patogênicos, Staphylococcus aureus resistente as diferentes classes de antimicrobianos é prioritário para adoção de medidas preventivas. Dessa forma, objetivou-se identificar cães e gatos, seus contactantes humanos (tutores e médicos veterinários), utensílios e superfícies de um ambiente hospitalar veterinário, colonizados por S. aureus e avaliar o perfil genotípico e fenotípico de resistência aos antimicrobianos. A recuperação bacteriana foi feita por meio de swabs estéreis, obtidos no segundo semestre do ano de 2021, em 20 humanos, 13 animais, 14 superfícies ambulatoriais, sete estetoscópios e oito telefones celulares dos médicos veterinários atuantes no Hospital Veterinário da Universidade Federal Rural de Pernambuco. O isolamento foi feito em Ágar Sal Manitol e a identificação preliminar mediante a coloração de Gram e teste de catalase. Posteriormente, a espécie S. aureus foi confirmada por reação em cadeia da polimerase, onde também se investigou o perfil genotípico. Para determinar o perfil fenotípico de resistência foi empregado o método de disco-difusão. Foram obtidos 10 isolados de S. aureus recuperados em 35% (7/20) dos humanos, 10% (1/10) dos cães, 33% (1/3) dos gatos e em 7,14% (1/14) das superfícies inanimadas. O fenótipo S. aureus sensível à oxacilina mecA – positivo (OS-MRSA) foi identificado em um felino. O perfil genotípico dos espécimes bacterianos indicou resistência às diferentes classes de antimicrobianos, com maior frequência de resistência aos beta-lactâmicos e às quinolonas, respectivamente, 80% (8/10) eram detentores do gene blaZ e 90% (9/10) do nor(A). Na avaliação fenotípica, todas as amostras possuíam resistência à penicilina e verificou-se em 80% (8/10) das bactérias, a resistência à eritromicina e a resistência induzida à clindamicina. A presença de determinantes genéticos de resistência aos antimicrobianos aliado ao perfil fenotípico em S. aureus requer atenção tanto para o potencial de transferência desses entre as bactérias quanto para o risco na terapia antimicrobiana em infecções estafilocócicas.
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Antimicrobial resistance is one of the main threats to public health. Staphylococcus aureus resistant to different classes of antimicrobials is a priority for the implementation of preventive measures. Therefore, the objective of the study was to identify the bacterium in dogs and cats, in humans with close contact with these animals (guardians and veterinarians), veterinary instruments and veterinary hospital surfaces environment, to evaluate the genotypic and phenotypic profile of antimicrobial resistance. Bacterial recovery was performed using sterile swabs obtained in the second semester of 2021. 20 humans, 13 animals, 14 ambulatory surfaces, 7 veterinarians’ stethoscopes and 8 veterinarians cell phones samples at the Veterinary Hospital of the Federal Rural University of Pernambuco were collected. Isolation was performed on Agar Salt Mannitol and preliminary identification by Gram stain and catalase test. Subsequently, the species S. aureus was confirmed, and its genotypic profile was investigated by polymerase chain reaction. To determine the phenotypic profile of resistance, the disk-diffusion method was performed. Ten S. aureus isolates were recovered in 35% (7/20) of humans, 10% (1/10) of dogs, 33% (1/3) of cats and 7.14% (1/14) of inanimate surfaces. The phenotype mecA-positive oxacillin-sensitive S. aureus (OS-MRSA) was identified in a feline sample. The genotypic profile of bacterial specimens indicated resistance to different classes of antimicrobials, with a higher frequency of resistance to beta-lactams and quinolones, respectively, 80% (8/10) were holders of the blaZ gene and 90% (9/10) of the nor(A). In the phenotypic evaluation, all samples were resistant to penicillin and 80% (8/10) were resistant to erythromycin. Additionally, induced resistance by erythromycin to clindamycin were verified in the same 8 samples resistant to erythromycin (80%). Finally, the presence of genetic determinants of antimicrobial resistance with the phenotypic profile in S. aureus requires attention. The transfer of these resistance genes between bacteria may occur. Also, the risk of antimicrobial therapy failure in staphylococcal infections is possible.
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JÉSSICA DE CRASTO SOUZA CARVALHO REIS
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Identificação dos fatores de manejo associados à ocorrência do Mormo em equideos, no Nordeste do Brasil.
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Orientador : RINALDO APARECIDO MOTA
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MEMBROS DA BANCA :
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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KARLA PATRICIA CHAVES DA SILVA
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RINALDO APARECIDO MOTA
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Data: 18/02/2022
Ata de defesa assinada:
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Objetivou-se com esta pesquisa realizar um estudo epidemiológico da infecção por Burkholderia mallei em equídeos procedentes de propriedades nos estados de Pernambuco e Alagoas. Para o estudo epidemiológico foram aplicados questionários investigativos em 6 propriedades focos (2017 -2021) e 11 não focos e realizada análise estatística dos fatores associados à ocorrência do Mormo. No estudo epidemiológico, observou-se associação significativa para as seguintes variáveis: objetivo da criação (comércio, esporte e trabalho nas fazendas) (p0,023); ausência de informação a respeito das formas de transmissão da bactéria (p -0,034); não realização de exames periódicos para o diagnóstico do Mormo (p0,029); exigência de exame negativo na compra de equinos (p-0,06); utilização do sistema de criação extensivo (p- 0,027) e, por fim, a menor frequência de higienização das baias (p-001). Os resultados obtidos podem auxiliar na implementação de medidas de manejo que minimizem o risco de transmissão da bactéria, reduzindo os casos da doença na região.
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The aim of this research was to carry out an epidemiological study of Burkholderia mallei infection in equines from properties in Pernambuco and Alagoas States. For the epidemiological study, investigative questionnaires were applied to 6 outbreak properties (2017 -2021) and 11 non-focus properties, and statistical analysis of the factors associated with Glanders's occurrence was performed. In the study, a significant association was observed for the following variables: purpose of breeding (trade, sport and work on farms) (p-0.023); lack of information about the forms of transmission of the bacteria (p-0.034); failure to perform periodic examinations for the diagnosis of Glanders (p-0.029); requirement of a negative test in the purchase of horses (p-0.06); use of the extensive rearing system (p-0.027) and, finally, the lower frequency of cleaning the stalls (p-001). The results obtained can help in the implementation of management measures that minimize the risk of transmission of the bacteria, reducing the cases of the disease in the region
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MARIA DE NAZARE SANTOS FERREIRA
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Estudo sorológico de Toxoplasma gondii e Schmallenberg virus em rebanhos caprinos no estado de Pernambuco
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Orientador : RINALDO APARECIDO MOTA
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MEMBROS DA BANCA :
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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KARLA PATRICIA CHAVES DA SILVA
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RINALDO APARECIDO MOTA
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Data: 18/02/2022
Ata de defesa assinada:
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Objetivou-se nesse estudo ampliar os conhecimentos sobre a presença dos agentes infecciosos Toxoplasma gondii e Schmallenberg virus por meio de estudo sorológico da infecção em rebanhos caprinos no estado de Pernambuco, Brasil. Foram incluídas nesse estudo, 16 propriedades de criação de caprinos, pertencentes a 8 municípios das mesorregiões do Agreste, São Francisco e Sertão do semiárido pernambucano. Foram coletadas 368 amostras de soro sanguíneo de caprinos machos e fêmeas adultos para avaliar a soroprevalência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii, por meio da técnica Reação de Imunofluorescência Indireta e para avaliar a ocorrência de anticorpos IgG antiSchmallenberg virus, por meio da técnica Ensaio de Imunoabsorção Enzimática Indireto. Dos animais analisados, 15,48% (57/368) foram positivos para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii e 87,5% (14/16) das propriedades estudadas tiveram animais positivos para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii. Nenhuma das 368 amostras analisadas foram positivas para anticorpos antiSchmallenberg vírus. Os resultados obtidos atualizam a epidemiologia de Toxoplasma gondii e Schmallenberg virus em rebanhos caprinos do estado de Pernambuco. Schmallenberg virus não é um agente importante nos rebanhos caprinos pernambucanos apesar de evidências clínicas compatíveis com essa virose e Toxoplasma gondii continua ocorrendo de forma endêmica em Pernambuco, ocasionando infecções em rebanhos caprinos com possibilidade de causar impacto na saúde animal e pública.
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This study aimed to broaden the knowledge regarding the presence of the infectious agents Toxoplasma gondii and Schmallenberg virus by means of serological surveys in goat herds in the state of Pernambuco, Brazil. In this study 16 goat raising properties were included, located in 8 cities of the mesoregions of Agreste, São Francisco, and Sertão of the semiarid region of the Pernambuco state. A total of 368 serum samples were collected from adult goats, both male and female, to evaluate seroprevalence of IgG anti-Toxoplasma gondii antibodies, by means of the Indirect Immunofluorescence technique, and to evaluate the occurrence of IgG anti-Schmallenberg virus antibodies by employment of Indirect Enzymatic Immunosorbent Assay. The results showed that, 15.48% (56/368) of the analysed animals were positive for the presence of IgG anti-Toxoplasma gondii antibodies and 87.50% (14/16) of the evaluated properties had at least one positive animal for the presence of IgG antiToxoplasma gondii antibodies. None of the 368 analysed samples was positive for anti-Schmallenberg virus antibodies. The obtained results update the epidemiology of Toxoplasma gondii and Schmallenberg virus in goat herds of the Pernambuco state. Schmallenberg virus is not an important agent in goat herds, even though there is clinical evidence of the occurrence of this disease, and Toxoplasma gondii continues to endemically occur in Pernambuco, causing infections in goat herds that can impact animal and public health.
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NIELY PRISCILA CORREIA DA SILVA
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Desenvolvimento de nanopartículas poliméricas de quitosana com óleo essencial como alternativa antimicrobiana contra a mastite bovina
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Orientador : PABYTON GONCALVES CADENA
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MEMBROS DA BANCA :
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ELIZABETH SAMPAIO DE MEDEIROS
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MARILIA RIBEIRO SALES CADENA
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PABYTON GONCALVES CADENA
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Data: 22/02/2022
Ata de defesa assinada:
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A Mastite Bovina (MB) é uma inflamação no tecido do úbere que afeta a produção do leite. Os principais agente etiológicos causadores da MB são bactérias patogênicas, e seu principal tratamento é feito por meio de antibioticoterapia, mas, o uso indiscriminado desses medicamentos tem favorecido a seleção de bactérias com mutações que as tornam resistentes, além de aumentar o risco de resíduos desses compostos no leite. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de produtos antimicrobianos nanoencapsulados em quitosana produzidos a partir da combinação de óleos essenciais de plantas comerciais comumente utilizados no tratamento de mastite bovina. Trinta cepas de Staphylococcus aureus foram coletadas e isoladas de leite dos bovinos diagnosticados com mastite. Todas as cepas foram avaliadas quanto à resistência a diferentes tipos de óleos essenciais com possível atividade antimicrobiana através do método de disco-difusão. Entre os demais óleos testados os que apresentaram resultados consistentes e eficientes foram os OEs de Cymbopogon flexuosus, Thymus vulgaris e Origanum vulgaris. Os testes de concentração inibitória mínima (MIC) foram realizados e tiveram seus valores definidos variando de 0,313 mg/mL a 1,250 mg/mL, para confirmar a atividade antibacteriana dos óleos, em seguida a sinergia da atividade antimicrobiana dos diferentes OEs associados foi analisada pelo delineamento simplex-centroid-design como base para avaliar a interação entre os compostos químicos, e indicou que os óleos de O. vulgare e T. vulgaris combinados apresentaram resultados mais consistentes contra as quatro cepas de S. aureus. A partir desses resultados foi produzido um creme contendo a mistura desses óleos no qual sugere-se que seja considerado um percentual de 75% de O. vulgare e 25% de T. vulgaris na composição para otimizar a atividade antimicrobiana da mistura dos óleos. Posteriormente, nanopartículas foram produzidas por processo de nanoprecipitação por agitação magnética contendo uma solução de quitosana em ácido acético. As nanopartículas produzidas apresentaram-se homogêneas, fluídas, sem alteração de cor e odor e tamanho de 43 nm a 220 nm caracterizando-se assim como nanopartículas. Os valores de PDI variaram de 0,08 mV a 0,2 mV o que indica boa dispersão das nanopartículas, já o potencial zeta (ζ - mv) apresentou valores de -1,48 mV a 6,47mV, considerando o potencial zeta com carga negativa de - 297 mV da S. aureus, é sugerido que as nanopartículas com carga positiva sejam utilizadas como alternativa antimicrobiana, por eliminar possíveis repulsões eletrostáticas entre a nanopartícula e a S. aureus permitindo assim a inibição da bactéria. Além disso as nanopartículas poderão ser incorporadas na base do creme permitindo assim uma liberação controlada desses OEs no sítio de ação desejado.
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Bovine Mastitis (BM) is an inflammation of the udder tissue that affects milk production. The main etiological agents causing MB are pathogenic bacteria, and their main treatment is through antibiotic therapy, but the indiscriminate use of these drugs has favored the selection of bacteria with mutations that make them resistant, in addition to increasing the risk of residues of these compounds in milk. Therefore, the present work aimed to develop antimicrobial products nanoencapsulated in chitosan produced from the combination of essential oils from commercial plants commonly used in the treatment of bovine mastitis. Thirty strains of Staphylococcus aureus were collected and isolated from the milk of cattle diagnosed with mastitis. All strains were evaluated for resistance to different types of essential oils with a possible antimicrobial activity using the disk diffusion method. Among the other oils tested, the ones that presented consistent and efficient results were the EOs of Cymbopogon flexuosus, Thymus vulgaris, and Origanum vulgaris. Minimum inhibitory concentration (MIC) tests were performed and their values were defined ranging from 0.313 mg/mL to 1.250 mg/mL, to confirm the antibacterial activity of the oils, then the synergy of the antimicrobial activity of the different associated EOs was analyzed by the simplex-centroid-design design as a basis for evaluating the interaction between the chemical compounds, and indicated that the combined O. vulgare and T. vulgaris oils showed more consistent results against the four strains of S. aureus. Based on these results, a cream containing a mixture of these oils was produced, in which it is suggested that a percentage of 75% of O. vulgare and 25% of T. vulgaris be considered in the composition to optimize the antimicrobial activity of the mixture of oils. Subsequently, nanoparticles were produced by nanoprecipitation process by magnetic stirring containing a solution of chitosan in acetic acid. The produced nanoparticles were homogeneous, fluid, without color and odor change and size from 43 nm to 220 nm, thus characterizing themselves as nanoparticles. The PDI values ranged from 0.08 mV to 0.2 mV, which indicates good dispersion of the nanoparticles, while the zeta potential (ζ - mv) presented values from -1.48 mV to 6.47 mV, considering the zeta potential with the negative charge of -297 mV of S. aureus, it is suggested that nanoparticles with positive charge be used as an antimicrobial alternative, by eliminating possible electrostatic repulsions between the nanoparticle and S. aureus, thus allowing the inhibition of the bacterium. In addition, the nanoparticles can be incorporated into the base of the cream, thus allowing a controlled release of these EOs at the desired site of action.
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IVYSON DA SILVA EPIFANIO
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VIGILÂNCIA DO SARS-COV-2 EM ANIMAIS DE COMPANHIA NA REGIÃO METROPOLITANA DO RECIFE, ESTADO DE PERNAMBUCO
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Orientador : DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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MEMBROS DA BANCA :
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JULIANA ARENA GALHARDO
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DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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Data: 23/02/2022
Ata de defesa assinada:
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No final do ano de 2019 foram notificados pela China à Organização Mundial de Saúde (OMS) o aparecimento de vários casos de pneumonia, cujo agente etiológico foi posteriormente confirmado como o novo coronavírus, denominado de SARS-CoV-2, vírus de origem animal que se adaptou a humanos, causando uma das maiores pandemias já registradas na história da humanidade. O objetivo desta pesquisa foi realizar a vigilância do SARS-CoV-2 em animais de companhia na Região Metropolitana do Recife - PE, com interface à Saúde Única. Trata-se de um estudo longitudinal prospectivo em cães ou gatos realizado em residências cujos tutores estavam em isolamento domiciliar, com diagnóstico laboratorial confirmado para SARS-CoV-2 através de RT-qPCR. Durante o período de dezembro de 2020 a julho de 2021 foram coletadas 31 amostras de swabs orofaríngeos e retais de cães e gatos e encaminhadas para o Laboratório TECSA, localizado na cidade de Belo Horizonte - MG, onde foram realizados os testes de diagnóstico molecular RT-q-PCR quanto à presença de RNA específico para SARS-CoV-2 em dois genes alvo (N1 e N2). Todas as amostras foram testadas em duplicata e era considerado positivo quando ambas as testagens fossem positivas. Ainda, as amostras positivas eram testadas novamente para confirmação da presença do SARS-CoV-2. Dos animais testados, dois gatos (RE-02F e RE-04F) testaram positivo para SARS-CoV-2 em RT-qPCR. Ambos tiveram swabs orofaríngeos positivos, RE-04F teve uma carga viral mais alta (alvo N1: CT 31,65, 11,362 número de cópias de RNA / µL; alvo N2: CT 33,46, 19,2 número de cópias / µL) em comparação com RE-02F (alvo N1: CT 34,49, 1,87 número de cópias de RNA / µL; alvo N2: CT 34,38, 10,65 número de cópias de RNA / µL). O animal denominado RE-04F também teve um alvo positivo por swab retal (alvo N2: CT 36,7, 2,41 número de cópias de RNA /µL). A amplificação específica de ACTB foi demonstrada em todos os ensaios. A infecção por SARS-CoV-2 detectada nos gatos possivelmente tenha ocorrido devido ao contato próximo gato-humano com proprietários positivos, incluindo compartilhar a mesma cama e interagir sem proteção durante o isolamento. Diante dos achados sugere-se que as pessoas infectadas devem tomar os mesmos cuidados em relação ao distanciamento com os animais, medida já adotada pela prevenção da transmissão do novo coronavírus entre humanos para evitar a propagação da infecção aos animais de companhia.
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At the end of 2019, China reported to the World Health Organization (WHO) the emergence of several cases of pneumonia, whose etiological agent was later confirmed as the new coronavirus, called SARS-CoV-2, a virus of animal origin that has adapted to humans, causing one of the biggest pandemics ever recorded in human history. The objective of this research was to carry out the surveillance of SARS-CoV-2 in pets in the Metropolitan Region of Recife - PE with an interface with ONE HEALTH. This is a prospective longitudinal study carried out with dogs or cats in selected homes whose tutors were in home isolation with laboratory diagnosis by RT-QPCR for the SARS-CoV2. During the period from December 2020 to July 2021, 31 samples of oropharyngeal swabs were collected and taken to the TECSA Laboratory, located in the city of Belo Horizonte - MG, where RT-q-PCR molecular diagnostic tests were performed for the presence of RNA specific for SARS-CoV-2 in two target genes (N1 and N2). All samples were tested twice and the result was considered positive when both tests resulted positive. Furthermore, the positive samples were tested once again to confirm the presence of SARS-CoV-2. Among the animals tested, two cats (RE-02F and RE-04F) tested positive for SARS-CoV-2 by RT-qPCR. Both had positive oropharyngeal swabs, RE-04F had a higher viral load (target N1: CT 31.65, 11,362 number of RNA copies /µL; target N2: CT 33.46, 19.2 number of copies/µL) in comparison to RE-02F (target N1: CT 34.49, 1.87 number of RNA copies / µL; target N2: CT 34.38, 10.65 RNA copies / µL). The animal named RE-04F also had a positive target by rectal swab (target N2: CT 36.7, 2.41 number of RNA copies /µL). Specific amplification of ACTB was demonstrated in all assays. The infection by SARS-Co-2 detected in the cats possibly occurred due to close cat-to-human contact with positive owners, including sharing the same bed and interacting without protection during isolation. In light of the findings, it is suggested that infected people have the same care regarding the distance from animals, a measure that is already taken to prevent the transmission of the new coronavirus between humans, to avoid infection of pets.
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BEATRIZ PAZ DO NASCIMENTO SOARES
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DETECÇÃO DE Giardia sp. e Cryptosporidium sp. EM CÃES COM INFECÇÃO NATURAL POR Leishmania Leishmania infantum
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Orientador : LEUCIO CAMARA ALVES
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MEMBROS DA BANCA :
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LEUCIO CAMARA ALVES
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GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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CARLOS ADRIANO DE SANTANA LEAL
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RENATA PIMENTEL BANDEIRA DE MELO
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Data: 24/02/2022
Ata de defesa assinada:
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A leishmaniose visceral canina é uma doença crônica, sistêmica e imunomediada, com ampla distribuição mundial, e com grande importância para a saúde pública. Dentre os principais sinais clínicos manifestados estão as lesões cutâneas, onicogrifose, sinais oculares e linfadenopatia, podendo ocorrer ainda problemas gastrointestinais, como diarreia crônica. Diferentes coinfecções têm sido reportadas, particularmente hemoparasitos, porém poucos abordam as infecções por parasitos gastrointestinais. O objetivo deste estudo foi a caracterização molecular de patógenos gastrointestinais oportunistas em cães com diagnóstico positivo para leishmaniose visceral provenientes do Estado de Pernambuco. Para tanto, material fecal de 20 animais foram processadas pela Reação de Imunofluorescência Direta. A frequência de coinfecção nas amostras analisadas foi de 15% (3/20) sem, entretanto, associação com quadros diarreicos ou histórico de problemas gastrointestinais. A análise dos dados com relação ao sexo não revelou diferença estatisticamente significante. Este é o primeiro estudo a relatar coinfecção por Leishmania Leishmania infantum e Giardia sp. em cães no Nordeste brasileiro. Espera-se com a conclusão deste trabalho contribuir para um melhor entendimento do perfil parasitológico dos cães naturalmente infectados por Leishmania (L.) infantum e sua importância para a saúde única.
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Canine visceral leishmaniasis is a chronic, systemic and immune-mediated disease, with wide distribution worldwide, and with great importance for public health. Among the main clinical signs manifested are skin lesions, onychogryphosis, ocular signs and lymphadenopathy, as well as gastrointestinal problems such as chronic diarrhea. Different co-infections have been reported, particularly hemoparasites, but few address gastrointestinal parasite infections. The aim of this study was the molecular characterization of opportunistic gastrointestinal pathogens in dogs with a positive diagnosis for visceral leishmaniasis from the State of Pernambuco. Therefore, fecal material from 20 animals was processed by the Direct Immunofluorescence Reaction. The frequency of coinfection in the analyzed samples was 15% (3/20) without, however, association with diarrheal conditions or history of gastrointestinal problems. Data analysis regarding gender did not reveal a statistically significant difference between the studied variables. This is the first study to report co-infection by Leishmania Leishmania infantum and Giardia sp. in dogs in northeastern Brazil. The conclusion of this work is expected to contribute to a better understanding of the parasitological profile of dogs naturally infected by L. (L.) infantum and its importance for unique health
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MARIA EDUARDA LUIZ COÊLHO DE MIRANDA
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Vascularização arterial da base do encéfalo de Bradypus variegatus Schinz, 1825 (Mammalia: Pilosa)
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Orientador : MARLEYNE JOSE AFONSO ACCIOLY LINS AMORIM
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MEMBROS DA BANCA :
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MARLEYNE JOSE AFONSO ACCIOLY LINS AMORIM
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GERALDO JORGE BARBOSA DE MOURA
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ADELMAR AFONSO DE AMORIM JUNIOR
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PRISCILLA VIRGINIO DE ALBUQUERQUE
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Data: 25/02/2022
Ata de defesa assinada:
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O suprimento sanguíneo para o encéfalo possui características singulares e de grande relevância, que são associadas a sensibilidade, especialidade e importância que o tecido nervoso possui. Dentre essas características se destaca a presença de um circuito arterial localizado na base do cérebro, de onde provém o suprimento sanguíneo para o encéfalo. Esse circuito possui modificações em relação aos diferentes grupos de vertebrados. Segundo o modelo morfológico ele pode ser classificado em três tipos (tipo1, tipo2 e tipo 3) e segundo o modelo filogenético pode ser classificado em três estágio(inicial, intermediário e final). Onde ao analisar um grupo amostral de 11 animais adultos da espécie Bradypus variegatus, verificou-se que a irrigação deste mamífero é suprida pelos sistemas carotidico, rostralmente, e basilar, caudalmente, sendo classificado como tipo 2 alfa, segundo a classificação morfológica e intermediário, em relação ao modelo de desenvolvimento filogenético.
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Mostrar Abstract
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The blood supply to the brain has unique and highly relevant characteristics, which are associated with the sensitivity, specialty and importance that nervous tissue has. Among these characteristics, the presence of an arterial circuit located at the base of the brain stands out, from where the blood supply to the brain comes. This circuit has modifications in relation to different groups of vertebrates. According to the morphological model it can be classified into three types (type 1, type 2 and type 3) and according to the phylogenetic model it can be classified into three stages (initial, intermediate and final). Where, when analyzing a sample group of 11 adult animals of the species Bradypus variegatus, it was found that the irrigation of this mammal is supplied by the carotid, rostrally, and basilar, caudally systems, being classified as type 2 alpha, according to the morphological and intermediate classification, in relation to the phylogenetic development model.
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MARIA VANESSA DA SILVA
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AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DA MELATONINA SOBRE ASPECTOS REPRODUTIVOS DE RATAS WISTAR SUBMETIDAS AO CONSUMO CRÔNICO DE ÁLCOOL
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Orientador : VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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ALVARO AGUIAR COELHO TEIXEIRA
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ISMAELA MARIA FERREIRA DE MELO
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Data: 25/02/2022
Ata de defesa assinada:
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O consumo crônico de álcool é um fator de risco para a saúde materna e fetal durante a gestação. Dados indicam prevalência de índices de 9,8% na população mundial. A partir dessa perspectiva esse fato pode levar a síndrome do alcoolismo fetal e no aumento da produção de espécies reativas de oxigênio levando a desordens fetais. Por outro lado, a placenta produz uma variedade de citocinas que quando reguladas são essenciais para uma gravidez saudável. Porém, quando desregulada, podem interromper as vias de desenvolvimento fetal e placentária, ocasionando deformidades congênitas e complicações. Atualmente tem-se verificado o efeito protetor da melatonina contra os malefícios ocasionados pelas espécies reativas de oxigênio e sua ação sobre as citocinas inflamatórias. Assim, esta pesquisa teve por objetivo analisar os efeitos da administração exógena da melatonina durante a gestação sobre os aspectos histomorfométricos e imunohistoquímicos em placentas de ratas submetidas ao consumo crônico de álcool. Utilizou-se 30 ratas albinas divididas em 3 grupos: Controle – 10 ratas prenhes que não receberam álcool; Álcool – 10 ratas prenhes submetidas ao consumo crônico de álcool; Álcool + Mel - 10 ratas prenhes submetidas ao consumo de álcool associado a melatonina. O álcool foi administrado na dose de 3g/kg por gavagem, enquanto a melatonina foi aplicada a noite na dose de 0,8mg/kg por via intraperitoneal. As placentas foram pesadas e analisadas histopatologicamente, morfometricamente e imunohistoquimicamente. Foi observada uma redução significativa no peso placentário no grupo Álcool, enquanto, no grupo Álcool + Mel as médias se igualaram ao Controle. As análises histopatológicas exibiram uma desorganização na zona do labirinto, ao mesmo tempo que a morfometria indicou redução nos vasos maternos e fetais no grupo Álcool. Nos animais dos grupos Controle e Álcool + Mel não se observou alterações histológicas ou morfométricas significativas. As análises imunohistoquímicas revelaram forte marcação para os fatores TNF α e VEGF nas placentas das fêmeas do grupo álcool, quando comparado às placentas das fêmeas dos grupos controle e álcool + mel, o que foi confirmado pela quantificação desses fatores. Com relação à marcação pelo PCNA, para proliferação celular, as fêmeas do grupo controle e do grupo álcool + mel apresentaram os maiores percentuais de células positivas, diferindo significativamente das placentas das fêmeas do grupo álcool, que apresentou o menor percentual. Assim, conclui-se que a melatonina apresenta um potencial de ação protetora sobre os danos oxidativo do etanol em placenta.
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Chronic alcohol consumption is a risk factor for maternal and fetal health during pregnancy. Data indicate a prevalence rate of 9.8% in the world population. From this perspective this fact can lead to fetal alcohol syndrome and increased production of reactive oxygen species leading to fetal disorders. On the other hand, the placenta produces a variety of cytokines that when regulated are essential for a healthy pregnancy. However, when unregulated, they can interrupt fetal and placental development pathways, causing congenital deformities and complications. Currently, the protective effect of melatonin against the harm caused by reactive oxygen species and its action on inflammatory cytokines has been verified. Thus, this research aimed to analyze the effects of exogenous administration of melatonin during pregnancy on histomorphometric and immunohistochemical aspects in placentas of rats submitted to chronic alcohol consumption. We used 30 albino rats divided into 3 groups: Control – 10 pregnant rats that did not receive alcohol; Alcohol – 10 pregnant rats submitted to chronic alcohol consumption; Alcohol + Honey - 10 pregnant rats submitted to alcohol consumption associated with melatonin. Alcohol was administered at a dose of 3g/kg by gavage, while melatonin was administered at night at a dose of 0.8mg/kg intraperitoneally. Placentas were weighed and analyzed histopathologically, morphometrically and immunohistochemically. A significant reduction in placental weight was observed in the Alcohol group, while in the Alcohol + Honey group the means were equal to the Control. Histopathological analyzes showed disorganization in the labyrinth zone, while morphometry indicated a reduction in maternal and fetal vessels in the Alcohol group. In the animals of the Control and Alcohol + Honey groups, no significant histological or morphometric alterations were observed. Immunohistochemical analyzes revealed strong marking for the factors TNF α and VEGF in the placentas of females from the alcohol group, when compared to the placentas of females from the control and alcohol + honey groups, which was confirmed by the quantification of these factors. Regarding PCNA staining for cell proliferation, the females of the control group and the alcohol + honey group had the highest percentage of positive cells, significantly differing from the placentas of the females of the alcohol group, which had the lowest percentage. Thus, it is concluded that melatonin has a potential for protective action on the oxidative damage of ethanol in the placenta.
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ESTEFANI SANTANA DO NASCIMENTO
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Avaliação dos efeitos letal e subletais do óleo oriundo do acidente ocorrido no litoral pernambucano em invertebrados marinhos
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Orientador : MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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EMMANUEL VIANA PONTUAL
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ELLEN CORDEIRO BENTO DA SILVA
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Data: 25/02/2022
Ata de defesa assinada:
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O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito do óleo bruto que contaminou o litoral brasileiro. Para isso foram realizados ensaios ecotoxicológicos utilizando como organismo teste o copépodo bentônico Tisbe biminiensis. Os bioensaios tiveram duração de um mês, com troca de água semanal. Foi utilizado 0,5 g de óleo coletado em quatro diferentes praias do litoral pernambucano (Enseada dos Corais, Xaréu, Cupe e Paiva) e 40 mL de água do mar filtrada e ração básica para peixes de aquário macerado. Ao final do período de exposição, o conteúdo foi fixado e corado com Rosa de Bengala para posterior contagem e determinação dos endpoints (número de copépodos, número populacional e percentual de fêmeas). Observações no estereomicroscópio revelaram manchas nos indivíduos, devido a este fato, um novo bioensaio foi realizado para registro fotográfico com as mesmas condições do anterior, usando apenas óleo de duas praias (Enseada dos corais e Paiva), sem uso do corante para melhor visualização ao microscópio. Houve diminuição significativa no número de copépodos (nos grupos expostos ao óleo coletado em Xaréu, Enseada dos Corais e Paiva) e no número populacional (em todas as amostras de óleo testadas). Além disso, verificou-se uma feminização da população, confirmado pelo aumento significativo da proporção de fêmeas em amostras de óleo coletadas na praia de Paiva e Enseada dos Corais. Através dos registros fotográficos verificamos que o óleo é ingerido pela espécie estudada, parte do óleo ingerido contamina o animal, e a outra parte é fragmentada e sai nas pelotas fecais ficando disponível para outros organismos. Sendo assim, concluímos que o óleo que contaminou o litoral brasileiro tem um elevado poder tóxico para o organismo testado.
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The objective of this study was to evaluate the effect of crude oil that contaminated the Brazilian coast. For this, ecotoxicological tests were carried out using the benthic copepod Tisbe biminiensis as a test organism. The bioassays lasted one month, with a weekly water change. It was used 0.5 g of oil collected in 4 different beaches of the Pernambuco coast (Enseada dos Corais, Xaréu, Cupe and Paiva) and 40 mL of filtered sea water and basic food for macerated aquarium fish. At the end of the exposure period, the content was fixed and stained with Rose Bengal for later counting and determination of endpoints (number of copepods, population number and percentage of females). Stereomicroscopic observations revealed spots on the individuals, due to this fact, a new bioassay was performed for photographic record with the same conditions as the previous one, using only oil from two beaches (Enseada dos Corais and Paiva), without the use of dye, for better results. microscope view. there was a significant decrease in the number of copepods (in the groups exposed to the oil collected in Xaréu, Enseada dos Corais and Paiva) and in the population number (in all the oil samples tested). In addition, there was a feminization of the population, since there was a significant increase in the proportion of females in oil samples collected at Paiva beach and Enseada dos Corais. Through the photographs we verified that the oil was ingested, part of the ingested oil contaminates the animal, and the other part is fragmented and leaves in the fecal pellets, becoming available for other organisms. Therefore, we conclude that the oil that contaminated the Brazilian coast has a high toxic power for the tested organism.
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LETÍCIA MAXIMIANO BEZERRA DE SIQUEIRA
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Avaliação histopatológica e imunohistoquímica das lesões cutâneas de cães com infecção natural por Leishmania (Leishmania) infantum (Nicolle, 1908)
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Orientador : LEUCIO CAMARA ALVES
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MEMBROS DA BANCA :
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LEUCIO CAMARA ALVES
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FABRICIO BEZERRA DE SA
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VALDEMIRO AMARO DA SILVA JUNIOR
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EDNA MICHELLY DE SA SANTOS
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Data: 25/02/2022
Ata de defesa assinada:
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A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença de caráter zoonótico e transmissão vetorial e de grande importância e impacto na saúde pública mundial. O presente estudo objetivou a avaliação histopatológica e imunohistoquímica das lesões cutâneas de cães com infecção natural por Leishmania (Leishmania) infantum. Para tanto, foram utilizados 30 cães atendidos no serviço ambulatorial de doenças parasitárias do Hospital Veterinário da Universidade Federal Rural de Pernambuco e do município de Petrolina, com diagnóstico parasitológico positivo para L. infantum. As coletas de fragmento cutâneo foram realizadas com auxílio de um punch cirúrgico. Todos os animais possuíam alguma dermatopatia como sinal clínico cutâneo. A análise histopatológica de lesões ulceradas revelou que em 63,3% (19/30), das amostras analisadas apresentavam padrão inflamatório granulomatoso composto por macrófagos, linfócitos e plasmócitos em 68,43% (13/19), enquanto 31,57% dos animais apresentaram infiltrado piogranulomatoso composto por macrófagos, linfócitos, plasmócitos e neutrófilos. Foram encontradas formas amastigotas de L. infantum na imunohistoquímica em 43,3% (13/30) das amostras analisadas. Diante do exposto, pode-se concluir que a histopatologia pode auxiliar como método diagnóstico, reforçando a importância da pele na leishmaniose canina e a imunohistoquímica como método diagnóstico complementar em cães positivos para L. infantum que apresentam dermatite ulcerativa ou descamativa.
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Canine Visceral Leishmaniasis (CANL) is a disease of zoonotic evaluation and vector-borne transmission with a huge importance and impact on public health worldwide. The present study aimed at the histopathological and immunohistochemical evaluation of the cutaneous lesions of dogs with natural infection by Leishmania (Leishmania) infantum. For that study were used 30 dogs treated at the outpatient parasitic disease service at the Veterinary Hospital of the Federal Rural University of Pernambuco and in the county of Petrolina, with a positive parasitological diagnosis for L. infantum. The skin fragment collections were performed with the aid of a surgical punch. All animals had some dermatopathy as a clinical cutaneous sign. The histopathological analysis of ulcerated lesions revealed that 63.3% (19/30) of the analyzed samples had a granulomatous inflammatory pattern composed of macrophages, lymphocytes and plasma cells in 68.43% (13/19), while 31.57% of the animals showed pyogranulomatous infiltrate composed of macrophages, lymphocytes, plasma cells and neutrophils. Amastigote forms of L. infantum were found on immunohistochemistry in 43.3% (13/30) of the samples analyzed. Given the above, it can be concluded that histopathology can help as a diagnostic method, reinforcing the importance of the skin in canine leishmaniasis and immunohistochemistry as a complementary diagnostic method in positive dogs for L. infantum that have ulcerative or desquamative dermatitis
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ANTHONY MARCOS GOMES DOS SANTOS
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Atuação da melatonina sobre receptores de andrógenos e seu reflexo na histofisiologia testicular de ratos adolescentes induzidos ao alcoolismo crônico
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Orientador : ALVARO AGUIAR COELHO TEIXEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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ALVARO AGUIAR COELHO TEIXEIRA
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VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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ISMAELA MARIA FERREIRA DE MELO
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Data: 28/02/2022
Ata de defesa assinada:
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O alcoolismo é uma doença crônica multifatorial causada pelo consumo contínuo de álcool. Tal condição atinge pessoas em diferentes classes sociais, idade e gênero, causando consequências sociais, morais, psicológicas, econômicas e fisiológicas, aumentando os níveis de morbidade e mortalidade mundialmente. As alterações fisiológicas causadas pelo alcoolismo têm sua patogênese mediada pelo estresse oxidativo. Essas moléculas promovem danos a diversas estruturas como proteínas e lípidos e ainda promovem a mobilização de citocinas pró inflamatórias, podendo levar a morte celular, necrose e perca ou declínio da função do órgão. Tratamento com antioxidantes tem demonstrado efeitos protetores e reversivos causados pelo alcoolismo nos diferentes órgãos. O presente trabalho teve como objetivo analisar os efeitos da administração de melatonina exógena sobre alguns aspectos morfométricos, hormonais e imunohistoquímicos nos testículos de ratos jovens induzidos ao alcoolismo crônico. Foram utilizados 30 ratos Wistar com 40 dias de idade, divididos nos seguintes grupos: I: (controle): ratos sem tratamento com álcool; II: ratos submetidos ao consumo crônico de solução hidroalcoólica a 25%; III: ratos submetidos ao consumo crônico de solução hidroalcoólica a 25% e tratados simultaneamente com melatonina. Os animais do grupo II e III receberam solução hidroalcoólica a 25% durante o período de 60 dias, após 4 semanas de adaptação com concentrações crescentes de álcool (5, 10, 15 e 20%). A melatonina foi administrada via intraperitoneal, numa dose de 10 mg/kg do dia 30 ao dia 60 do experimento. As dosagens hormonais revelaram redução significativa da testosterona sérica nos animais do grupo álcool, quando comparado aos demais grupos experimentais as dosagens hormonais revelaram redução significativa da testosterona sérica nos animais do grupo álcool, quando comparado aos demais grupos experimentais. A análise histopatológica dos testículos dos animais do grupo álcool apresentaram desorganização do epitélio seminífero adquirido um aspecto de degeneração tecidual, enquanto o grupo álcool melatonina apresentou epitélio seminífero integro com elementos celulares bem definidos. Houve redução do peso corporal, dos testículos e do índice organossomático nos animais que receberam álcool em relação ao controle e os que foram tratados com melatonina.
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Alcoholism is a multifactorial chronic disease caused by the continuous consumption of alcohol. This condition affects people of different social classes, age and gender, causing social, moral, psychological, economic and physiological consequences, increasing morbidity and mortality worldwide. The physiological changes caused by alcoholism have their pathogenesis mediated by oxidative stress. These molecules promote damage to various structures such as proteins and lipids and also promote the mobilization of pro-inflammatory cytokines, which can lead to cell death, necrosis and loss or decline of organ function. Antioxidant treatment has shown protective and reversive effects caused by alcoholism in different organs. The present study aimed to analyze the effects of exogenous melatonin administration on some morphometric, hormonal and immunohistochemical aspects in the testes of young rats induced by chronic alcoholism. Thirty 40-day-old Wistar rats were used, divided into the following groups: I: (control): rats without alcohol treatment; II: rats submitted to chronic consumption of 25% hydroalcoholic solution; III: rats submitted to chronic consumption of 25% hydroalcoholic solution and treated simultaneously with melatonin. The animals in groups II and III received a 25% hydroalcoholic solution for a period of 60 days, after 4 weeks of adaptation with increasing concentrations of alcohol (5, 10, 15 and 20%). Melatonin was administered intraperitoneally at a dose of 10 mg/kg from day 30 to day 60 of the experiment. Hormone dosages revealed a significant reduction in serum testosterone in the animals of the alcohol group, when compared to the other experimental groups. The histopathological analysis of the testes of the animals of the alcohol group showed disorganization of the seminiferous epithelium, acquiring an aspect of tissue degeneration, while the melatonin alcohol group showed intact seminiferous epithelium with well-defined cellular elements. There was a reduction in body weight, testes and organosomatic index in animals that received alcohol compared to control and those treated with melatonin.
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SILVIA FERNANDA DE ALCANTARA
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Fígado: Aspectos anatômicos, fatores de estática e divisões principais dos vasos da porta hepática de Bradypus variegatus SCHINZ, 1825 (Mammalia: Pilosa)
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Orientador : MARLEYNE JOSE AFONSO ACCIOLY LINS AMORIM
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MEMBROS DA BANCA :
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MARLEYNE JOSE AFONSO ACCIOLY LINS AMORIM
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GERALDO JORGE BARBOSA DE MOURA
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VALDEMIRO AMARO DA SILVA JUNIOR
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ADELMAR AFONSO DE AMORIM JUNIOR
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Data: 28/02/2022
Ata de defesa assinada:
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Os bichos-preguiça são mamíferos pertencentes à ordem Pilosa, e vêm sofrendo com ações antrópicas devastadoras. Esses animais possuem hábito arborícola e dieta pautada a folhas e brotos, a qual pode conter teor tóxico em sua composição, enaltecendo a importância de um melhor conhecimento dos sistemas orgânicos, destacando o que se refere a atividade hepática nesses animais. Nesse contexto, propôs-se realizar uma descrição morfológica e vascular do fígado, em diferentes condições e técnicas, com o intuito de colaborar com a literatura, preservação e clínica médica das preguiças. Para tal, foram utilizados 22 animais, sendo 21 cadáveres oriundo Centro de Triagem de Animais Silvestres do CETASe um vivente em condições de semi-cativeiro, pertencente ao Instituto Preguiça de Garganta Marrom do Parque Estadual Dois Irmãos, todos da espécie Bradypus variegatus. Foram realizadas análises em 16 animais no pavilhão de Anatomia, com o intuito de descrição morfológica. Assim sendo, os espécimes foram fixados com formaldeído a 20% e conservados em solução salina a 30%, para posterior análise, tal como esqueletopia, sintopia, histologia e descrição vascular. Em 13 dos 16 animais, foi realizada a técnica de injeção de látex, com o intuito de obter uma visualização fidedigna dos vasos, onde o látex acrescido com a coloração vermelha e injetado na artéria hepática de quatro animais, destacando a vascularização do órgão, assim como foi injetado na veia porta hepática de cinco animais na coloração azul, para visualização do sistema venoso portal, por fim foi canulado o ducto biliar em quatro animais com a mesma substância já descrita e coloração verde, até o preenchimento das vias biliares. Posteriormente foram fixados em formaldeído a 20% e conservados em solução salina a 30% para posterior dissecação. Em um animal foi realizada a técnica de vinilite, onde o vinil foi reparado e mantido em recipiente de vidro por 48h, em seguida foi acrescido tinta óleo amarela para o ducto colédoco, azul para veia porta hepática e vermelho para artéria hepática, a solução corada foi injetada em cada vaso descrito acima, em seguida o órgão foi retirado e colocado em um recipiente com água por 24h, logo após exposto a solução de HCL (ácido clorídrico) por 5 dias, em seguidaretirado para análise dos vasos. Com relação a histopatologia foram usados fragmentos do fígado de quatro bichos-preguiça, foram fixados em formaldeído tamponado a 10% e submetido ao processo e inclusão de parafina, para realização de cortes sagitais de 4 um, em seguida corados com hematoxilina-eosina e posteriormente analisados. Em uma fêmea saudável em condições semi-cativeiro, foi realizado o exame de tomografia, para tal, o animal foi sedado e colocado em decúbito ventral no tomógrafo para realização do exame. Posteriormente as imagens foram analisadas com intuito de obter uma visão fiel do órgão em sua posição e localização natural e condições do fígado. O fígado apresentou duas faces, uma convexa em direção ao diafragma (face diafragmática) e outra côncava voltada para os órgãos abdominais (face visceral), com quatro lobos principais, lobo esquerdo, lobo direito, lobo quadrado e lobo caudado com seu processo caudado, apresentando-se na região abdominal cranial do antímero direito, cranialmente entre a 7ª e 9ª costela e caudalmente entre 13ª e 14ª costela, o que variou entre macho e fêmea. Na vascularização hepática, foi observado que, ao adentrar no órgão a artéria hepática dividiu-se em dois ramos, um direito e outro esquerdo os quais subdividiram-se emitindo ramos de menor calibre para todos os lobos encontrados no fígado da preguiça comum. Nas vias biliares, o ducto hepático resultou da confluência de três ramos que confluíram-se para formar um ramo comum. De acordo com os achados histopatológicos do fígado foram observados, focos necróticos, o que pode estar associado a alguma anormalidade do aporte vascular, processos inflamatórios o qual pode esta relacionada à defesa do órgão no combate de agentes estranhos, assim como dilatações nos sinusóides, e encapsulamento de patógeno.
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Sloths are mammals belonging to the order Pilosa, and they have been suffering from devastating anthropic actions. These animals have an arboreal habit and a diet based on leaves and shoots, which may contain toxic content in their composition, highlighting the importance of a better understanding of the organic systems, highlighting the hepatic activity in these animals. In this context, a morphological and vascular description of the liver was proposed, under different conditions and techniques, in order to collaborate with the literature, preservation and medical clinic of sloths. For this, 22 animals were used, 21 corpses from the CETAS Wild Animal Screening Center and one living in semi-captive conditions, from the Instituto Preguiça de Garganta Marrom, in the Dois Irmãos State Park, all of them belonging to the Bradypus variegatus species. Analyzes were performed on 16 animals in the Anatomy pavilion, aiming for the morphological description. Therefore, the specimens were fixed with 20% formaldehyde and preserved in 30% saline solution for further analysis, such as skeletopy, syntopy, histology and vascular description. In 13 of the 16 animals, the technique of injection of latex was performed, in order to obtain a reliable visualization of the vessels, where the latex, added with the red color and injected into the hepatic artery of four animals, highlighting the vascularization of the organ, as well as as it was injected into the hepatic portal vein of five animals in blue color, intending to visualize the portal venous system. Finally, the bile duct was cannulated in four animals with the same substance already described and in green color, until the bile ducts were filled. Subsequently, they were fixed in 20% formaldehyde and preserved in 30% saline solution for later dissection. In one animal, the vinylite technique was performed, where the vinyl was repaired and kept in a glass container for 48 hours. Then, yellow oil paint was added to the common bile duct, blue to the hepatic portal vein and red to the hepatic artery. The stained solution was injected into each vessel described above, then the organ was removed and placed in a container with water for 24 hours, soon after exposed to HCL (hydrochloric acid) solution for 5 days, then removed for analysis of the vessels. With regard to histopathology, liver fragments from four sloths were used, fixed in 10% buffered formaldehyde and subjected to the process and inclusion of paraffin, for sagittal sections of 4 um, then stained with hematoxylin-eosin and later analyzed. A tomography examination was performed in a healthy female in semi-captivity conditions. The animal was sedated and placed in the ventral decubitus position on the tomography scanner for the examination. Subsequently, the images were analyzed in order to obtain a faithful view of the organ in its natural position and location and liver conditions. The liver presented two faces, one convex towards the diaphragm (diaphragmatic face) and the other concave facing the abdominal organs (visceral face), with four main lobes; left lobe, right lobe, square lobe and caudate lobe with its caudate process, appearing in the cranial abdominal region of the right antimere, cranially between the 7th and 9th ribs and caudally between the 13th and 14th ribs, which varied between male and female. In the hepatic vascularization, it was observed that, when entering the organ, the hepatic artery divided into two branches, one right and the other left, which were subdivided emitting smaller-caliber branches to all the lobes found in the liver of the common sloth. In the bile ducts, hepatic duct resulted from the confluence of three branches that converged to form a common branch. According to the histopathological findings of the liver, necrotic foci were observed, which may be associated with some abnormality of the vascular supply, inflammatory processes which may be related to the defense of the organ in the fight against foreign agents, as well as dilatations in the sinusoids, and pathogen encapsulation. In the bile ducts, hepatic duct resulted from the confluence of three branches that converged to form a common branch. According to the histopathological findings of the liver, necrotic foci were observed, which may be associated with some abnormality of the vascular supply, inflammatory processes which may be related to the defense of the organ in the fight against foreign agents, as well as dilatations in the sinusoids, and pathogen encapsulation.
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MARIA AUREA DE AZEVEDO NOGUEIRA
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Avaliação de antígenos do vírus da artrite encefalite caprina obtidos a partir de células bovinas (CFBov) e sua aplicação na Imunodifusão em Gel de Agar (IDGA)
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Orientador : JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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SERGIO ALVES DO NASCIMENTO
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Data: 27/05/2022
Ata de defesa assinada:
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O imunodiagnóstico aplicado à identificação da artrite encefalite caprina (CAE) é considerado a melhor alternativa para a prevenção e controle da infecção, possibilitando a detecção dos animais infectados na fase precoce. O processo de produção dos antígenos é fundamental para a realização desse teste, o que torna de suma importância o desenvolvimento de pesquisas que contribuam com sua produção. Desta forma, objetivou-se com esta pesquisa produzir antígeno viral através do uso de células fibroblásticas de bovinos (CFBov) infectadas com o vírus da artrite encefalite caprina (CAEV), sem tratamento prévio e tratadas com os detergentes Dodecil Sulfato de Sódio (SDS), Triton X-100 e Tween 20, para utilização em testes de IDGA. Foram utilizadas 270 amostras de soro obtidas no banco de soro do Laboratório de Virologia Animal (LAVIAN) da Universidade Federal Rural de Pernambuco, oruindas de caprinos oriundos de rebanhos do Estado, soronegativos e soropositivos testados para CAEV. Ao analisar os resultados constatou-se que 38 amostras foram positivas (14,07%) e 232 negativas (85,92%) quando testadas com antígeno puro sem nenhum tratamento; 39 amostras foram positivas (14,44%) e 231 negativas (85,55%) quando tratadas com o detergente SDS; 35 amostras foram positivas (12,96%) e 235 negativas (87,03%) quando tratadas com o detergente Triton X-100 e 36 amostras foram positivas (13,33%) e 234 negativas (86,66%) quando tratadas com o detergente Tween 20.
A sensibilidade e especificidade para cada teste foi calculada referente ao antígeno comercial e os testes alcançaram 94,7% e 99,6% para o antígeno puro, 97,4% e 98,7% para o SDS, 97,2% e 98,7% para o Triton X-100 e 97,3% e 99,1% para o Tween 20, sendo o SDS o mais eficiente. O coeficiente Kappa foi 1,0. A produção de antígenos a partir de células bovinas e sua purificação utilizando SDS como detergente, mostrou-se como uma alternativa de alta qualidade e eficaz para o diagnóstico da CAE.
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Mostrar Abstract
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The immunodiagnosis applied to the identification of caprine arthritis encephalitis (CAE) is considered the best alternative for the prevention and control of infections, enabling the detection of infected animals at an early stage. The production process of the antigens is fundamental for the performance of this test, which makes the development of research contributing to obtaining it, extremely important. The objective of this research was to produce viral antigen through bovine fibroblastic cells (CFBov) infected with the caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) for use in IDGA tests, without previous treatment and treated with Sodium Duodecyl Sulfate (SDS) detergents, Triton X-100 and Tween 20. 270 serum samples obtained from the serum bank of the Animal Virology Laboratory (LAVIAN) of the Federal Rural University of Pernambuco, from goats from local herds, seronegative and seropositive tested for CAEV, were used. When analyzing the results, it was found that 38 samples were positive (14.07%) and 232 negative (85.92%) when tested with pure antigen without any treatment; 39 samples were positive (14.44%) and 231 negative (85.55%) when treated with the SDS detergent; 35 samples were positive (12.96%) and 235 negative (87.03%) when treated with Triton X-100 detergent; and 36 samples were positive (13.33%) and 234 negative (86.66%) when treated with the Tween 20 detergent. The sensitivity and specificity for each treatment was calculated and the tests reached relating to commercial antigen respectively, 94.7% and 99.6% for pure antigen; 97.4% and 98.7% for SDS; 97.2% and 98.7% for Triton X-100; and, 97.3% and 99.1% for Tween 20, with SDS being the most efficient. The kappa coeficiente was 1.0. The production of antigens from bovine cells and their purification using SDS as a detergent, proved to be a high quality and effective alternative for the diagnosis of CAE.
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ISADORA MELO DAS NEVES
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Etapas prévias à soltura de macacos-prego-galego (Sapajus flavius): aplicando protocolos comportamentais e sanitários.
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Orientador : MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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LEUCIO CAMARA ALVES
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MONICA MAFRA VALENCA
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Data: 27/06/2022
Ata de defesa assinada:
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Aproveitar os alimentos disponíveis, evitar a predação e manter-se saudável representam os padrões comportamentais básicos, sujeitos às pressões seletivas que moldam a vida dos animais. São diversas as estratégias dos primatas para evitar a predação, encontrar e usufruir do potencial energético da sua dieta e continuar vivo. Os macacos-prego galegos (Sapajus flavius) são primatas pertencentes à família Cebidae, apresentam porte médio, são arborícolas e endêmicos da Mata Atlântica do nordeste brasileiro. Encontram-se nas listas, nacional e internacional, das espécies ameaçadas de extinção, sendo a caça e a fragmentação de seus habitats, os principais fatores que impactam sua sobrevivência. Mesmo sob cuidado humano, fora de seu meio natural, os primatas particularmente encontram-se fora das condições adequadas de bem estar. Para evitar a extinção, entre as medidas de conservação, a reintrodução se apresenta com o objetivo de restabelecer populações de espécies que possuem grande importância para a biodiversidade local. Foi pensando nisso, que a presente dissertação desenvolveu protocolos para avaliar as respostas de uma colônia cativa, formada por sete indivíduos, residente no zoológico do Parque Estadual de Dois Irmãos, no Recife/PE. Entre os protocolos, foram testados novos itens consumidos pela espécie na natureza e realizadas simulações para apresentação de presas vivas e taxidermizadas. Todos os animais reagiram de forma adequada, dentro do esperado em relação aos dois tipos de enriquecimento ambiental. Também foi desenvolvido um protocolo sanitário para avaliar a saúde dos animais, por meio da confecção de uma árvore decisória que avalia critérios clínicos e biológicos, visando o aumento da chance de sobrevivência dos indivíduos na natureza e a mitigação de riscos epidemiológicos na preparação de uma possível soltura em um programa de reintrodução, tanto para as espécies reintroduzidas como para as espécies nativas dos possíveis locais de soltura.
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Nourishing from available food, avoiding predation and staying healthy represent the basic behavioral patterns, subject to the selective pressures that shape the lives of animals. There are several primate strategies to avoid predation, find and obtain the energy potential of their diet and stay alive. The blond capuchin monkeys (Sapajus flavius) are primates belonging to the Cebidae family, are medium-sized, arboreal and endemic to the Atlantic Forest of northeastern Brazil. They are on national and international lists of endangered species, with hunting and the fragmentation of their habitats being the main factors that impact their survival. Even under human care, outside of their natural environment, primates particularly find themselves out of adequate conditions of well-being. In order to avoid extinction, among the conservation measures, reintroduction is presented with the objective of reestablishing populations of species that have great importance for local biodiversity. With this in mind, the present dissertation developed protocols to evaluate the responses of a captive colony, formed by seven individuals, residing in the zoo of the “Parque Estadual de Dois Irmãos”, in Recife/PE. Among the protocols, new items consumed by the species in nature were tested and simulations were performed for the presentation of live and taxidermized prey. All animals reacted adequately, as expected, in relation to the two types of environmental enrichment. A sanitary protocol was also developed to evaluate the health of the animals, through the creation of a decision tree that evaluates clinical and biological criteria, aiming at increasing the chance of survival of individuals in nature and mitigating epidemiological risks in the preparation of a possible release in a reintroduction program, both for reintroduced species and for native species of the release sites.
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BEATRIZ DE AQUINO MARQUES DA COSTA
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PRODUÇÃO DE PROTEASES COLAGENOLÍTICAS DE Aspergillus heteromorphus URM 0269 E EXTRAÇÃO EM SISTEMAS DE DUAS FASES AQUOSAS PARA APLICAÇÃO NA HIDRÓLISE DE COLÁGENO
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Orientador : TATIANA SOUZA PORTO
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MEMBROS DA BANCA :
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EMMANUEL VIANA PONTUAL
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LEANDRO FRAGOSO LINS
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TATIANA SOUZA PORTO
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THIAGO PAJEÚ NASCIMENTO
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Data: 29/07/2022
Ata de defesa assinada:
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O aumento da exigência dos consumidores quanto aos ingredientes e propriedades benéficas de alimentos, suplementos e cosméticos tem levado diferentes segmentos industriais a buscarem a inclusão de ingredientes funcionais em suas formulações, a fim de tornar seus produtos mais atraentes à população. Desta forma, os peptídeos de colágeno surgem como um potencial agente capaz de auxiliar na prevenção e tratamento de doenças crônicas como diabetes, hipertensão, câncer, entre outras doenças inflamatórias e autoimunes. No entanto, as etapas empregadas e os elementos necessários para a produção de peptídeos de colágeno acabam por tornar todo o processo mais oneroso, o que limita sua aplicação e consumo. Por isso, a busca por alternativas que venham a baratear uma ou mais etapas da produção desses peptídeos são constantemente incentivadas, levando à investigação da utilização de fungos filamentosos para a produção de proteases, de meios mais simples de extração e purificação dessas enzimas e do potencial de resíduos de pescado como fontes de colágeno. Nesse contexto, este trabalho objetivou produzir e purificar proteases colagenolíticas a partir de Aspergillus heteromorphus URM 0269 usando fermentação em estado sólido (FES) para aplicação na produção de peptídeos de colágeno. Para isso, o micro-organismo foi cultivado sob condições de fermentação pré-determinadas (3g de farelo de trigo, 20% de umidade, 30°C, 96 horas de fermentação) para obtenção do extrato enzimático bruto. O extrato bruto foi então submetido a um planejamento fatorial (23) para purificação de proteases colagenolíticas utilizando o sistema de duas fases aquosas (SDFA), tendo como variáveis independentes: massa molar de PEG (MPEG), concentração de PEG (CPEG) e concentração de sulfato (Csulf). Posteriormente, as proteases extraídas por SDFA PEG/sulfato foram avaliadas quanto a sua estabilidade em diferentes níveis de pH (4,0 – 11,0). A enzima foi particionada preferencialmente para a fase rica em PEG cujo maior fator de purificação e recuperação (PF = 6,256 e Y= 404,432%) foi obtido usando MPEG 8000 g/mol, CPEG 30%, Csulf 10%. A avaliação do efeito do pH sobre a atividade enzimática revelou que a extração em SDFA foi capaz de aumentar a faixa de pH com alta atividade enzimática (7,0 – 11,0) em comparação com o observado no extrato bruto (6,0 – 7,0). Além disso, as amostras enzimáticas de SDFA apresentaram-se mais estáveis em relação ao extrato bruto, mantendo pelo menos 80% de sua atividade proteásica após 20 horas de incubação para todos os níveis de pH analisados, exceto o pH 11,0. Esses resultados demonstram que o SDFA, uma técnica simples, rápida e econômica de extração beneficia a atividade e estabilidade das proteases produzidas por Aspergillus heteromorphus URM0269, parâmetros essenciais para o aumento do tempo de prateleira e viabilidade da utilização dessas enzimas na produção de peptídeos de colágeno.
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The increase in consumer demand regarding the ingredients and beneficial properties of foods, supplements and cosmetics has led different industrial segments to seek the inclusion of functional ingredients in their formulations, in order to make their products more attractive to the population. In this way, collagen peptides emerge as a potential agent capable of assisting in the prevention and treatment of chronic diseases such as diabetes, hypertension, cancer, among other inflammatory and autoimmune diseases. However, the steps used and the methods necessary for the production of collagen peptides make the process more expensive, which limits its application and consumption. Therefore, the search for alternatives that may make one or more stages of the production of these peptides cheaper is constantly encouraged, leading to the investigation of the use of filamentous fungi for the production of proteases, of simpler means of extraction and purification of these enzymes and of the potential of fish waste as sources of collagen. In this context, this work aimed to produce and purify collagenolytic proteases from Aspergillus heteromorphus URM 0269 using solid state fermentation (FES) for application in the production of collagen peptides. For this, the microorganism was cultivated under predetermined fermentation conditions (3g of wheat bran, 20% humidity, 30°C, 96 hours of fermentation) to obtain the crude enzymatic extract. The crude extract was then submitted to a factorial design (23) for the purification of collagenolytic proteases using the two-phase aqueous system (ATPS), having as independent variables: PEG molar mass (MPEG), PEG concentration (CPEG) and of sulfate (Csulf). Subsequently, the proteases extracted by PEG/sulfate SDFA were evaluated for their stability at different pH levels (4.0 – 11.0). The enzyme was partitioned preferentially to the PEG-rich phase whose highest purification and recovery factor (PF = 6.256 and Y= 404.432%) was obtained using MPEG 8000 g/mol, CPEG 30%, Csulf 10%. The evaluation of the effect of pH on the enzymatic activity revealed that the extraction in SDFA was able to increase the pH range with high enzymatic activity (7.0 – 11.0) compared to that observed in the crude extract (6.0 – 7.0). Furthermore, the enzymatic samples of SDFA were more stable in relation to the crude extract, maintaining at least 80% of their protease activity after 20 hours of incubation for all pH levels analyzed, except for pH 11.0. These results demonstrate that SDFA, a simple, fast and economical extraction technique, benefits the activity and stability of proteases produced by Aspergillus heteromorphus URM0269, essential parameters for increasing the shelf life and feasibility of using these enzymes in the production of collagen peptides. .
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GABRIELLY HILÁRIO DA SILVA
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PEPTÍDEOS ANTI-HIPERTENSIVOS EXTRAÍDOS DA CIANOBACTÉRIA Arthrospira platensis
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Orientador : RAQUEL PEDROSA BEZERRA
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MEMBROS DA BANCA :
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ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO
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LIVIA SENO FERREIRA CAMARGO
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RAQUEL PEDROSA BEZERRA
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ROMERO MARCOS PEDROSA BRANDÃO COSTA
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TATIANA SOUZA PORTO
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Data: 25/08/2022
Ata de defesa assinada:
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A hipertensão arterial é uma doença silenciosa e com etiologia relacionada a fatores genéticos, hábitos de vida e ambientais; e pode levar ao surgimento de doenças cardiovasculares. Alguns tratamentos farmacológicos são comumente utilizados na prática clínica, incluindo o uso de fármacos da classe de inibidores da ECA. Apesar de apresentarem boas respostas para a diminuição da pressão arterial, pacientes crônicos apresentam diversos efeitos colaterais, Alternativas naturais que mitiguem os efeitos colaterais, melhorando a qualidade de vida dos pacientes com uso crônico de anti-hipertensivos, são alvo desta investigação. A cianobactéria Arthrospira (Spirulina) platensis têm se destacado por produzir diferentes bioativos de importância biotecnológica aplicado à saúde como por exemplo peptídeos com atividade anti-hipertensiva. O objetivo deste estudo foi produzir, extrair e avaliar a atividade inibitória da enzima conversora de angiotensina-I (ECA) de peptídeos obtidos da biomassa da A. platensis após processo de digestão gastrointestinal (DGI) in vitro. A cianobactéria foi cultivada em condição autotrófica e a biomassa celular submetida à DGI in vitro em condições fisiológicas simuladas, com as enzimas pepsina e pancreatina, sequencialmente. Em seguida, o sobrenadante foi ultrafiltrado com membrana de cut-off de 3 e 10 KDa, sendo as frações: AP-I: >10KDa, AP-II: 3-10KDa e AP-III < 3KDa. A fração com maior atividade iECA foi purificada por FPLC-Superdex G-75 e SOURCE™ RPC, respectivamente, e os picos obtidos foram determinados quanto a concentração peptídica e atividade iECA. Todas as frações ultrafiltradas apresentaram alta atividade inibitória da ECA, em que a AP-III obteve maior grau de inibição de 90,43±0,89% e IC50 = 0,001 mg/mL, A fração AP-III foi submetida a purificação por sistema AKTA Superdex-G75 obtendo-se quatro picos (FS-I, II, III e IV). Além disso, realizamos uma revisão sistemática e meta- análise para verificar a resposta nefroprotetora do uso da Spirulina (Arthrospira) ou C- ficocianina em contexto de doenças renais em modelos pré-clínicos. O tratamento com Spirulina (Arhrospira) ou C-ficocianina apresentou uma melhora nas concentrações séricas (mg/dL) dos quatro biomarcadores de função renal analisados: creatinina, ácido úrico, ureia e proteinúria. Também houve diminuição dos níveis pressóricos sistólicos em contexto de hipertensão arterial. Estes resultados corroboram com a potencial utilização destes peptídeos na formulação de drogas anti-hipertensivas ou alimentos nutracêuticos, como também sugere maiores investigações sobre o uso da Spirulina para o tratamento de doenças renais.
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Hypertension is a silent disease with etiology related to genetic, lifestyle, and environmental factors; and it can lead to the development of cardiovascular diseases. Some pharmacological treatments are commonly used in clinical practice, including the use of ACE inhibitors. Although they exhibit positive blood pressure lowering responses, chronic patients have several side effects. Natural alternatives that mitigate side effects and improve the quality of life of patients with chronic use of antihypertensive drugs are the target of this investigation. The cyanobacterium Arthrospira (Spirulina) platensis has been highlighted for producing different bioactives of biotechnological importance applied to health, such as peptides with antihypertensive activity. The objective of this study was to produce, extract and evaluate the angiotensin-I converting enzyme (ACE) inhibitory activity of peptides obtained from A. platensis biomass after gastrointestinal digestion (DGI) process in vitro. The cyanobacterium was grown in autotrophic condition and the cell biomass subjected to DGI in vitro under simulated physiological conditions with the enzymes pepsin and pancreatin sequentially. The supernatant was then ultrafiltered with 3 and 10 KDa cut-off membranes, and the fractions were: AP-I: >10KDa, AP-II: 3-10KDa and AP-III < 3KDa. The fraction with the highest iECA activity was purified by FPLC-Superdex G-75 and SOURCE™ RPC, respectively, and the peaks obtained were determined for peptide concentration and iECA activity. All ultrafiltered fractions exhibited high ACE inhibitory activity, in which AP-III obtained the highest degree of inhibition of 90.43±0.89% and IC50 = 0.001 mg/mL, The AP-III fraction was subjected to purification by AKTA Superdex-G75 system obtaining four peaks (FS-I, II, III and IV). These were reapplied on a reverse phase FPLC column generating six peaks (Fr-I, II. III. IV, V). In addition, we performed a systematic review and meta-analysis to verify the nephroprotective response of using Spirulina (Arthrospira) or C-phycocyanin in the context of renal diseases in preclinical models. Treatment with Spiriluna (Arhrospira) or C-ficocyanin presented an improvement in serum concentrations (mg/dL) of the four biomarkers of renal function analyzed: creatinine, uric acid, urea, and proteinuria. There was also a decrease in systolic blood pressure levels in the context of hypertension. These results corroborate the potential use of these peptides in the formulation of antihypertensive drugs or nutraceutical foods, as well as suggest further investigations on the use of Spirulina for the treatment of renal diseases.
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TALITA NAYARA BEZERRA LINS
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NÍVEIS SÉRICOS DE 25-HIDROXIVITAMINA-D EM CÃES COM INFECÇÃO NATURAL POR Leishmania infantum (Nicollle, 1908)
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Orientador : GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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MEMBROS DA BANCA :
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GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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EDNA MICHELLY DE SA SANTOS
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Data: 31/08/2022
Ata de defesa assinada:
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A leishmaniose visceral canina é uma zoonose, causada por protozoários do gênero Leishmania transmitidos por insetos flebotomíneos, sendo o cão doméstico o seu principal reservatório urbano no Brasil. Nos cães a resposta mediada por TH2 irá favorecer a produção de anticorpos pelos linfócitos B, que poderá desencadear o surgimento dos sinais clínicos da doença, como: dermatites, linfadenomegalia, problemas articulares, hiporexia, diarreia, vômito, febre, problemas oftalmológicos, além de alterações sistémicas como hepatomegalia e nefropatias. Sabe-se que o papel da vitamina D vai além do sistema musculoesquelético e sua hipovitaminose estaria relacionada a doenças infecciosas, enteropatias crônicas, pancreatite, neoplasias, polineurites e doença renal crônica. Devido ao seu papel como cofator para reações nas células B e T, catalisando citocinas pró inflamatórias. Este estudo teve por objetivo analisar os níveis séricos de vitamina D relacionando as manifestações clínicas apresentadas por cães naturalmente infectados por Leishmania infantum. Foram utilizados soros de 43 animais, divididos em dois grupos: Grupo 1, composto por 10 animais, triados através do teste imunocromatográfico, sendo todos não reagentes. E Grupo 2, composto por 33 animais, no qual o critério de inclusão foi a presença de testes imunocromatográficos reagentes e exames parasitológicos de medula apresentando amastigotas de Leishmania sp. Para ambos os grupos foram realizadas a mensuração dos níveis de vitamina D pelo método de quimioluminescência. Quanto aos níveis de vitamina D, dentre os animais do Grupo 1 os níveis séricos variaram entre 20 ng/mL e 52,2 ng/mL e entre os animais do Grupo 2 a variação foi <20 ng/mL e >50ng/mL. Os dados observados neste estudo sugeriram que em animais naturalmente infectados com Leishmania sp. com níveis de vitamina D <20 ng/mL a 50 ng/mL houve predominância de onicogrifose, enquanto que em animais com níveis > 50 ng/mL a predominância foi para dermatite descamativa.
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Canine visceral leishmaniasis is a zoonosis, caused by protozoa of the genus Leishmania, transmitted by sandflies, and the domestic dog is its main urban reservoir in Brazil. In dogs, the TH2-mediated response will favor the production of antibodies by B lymphocytes, which may trigger the onset of clinical signs of the disease, such as: dermatitis, lymphadenopathy, joint problems, hyporexia, diarrhea, vomiting, fever, ophthalmological problems, in addition to systemic changes such as hepatomegaly and nephropathies. It is known that the role of vitamin D goes beyond the musculoskeletal system and its hypovitaminosis would be related to infectious diseases, chronic enteropathies, pancreatitis, neoplasms, polyneuritis and chronic kidney disease. Due to its role as a cofactor for reactions in B and T cells, catalyzing pro-inflammatory cytokines. This study aimed to analyze the serum levels of vitamin D relating the clinical manifestations presented by dogs naturally infected by Leishmania infantum. Sera from 43 animals were used, divided into two groups: Group 1, composed of 10 animals, screened through the immunochromatographic test, all of which were non-reactive. In Group 2, composed of 33 animals, in which the inclusion criteria were immunochromatographic reagent tests and parasitological examination of the bone marrow showing amastigote forms of Leishmania sp. For both groups, vitamin D levels were measured by the chemiluminescence method. As for vitamin D levels, among the Group 1 animals the serum levels varied between 20 ng/mL and 52.2 ng/mL and among the Group 2 animals the variation was between <20ng/mL and >50ng/mL, of which 39 .39% had hypovitaminosis with levels below 20ng/mL. The data observed in this study suggest that animals naturally infected with Leishmania sp. with vitamin D levels <20 ng/mL and 50 ng/mL there was a predominance of onychogryphosis, while in animals with levels >50ng/mL there was a predominance of desquamative dermatitis.
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JULIANA KELLY URTIGAS DE SOUZA
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Potencial de peptidases extraídas do látex da Calotropis procera como agente imunoterápico
contra Salmonella ssp
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Orientador : JOSE VITOR MOREIRA LIMA FILHO
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MEMBROS DA BANCA :
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MÁRCIO VIANA RAMOS
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ANISIO FRANCISCO SOARES
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BETTY MANCEBO DORVIGNY
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JOSE VITOR MOREIRA LIMA FILHO
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VALDEMIRO AMARO DA SILVA JUNIOR
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Data: 16/11/2022
Ata de defesa assinada:
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Proteases isoladas do látex da planta medicinal de Calotropis procera têm sido investigadas em diferentes modelos de inflamação. Considerando estudos anteriores que indicaram propriedades anti-inflamatórias de uma mistura de proteases chamada LPp2, neste trabalho, uma mistura de proteases denominada LPp3, ainda pouco estudada, foi investigada em um modelo de salmonelose experimental. Em um dos modelos utilizados de infecção, culturas de macrófagos foram expostas a diferentes concentrações de LPp3 e infectadas com Salmonella enterica Sor. Typhimurium. No modelo de infecção in vivo, camundongos Swiss foram infectados, via intraperitoneal, com S. Typhimurium e, a seguir, tratados (via endovenosa) com LPp3. Os resultados mostraram que LPp3 não possui ação antibacteriana direta contra Salmonella in vitro e foi incapaz de aumentar a viabilidade celular de macrófagos infectados. Nos ensaios in vivo, após 6 h de infecção, os animais tratados com LPp3 (10 mg/kg) tiveram uma maior carga bacteriana no baço e fígado em relação aos grupos controles não tratados (PBS) ou administrados com Dexametasona. Os tratamentos com LPp3 (1,5 e 10 mg/kg) inibiram o recrutamento de leucócitos para o sítio infeccioso após o inóculo de Salmonella, na cavidade peritoneal. Contudo, os níveis de expressão gênica de citocinas inflamatórias medidos no baço, tais como, TNF-alfa e IL1-beta estavam significativamente aumentados nos animais tratados com 10 mg/kg em relação aos animais infectados e não tratados. Concluiu-se que LPp3, assim como já demonstrado para LPp2, é rica em enzimas com forte ação anti-inflamatória, o poderia explicar a menor eliminação de bactérias em dosagens mais elevadas.
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Proteases isolated from the latex of the medicinal plant of Calotropis procera have been investigated in different models of inflammation. Considering previous studies that indicated anti-inflammatory properties of a mixture of proteases called LPp2, in this work, a mixture of proteases called LPp3, still little studied, was investigated in an experimental salmonellosis model. Thus, macrophage cultures were exposed to different concentrations of LPp3 and infected with Salmonella enterica Sor. Typhimurium. In another infection model, Swiss mice were infected intraperitoneally with S. Typhimurium and then treated (intravenously) with LPp3. The results showed that LPp3 has no direct antibacterial action against Salmonella in vitro and was unable to increase the cell viability of infected macrophages. In the in vivo assays, after 6 h of infection, animals treated with LPp3 (10 mg/kg) had a higher bacterial load in the spleen and liver compared to untreated control (PBS) or Dexamethasone-administered groups. Treatments with LPp3 (1, 5 and 10 mg/kg) inhibited the recruitment of leukocytes to the infectious site after Salmonella inoculum in the peritoneal cavity. However, gene expression levels of inflammatory cytokines measured in the spleen, such as TNF-alpha and IL1-beta, were significantly increased in animals treated with 10 mg/kg relative to infected/untreated animals. It was concluded that LPp3, as already demonstrated for LPp2, is rich in enzymes with strong anti-inflammatory action, which could explain the lower elimination of bacteria at higher doses.
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TALYTA NALDESKA DA SILVA
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AVALIAÇÃO DOS EFEITOS ANTIMICROBIANOS DO EXTRATO SALINO E LECTINA DE FOLHAS DE Schinus terebinthifolia RADDI SOBRE Staphylococcus
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Orientador : EMMANUEL VIANA PONTUAL
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MEMBROS DA BANCA :
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EMMANUEL VIANA PONTUAL
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LIDIANE PEREIRA DE ALBUQUERQUE
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NATALY DINIZ DE LIMA SANTOS
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THIAGO HENRIQUE NAPOLEÃO
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Data: 30/11/2022
Ata de defesa assinada:
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Os antibióticos utilizados atualmente para tratamento de mastite podem afetar a saúde do úbere e levar ao surgimento de microrganismos resistentes. O extrato salino de folhas de Schinus terebinthifolia (ES) e a lectina isolada a partir dele (SteLL) têm ação antimicrobiana previamente relatada. O objetivo desta Dissertação foi: 1. Realizar uma revisão narrativa sobre a ação de compostos de origem vegetal contra agentes causadores de mastite; 2. Investigar o efeito de ES sobre cepas de Staphylococcus isoladas de mastite caprina e 3. Avaliar o potencial antibacteriano de SteLL contra isolados de S. aureus sensível (UFPEDA 02) e resistente à Oxacilina (UFPEDA 670). Estudos previamente publicados foram acessados nas principais bases de dados e um artigo de revisão foi construído, considerando os principais mecanismos de ação antimicrobiana dos compostos vegetais. Folhas de S. terebinthifolia foram homogeneizadas em NaCl 0,15M para obtenção de ES, e SteLL foi isolada por cromatografia em coluna de quitina. O efeito de ES sobre o crescimento e sobrevivência de cepas de S. aureus isoladas de mastite (S. aureus 24 - Sa24, S. aureus 32 - Sa32, Sthaphylococcus sp. 1 - Ssp1 e Sthaphylococcus sp. 2 - Ssp2) foi avaliado através da determinação da concentração mínima inibitória (CMI) e mínima bactericida (CMB). Em seguida, a curva de crescimento dos isolados foi determinada e a atividade antibiofilme de ES foi investigada pelo método do cristal violeta. O potencial de ES para ação sinérgica com os antibióticos Carbapenema e Cefalexina foi também avaliado. Adicionalmente, a CMI e CMB de SteLL frente UFPEDA 02 e UFPEDA 670 foram determinadas e a viabilidade das células bacterianas foi investigada por citometria de fluxo. O potencial antibiofilme de SteLL foi também avaliado. A revisão revelou que a toxicidade dos antimicrobianos vegetais para causadores de mastite pode envolver principalmente danos à parede celular, peroxidação lipídica, alteração do potencial transmembrana, estresse oxidativo, formação de poros de membrana e alterações morfométricas que levam à apoptose ou aumento na permeabilidade celular. A atividade antibiofilme pode resultar da inibição da adesão dos microrganismos, interferência dos autoindutores de quorum sensing e/ou degradação da matriz exopolimérica, danificando a estrutura tridimensional do biofilme. ES inibiu o crescimento de Sa24, Sa32, Ssp1 e SSp2 (CMI de 1800, 900, 450 e 225 μg/mL, respectivamente) mas não interferiu na sobrevivência dos isolados. A formação de biofilmes pelos isolados foi prejudicada por ES, contudo o crescimento de células planctônicas foi afetado apenas nas cepas Sa32, Ssp1 e Ssp2. ES também exerceu ação sinérgica em combinação com os antibióticos contra todos os isolados. SteLL foi agente bacteriostático e bactericida para os isolados UFPEDA 02 e UFPEDA 670 com CMI de 12,5 e 25 μg/mL e CMB de 50 e 100 μg/mL, respectivamente. SteLL inibiu o crescimento de forma dose-dependente e prejudicou parâmetros morfométricos relacionados ao tamanho, forma e complexidade celular das cepas sensível e resistente, bem como inibiu a formação de biofilme de UFPEDA 02 e de UFPEDA 670. Em conclusão, ES é um agente antimicrobiano por afetar o crescimento e a formação de biofilmes por isolados de mastite, e a toxicidade de SteLL para S. aureus envolve a inibição do crescimento, indução de morte celular e inibição da formação de biofilmes.
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Antibiotics currently used to treat mastitis can affect the udder health and lead to the emergence of resistant microorganisms. The saline extract of Schinus terebinthifolia leaves (ES) and the lectin isolated from it (SteLL) have been previously reported as antimicrobial agents. The aim of this Dissertation was: 1. To carry out a narrative review on the action of plant compounds against mastitis-causing agents; 2. To investigate the effect of ES on Staphylococcus strains isolated from caprine mastitis and 3. To evaluate the antibacterial potential of SteLL against isolates of S. aureus sensitive (UFPEDA 02) and Oxacillin resistant (UFPEDA 670). Previously published studies were accessed in the main databases and a review article was created, considering the main mechanisms of antimicrobial action of plant compounds. S. terebinthifolia leaves were homogenized in 0.15M NaCl to obtain ES, and SteLL was isolated by chitin column chromatography. The effect of ES on the growth and survival of S. aureus strains isolated from mastitis (S. aureus 24 - Sa24, S. aureus 32 - Sa32, Staphylococcus sp. 1 - Ssp1 and Staphylococcus sp. 2 - Ssp2) was evaluated through determination of the minimum inhibitory (MIC) and minimum bactericidal (MBC) concentrations. Then, the growth curve of the isolates was determined and the antibiofilm activity of ES was investigated by the crystal violet method. The potential of ES for synergistic action with the antibiotics Carbapenem and Cephalexin was also evaluated. Additionally, the MIC and CMB values of SteLL against UFPEDA 02 and UFPEDA 670 were determined, and bacterial cell viability was investigated by flow cytometry. The antibiofilm potential of SteLL was also evaluated. The review revealed that the toxicity of plant antimicrobials for mastitis-causing agents mainly involves damage to the cell wall, lipid peroxidation, alteration of the transmembrane potential, oxidative stress, membrane pore formation and morphometric alterations that lead to apoptosis or increase in cell permeability. Antibiofilm activity may result from inhibition of microorganism adhesion, interference of quorum sensing autoinducers and/or exopolymer matrix degradation, damaging the three-dimensional structure of the biofilm. ES inhibited the growth of Sa24, Sa32, Ssp1 and SSp2 (MIC of 1800, 900, 450 and 225 μg/mL, respectively) but did not interfere with the survival of the isolates. The formation of biofilms by the isolates was impaired by ES, however the growth of planktonic cells was affected only in Sa32, Ssp1 and Ssp2 strains. ES also exerted synergistic action in combination with antibiotics against all isolates. SteLL was bacteriostatic and bactericidal agent for UFPEDA 02 and UFPEDA 670 isolates with MIC of 12.5 and 25 μg/mL, and CMB of 50 and 100 μg/mL, respectively. SteLL inhibited the growth in a dose-dependent manner and impaired morphometric parameters related to the size, shape, and cellular complexity of the sensitive and resistant strains, as well as inhibited the biofilm formation of UFPEDA 02 and UFPEDA 670. In conclusion, ES is an antimicrobial agent by affecting the growth and biofilm formation by mastitis isolates, and the toxicity of SteLL to S. aureus involves growth inhibition, induction of cell death and inhibition of biofilm formation.
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PHELIPE MAGALHÃES DUARTE
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SOROPREVALÊNCIA DA INFECÇÃO POR Leishmania infantum EM CÃES NA CIDADE DE PRIMAVERA DO LESTE, MATO GROSSO, BRASIL.
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Orientador : JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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MEMBROS DA BANCA :
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FRANCISCO ESMAILE DE SALES LIMA
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JAQUELINE BIANQUE DE OLIVEIRA
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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RENATA PIMENTEL BANDEIRA DE MELO
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Data: 06/12/2022
Ata de defesa assinada:
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Objetivou-se com esta pesquisa determinar a soroprevalência da infecção por Leishmania infantum em cães na cidade de Primavera do Leste, Mato Grosso, Brasil. Foram analisadas 109 amostras sorológicas de cães, utilizando como teste de triagem e confirmatório o teste imunocromatográfico Dual Path Platform, TR DPP® LVC BioManguinhos, e ELISA, EIELVC, BioManguinhos® (Fiocruz), respectivamente. No diagnóstico de triagem, DPP, 5/109 (4,6%) cães foram positivos para a pesquisa de anticorpos anti- L. infantum. As amostras dos cães positivos foram submetidas ao teste confirmatório de ELISA, onde apenas 1 (0,9%) amostra foi confirmada como positiva, procedente de um cão adulto, assintomático, domiciliado na área urbana, macho, da raça Husky Siberiano. Os resultados obtidos são fundamentais para preencher a lacuna epidemiológica da leishmaniose na região. A partir da existência de um cão positivo na cidade, a Vigilância Epidemiológica deve ficar alerta, procedendo com a vigilância e monitoramento sorológico de cães, bem como na investigação da existência de flebotomíneos. Para tanto, é preciso que um programa de educação em saúde seja implementado, abrangendo desde a elucidação sobre a leishmaniose até aspectos inerentes a posse responsável, a fim de se estimular a prevenção da doença, diminuindo a pressão sobre o sistema de saúde público.
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Mostrar Abstract
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The objective of this research was to determine the seroprevalence of Leishmania infantum in dogs in the city of Primavera do Leste, Mato Grosso, Brazil. A total of 109 serological samples from dogs were analyzed, using the Dual Path Platform immunochromatographic test, TR DPP® LVC BioManguinhos, and ELISA, EIE-LVC, BioManguinhos® (Fiocruz), respectively, as a screening and confirmatory test. In the screening diagnosis, DPP, 5/109 (4.6%) dogs were positive for anti-L. infantum antibodies. The samples of positive dogs were submitted to the confirmatory ELISA test, which only 1 (0.9%) was confirmed as positive, coming from an adult dog, asymptomatic, domiciled in the urban area, male, of the Siberian Husky breed. The results obtained are essential to fill the epidemiological gap of leishmaniasis in the region. From the existence of a positive dog in the city, Epidemiological Surveillance must be alert, proceeding with the surveillance and serological monitoring of dogs, as well as in the investigation of the existence of sandflies. Therefore, it is necessary that a health education program be implemented, ranging from the elucidation of leishmaniasis to aspects inherent to responsible ownership, in order to stimulate the prevention of the disease, reducing the pressure on the public health system.
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SAMUEL SOUZA SILVA
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Epidemiologia da Leishmaniose Visceral Canina na microrregião do Pajeú, Pernambuco
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Orientador : RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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MEMBROS DA BANCA :
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GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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LEUCIO CAMARA ALVES
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RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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VICTOR FERNANDO SANTANA LIMA
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Data: 20/12/2022
Ata de defesa assinada:
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Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma enfermidade causada pelo protozoário Leishmania infantum que tem como principal vetor no Brasil flebotomíneos da espécie Lutzomyia longipalpis. Os cães são considerados os principais reservatórios do agente etiológico em áreas urbanas, podendo desempenhar um importante papel na cadeia epidemiológica desta enfermidade. Objetivou-se neste estudo determinar a soroprevalência e analisar os fatores de risco associados a infecção por L. infantum em cães da microrregião do Pajeú, Sertão de Pernambuco. Amostras sanguíneas (n = 247) foram obtidas de caninos provenientes de oito diferentes municípios. Simultaneamente, fichas clínicas individuais foram preenchidas para obtenção de dados necessários a avaliação dos fatores de risco. Além disso, em cada residência foram coletadas as coordenadas geográficas para determinação da distribuição espacial dos casos positivos. As amostras foram inicialmente triadas através de um teste imunocromatográfico (Teste Rápido Dual Path Plataforma – TR DPP®, Bio-Manguinhos/FIOCRUZ, Rio de Janeiro, Brasil), e os animais reagentes foram submetidos ao teste ELISA (ELISA/S7, Biogene, Recife, Brasil) para confirmação da infecção. Os fatores de risco foram calculados através da análise univariada da variável de interesse e regressão logística considerando como dependente o resultado da sorologia. Uma soroprevalência geral de 13,77% (34/247) foi obtida. Em particular, a maior e menor prevalência foi determinada para os municípios de Tabira (26,47%; 9/34) e Quixaba (12,5%; 18/144), respectivamente. A idade acima de 10 anos foi considerada um fator de risco para infecção por Leishmania spp. (OR = 4,94; p = 0,029) nos animais avaliados. A distribuição espacial dos casos positivos revelou uma grande dispersão de casos positivos na área de estudo, em especial no município de Quixaba. Por fim, conclui-se que a LVC é uma enfermidade presente na região estudada, sendo necessário a adoção de medidas preventivas para reduzir os casos caninos e mitigar o seu impacto a Saúde Pública.
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Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is a disease caused by the protozoan Leishmania infantum and vectored in Brazil by sandflies of the species Lutzomyia longipalpis. Dogs have been considered the main reservoirs of this parasite in urban areas, playing an important role in the epidemiological chain of the disease. The aim of this study was to determine the seroprevalence and analyze the risk factors associated with the infection by L. infantum in dogs from the microregion of Pajeú, state of Pernambuco. Canine blood samples (n = 247) were from eight different municipalities. Individual clinical charts were filled out with data for risk factors assessment. Samples were screened by using an immunochromatographic test (Dual Path Platform Rapid Test – TR DPP®, Bio-Manguinhos/FIOCRUZ, Rio de Janeiro, Brazil), and the reagent ones were submitted to the ELISA test (ELISA/S7, Biogene, Recife, Brazil) for confirmation. Risk factors were calculated through univariate analysis of the variables of interest and logistic regression analysis considering as dependent variable the results of the serology. An overall seroprevalence of 13.77% (34/247) was obtained. In particular, the highest and lowest prevalence was observed for the municipalities of Tabira (26.47%; 9/34) and Quixaba (12.5%; 18/144), respectively. The age (> 10 years old) was considered a risk factor for the infection by Leishmania spp. (OR = 4.94; p = 0.029). The spatial distribution of positive cases revealed a wide dispersion in the study area, in particular in the municipality of Quixaba. In conclusion the CVL is a disease present in the area of study; therefore, the adoption of preventive measures to reduce canine cases and mitigate its impact on Public Health are needed.
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LEONARDO PESSÔA CABÚS OITAVÉN
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Autoecologia de Gymnodactylus geckoides Spix, 1825 (Squamata, Phyllodactylidae) em fragmento de Caatinga, Nordeste do Brasil
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Orientador : GERALDO JORGE BARBOSA DE MOURA
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MEMBROS DA BANCA :
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GERALDO JORGE BARBOSA DE MOURA
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MARA CÍNTIA KIEFER
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FRANCISCO TIAGO DE VASCONCELOS
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EDUARDO JOSÉ DOS REIS DIAS
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SELVINO NECKEL DE OLIVEIRA
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Data: 14/02/2022
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Autoecologia é a vertente da ecologia responsável pelo estudo das relações das espécies com o ambiente em que vivem. Aspectos autoecológicos, como alimentação, utilização de microhabitat, biologia reprodutiva, morfologia e parasitologia, são de fundamental importância, para compreensão da história natural e ecologia da espécie. Além disso, tais aspectos contribuem para estratégias de manejo e conservação ambiental e de espécies. Pesquisas nessa área vêm sendo desenvolvidas com diversos tipos de animais, inclusive lagartos. Portanto, considerando que os dados na literatura sobre populações de G. geckoides, no estado de Pernambuco permanecem pobremente, ou não estudados, além de revelar dados obsoletos sobre seus aspectos autoecológicos, o presente trabalho teve como objetivo elaborar descrição atualizada, além de mais acurada, sobre aspectos autoecológicos desse lagarto, em remanescente de Caatinga, no estado de Pernambuco. No total foram analisados203 indivíduos, sendo 68 fêmeas, 98 machos e 31 juvenis, e mais 6 animais que não foi possível identificar o gênero. Os dados obtidos nos permitem classificar G. geckoides como um lagarto generalista, cuja dieta varia de acordo com a disponibilidade do ambiente, apresentando variações do número de presas ingeridas, bem como a ingestão de presas energeticamente vantajosas durante períodos chuvosos. O micro-habitat também tem variações de acordo com o ambiente, indicando preferência pela vegetação nativa, quando presente. A relação parasito-hospedeiro revelou relação positiva e significativa dos helmintos encontrados com a morfologia e sazonalidade, bem como os tipos de presas ingeridas, como coleópteras. Finalmente os fatores de reservas energéticas, bem como modificação de células reprodutivas, indicam que esta espécie apresenta reprodução contínua e acíclica, sendo altamente correlacionada ao período de chuva, no qual pôde ser encontrado maior frequência de fêmeas portando ovos no oviduto e ovários em estágio vitelogênico. Portanto as reservas energéticas são utilizadas em maior escala por este grupo em função da gestação e maturação de ovários.
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Autoecology is the branch of ecology responsible for the study of the relationships of species with the environment in which they live. Autoecological aspects, such as feeding, use of microhabitat, reproductive biology, morphology and parasitology, are of fundamental importance for understanding the natural history and ecology of the species. In addition, such aspects contribute to environmental and species management and conservation strategies. Research in this area has been developed with different types of animals, including lizards. Therefore, considering that the data in the literature on populations of G. geckoides, in the state of Pernambuco, remain poorly, or not studied, in addition to revealing obsolete data on their autoecological aspects, the present work aimed to elaborate an updated description, in addition to being more accurate. , on autoecological aspects of this lizard, in a remnant of Caatinga, in the state of Pernambuco. In total, 203 individuals were analyzed, 68 females, 98 males and 31 juveniles, plus 6 animals that could not be identified by gender. The data obtained allow us to classify G. geckoides as a generalist lizard, whose diet varies according to the availability of the environment, presenting variations in the number of ingested prey, as well as the ingestion of energetically advantageous prey during rainy periods. The micro-habitat also varies according to the environment, indicating a preference for native vegetation, when present. The parasite-host relationship revealed a positive and significant relationship of the helminths found with morphology and seasonality, as well as the types of prey ingested, such as coleoptera. Finally, the energy reserve factors, as well as the modification of reproductive cells, indicate that this species presents continuous and acyclic reproduction, being highly correlated with the rainy season, in which a higher frequency of females carrying eggs in the oviduct and ovaries in the vitellogenic stage could be found. . Therefore, energy reserves are used on a larger scale by this group as a function of pregnancy and ovary maturation.
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MARINA GOMES PESSOA BAPTISTA
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ANÁLISE MORFOMÉTRICA E IMUNO-HISTOQUÍMICA DO CÉREBRO E FÍGADO DE RATAS INDUZIDAS AO HIPOTIREOIDISMO TRATADAS COM MELATONINA
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Orientador : ALVARO AGUIAR COELHO TEIXEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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ALVARO AGUIAR COELHO TEIXEIRA
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VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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LEUCIO DUARTE VIEIRA FILHO
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ISMAELA MARIA FERREIRA DE MELO
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FERNANDA DAS CHAGAS ÂNGELO MENDES TENÓRIO
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Data: 23/02/2022
Ata de defesa assinada:
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Sabe-se que gestação influencia em diversas mudanças fisiológicas maternas, sendo uma delas na função tireoidiana. O papel dos hormônios tireoidianos e sua importância durante o período gestacional se tornaram assunto de grande interesse, assim como sua influência no sistema nervoso materno. A melatonina é um importante neuro-hormônio que exerce função na regulação tireoidiana e tem papel significativo gravidez. Assim, testamos a hipótese de que a melatonina exógena pode diminuir ou prevenir os efeitos do hipotireoidismo no cérebro de ratas. Foram utilizadas 15 ratas prenhes, divididas em 3 grupos: GC: ratas sem indução ao hipotireoidismo; GH: ratas induzidas ao hipotireoidismo; GHM: ratas induzidas ao hipotireoidismo tratadas com melatonina. O hipotireoidismo foi induzido pela administração oral de propitiouracil (1mg/animal) e a melatonina foi administrada via subcutânea (10mg/kg). Foram analisados o peso dos animais, dos cérebros, o índice organossomático, os níveis hormonais de T3 e T4, a morfometria, o estresse oxidativo, além da histoquímica e histopatologia do córtex frontal. Os resultados mostraram a confirmação do hipotireoidismo nas ratas do grupo sem tratamento pelo aumento significativo no nível do TSH quando comparado ao grupo controle e tratado com melatonina. As fêmeas do grupo hipotireoidismo, apresentaram ganho de peso em relação ao grupo tratado com melatonina, entretanto, houve uma diminuição significativa no peso dos cérebros e no índice organossomático. Além disso, as fêmeas que foram tratadas com melatonina apresentaram resultados favoráveis no que se refere a redução dos corpúsculos de nissl, a redução no número de neurônios no córtex, peroxidação lipídica e glutationa reduzida em relação ao grupo de ratas com hipotireoidismo. Assim, concluímos que o tratamento com a melatonina pode ser uma estratégia eficaz para prevenir os efeitos do hipotireoidismo no córtex frontal do cérebro.
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It is known that pregnancy influences several maternal physiological changes, one of which is thyroid function. The role of thyroid hormones and their importance during the gestational period have become a subject of great interest, as has their influence on the maternal nervous system. Melatonin is an important neurohormone that plays a role in thyroid regulation and plays a significant role in pregnancy. Thus, we tested the hypothesis that exogenous melatonin can decrease or prevent the effects of hypothyroidism in the rat brain. Fifteen pregnant rats were divided into 3 groups: GC: rats without induction of hypothyroidism; GH: rats induced to hypothyroidism; GHM: hypothyroidism-induced rats treated with melatonin. Hypothyroidism was induced by oral administration of propitiouracil (1mg/animal) and melatonin was administered subcutaneously (10mg/kg). Animal weight, brain weight, organosomatic index, hormone levels of T3 and T4, morphometry, oxidative stress, as well as histochemistry and histopathology of the frontal cortex were analyzed. The results showed the confirmation of hypothyroidism in the rats of the untreated group by the significant increase in the level of TSH when compared to the control group and treated with melatonin. Females in the hypothyroidism group showed weight gain compared to the melatonin-treated group, however, there was a significant decrease in brain weight and organosomatic index. In addition, the females that were treated with melatonin showed favorable results regarding the reduction of nissl bodies, the reduction in the number of neurons in the cortex, lipid peroxidation and reduced glutathione in relation to the group of rats with hypothyroidism. Thus, we conclude that treatment with melatonin may be an effective strategy to prevent the effects of hypothyroidism on the frontal cortex of the brain.
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WELLINGTON LEAL DOS SANTOS
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Bioprospecção de moléculas bioativas de feijão-fava (Phaseolus lunatus L.): multifuncionalidade e aplicações
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Orientador : KEILA APARECIDA MOREIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIELE SILVA RIBEIRO
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JOSÉ ERICK GALINDO GOMES
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KEILA APARECIDA MOREIRA
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ROSANGELA ESTEVAO ALVES FALCAO
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TALITA CAMILA EVARISTO DA SILVA NASCIMENTO
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Data: 24/02/2022
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O uso de produtos de origem agrícola, dentre os quais sementes de leguminosas, para o desenvolvimento de ingredientes funcionais e biologicos, pode ser uma alternativa econômica para a indústria alimentar e farmacêutica. Dessa forma, objetivou-se objetivo caracterizar os aspectos funcionais, nutricionais e os espectros de infravermelho das farinhas obtidas a partir das variedades, variedades Rosinha (V1), Olho de Ovelha (V2), Galo de Campina (V3), Mulatinho (V4), Branquinha (V5), Lavandeira (V6) de P. lunatus L. para uso em matrizes alimentares, além do efeito da digestão gastrointestinal sobre o potencial antioxidante das proteínas, hidrolisados e compostos fenólicos presentes no feijão-fava. Avaliou-se a presença de fatores antinutricionais, capacidade de absorção de água (CAA) e óleo (CRO), solubilidade em água (ISA), capacidade de formação de espuma (CFE), emulsificante (CE), estabilidade da espuma (EFE), emulsão das farinhas (EE) e os espectros de infravermelho das farinhas. Posteriormente, as farinhas foram submetidas a extração dos compostos fenólicos utilizando hexano (E1), éter de petróleo (E2), clorofórmio (E3), acetato de etila (E4), etanol (E5), acetona (E6) e água (E7) na proporção 1:5 (m/v). Os compostos fenólicos obtidos foram submetidos a digestão gastrointestinal in vitro e ao doseamento do potencial antioxidante frente ao radical DPPH, ABTS e quelação de cobre e ferro. Por fim, as farinhas das variedades Lavandeira, Rosinha, Olho de Ovelha e Mulatinho foram submetidas a extração proteica solubilização alcalina, seguida de precipitação isoelétrica, posteriormente, as amostras foram submetidas ao ensaio de digestão gástrica e intestinal in vitro, e logo após, os testes antioxidantes frente aos ensaios de eliminação do radical (DPPH), (ABTS), hidroxila, superóxido, poder redutor férrico (FRAP), poder redutor, atividade anti-desnaturação proteica, inibição da peroxidação lipídica, sobrevivência de Saccharomyces cerevisiae frente ao estresse oxidativo e quelação de cobre e ferro foram realizados. As farinhas apresentaram baixos índices de inibidores de tripsina (2,21 - 2,24 UIT.g-1) e elevados índices de inibidores de amilase (4,68 – 13,52 UIT.g-1), ademais, o CAA (149 - 240 g.g-1), ISA (2,54 -2,83 g.g-1), CAA (0,63 – 102 g.g-1), CE e EE mantiveram-se acima de 50%, e com estabilidade após 60 minutos. Observou-se picos nas faixas espectrais entre 500 e 3350 cm-1 com regiões de estiramento na OH, CH, anéis aromáticos, amida I e amida II. A água foi mais eficiente na extração de compostos fenólicos nas variedades V1, V3, V4, V5, V6 e éter de petróleo para a V2 antes do processo digestivo. A digestão gastrointestinal acarretou em aumento dos compostos fenólicos presentes nos extratos e frente a eliminação dos radicais DPPH, ABTS e quelação de ferro e cobre, em relação a fração proteica a digestão in vitro demonstrou ser uma ferramenta eficaz para obter hidrolisados proteicos com capacidade antioxidante frente a eliminação dos radicais ABTS, DPPH, hidroxila, superóxido e quelação de cobre e ferro. Além disso, foram observados efeitos anti-desnaturante, diminuição da peroxidação lipídica e sobrevivência de S. cerevisiae. Os resultados do presente estudo sugerem que farinhas das variedades de P. lunatus L. poderiam ser usadas como um substituto potencial em formulação de produtos alimentícios com alto valor tecnológico, nutricional e biológico.
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The use of products of agricultural origin, including legume seeds, for the development of functional and biological ingredients, can be an economic alternative for the food and pharmaceutical industry. Thus, the objective was to characterize the functional and nutritional aspects and the infrared spectra of the flours obtained from the varieties, Rosinha (V1), Olho de Ovelha (V2), Galo de Campina (V3), Mulatinho (V4) , Branquinha (V5), Lavandeira (V6) of P. lunatus L. for use in food matrices, in addition to the effect of gastrointestinal digestion on the antioxidant potential of proteins, hydrolysates and phenolic compounds present in fava beans. The presence of anti-nutritional factors, water absorption capacity (CAA) and oil (CRO), water solubility (ISA), foaming capacity (CFE), emulsifier (EC), foam stability (EFE) were evaluated. , flour emulsion (EE) and flour infrared spectra. Subsequently, the flours were subjected to extraction of phenolic compounds using hexane (E1), petroleum ether (E2), chloroform (E3), ethyl acetate (E4), ethanol (E5), acetone (E6) and water (E7) in the proportion 1:5 (m/v). The phenolic compounds obtained were submitted to in vitro gastrointestinal digestion and to the determination of the antioxidant potential against the DPPH, ABTS radical and copper and iron chelation. Finally, the flours of the Lavandeira, Rosinha, Olho de Ovelha and Mulatinho varieties were subjected to alkaline solubilization protein extraction, followed by isoelectric precipitation, later, the samples were submitted to the in vitro gastric and intestinal digestion test, and soon after, the antioxidant tests against radical scavenging assays (DPPH), (ABTS), hydroxyl, superoxide, ferric reducing power (FRAP), reducing power, anti-protein denaturation activity, inhibition of lipid peroxidation, survival of Saccharomyces cerevisiae against oxidative stress and copper and iron chelation were performed. The flours showed low levels of trypsin inhibitors (2.21 - 2.24 ITU.g-1) and high levels of amylase inhibitors (4.68 - 13.52 ITU.g-1), in addition, CAA ( 149 - 240 gg-1), ISA (2.54 -2.83 gg-1), CAA (0.63 - 102 gg-1), CE and EE remained above 50%, with stability after 60 minutes. Peaks were observed in the spectral ranges between 500 and 3350 cm-1 with stretch regions in OH, CH, aromatic rings, amide I and amide II. Water was more efficient in extracting phenolic compounds in varieties V1, V3, V4, V5, V6 and petroleum ether for V2 before the digestive process. Gastrointestinal digestion resulted in an increase in the phenolic compounds present in the extracts and against the scavenging of DPPH, ABTS and iron and copper chelation, in relation to the protein fraction, in vitro digestion proved to be an effective tool to obtain protein hydrolysates with antioxidant capacity against the elimination of ABTS, DPPH, hydroxyl, superoxide radicals and chelation of copper and iron. In addition, anti-denaturing effects, decreased lipid peroxidation and survival of S. cerevisiae were observed. The results of the present study suggest that flours from the P. lunatus L. varieties could be used as a potential substitute in the formulation of food products with high technological, nutritional and biological value.
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JOSÉ RICARDO DE OLIVEIRA SANTOS
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Parâmetros hematológicos, bioquímica sérica, ultraestrutura das células sanguíneas e comportamento defensivo de Leptodactylus vastus lutz, 1930 em fragmentos de floresta atlântica do nordeste brasileiro
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Orientador : GERALDO JORGE BARBOSA DE MOURA
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MEMBROS DA BANCA :
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VANIA REGINA DE ASSIS
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MARCELO NOGUEIRA DE CARVALHO KOKUBUM
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GERALDO JORGE BARBOSA DE MOURA
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JAQUELINE BIANQUE DE OLIVEIRA
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RICARDO BARBOSA DE LUCENA
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Data: 24/02/2022
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Os impactos ambientais provocados pela ação antrópica e ações da natureza têm alertado para a perda da biodiversidade de anuros. Com isso, a biologia da conservação, medicina da conservação e ecologia tem apresentado resultados sobre os fatores intrínsecos e extrínsecos, voltados para a avaliação do estado fisiológico dos anuros. Dentre os parâmetros intrínsecos pode-se destacar a análise do hemograma, bioquímica sérica, bem como a investigação da ocorrência de hemoparasitos, enquanto que a descrição do repertório defensivo tem sido considerado como um fator extrínseco para a investigação dos displays comportamentais antipredatórios apresentados por sapos, rãs e pererecas. Nesse tocante, o objetivo da tese foi avaliar o estado fisiológico de machos Leptodactylus vastus Lutz, 1930 em fragmentos de Floresta Atlântica Semidecidual no nordeste brasileiro. Para a análise dos fatores intrínsecos, foram coletados 30 machos da L. vastus no Jardim Botânico e Parque Estadual de Dois Irmãos. Para a descrição do repertório defensivo, 30 machos foram capturados na Unidade de Conservação Mata do Camocim, situado no munícipio de São Lourenço da Mata. As três áreas se encontram na região metropolitana de Recife. Os machos de L. vastus apresentaram uma média de variáveis hematológicas e bioquímica sérica próximos dos relatados para outras espécies de anuros. Contudo, os valores do hematócrito alto podem sugerir problemas de desidratação/hemoconcentração, bem como os valores aumentados de basófilos e anormalidades nos eritrócitos podem sugerir uma hipersensibilidade imunológica nos espécimes. Além disso, os valores das enzimas para as funções hepáticas sugerem possíveis lesões no órgão, mas é necessário a realização de outros exames para o diagnóstico. Sobre os comportamentos defensivos, os machos exibiram cinco tipos de comportamentos, divididos em mecanismo visual: inflar o corpo (100%), empurrar (83,3%), esconder (23,3%), descarga cloacal (16,6%) e utilização de espinhos (6,6%); e mecanismo acústico: canto de agonia (33,3%). Desse modo, a análise da ecofisiologia de anuros tem-se mostrado como uma importante ferramenta para auxiliar no monitoramento do estado fisiológico das espécies de anuros e, com isso, auxiliar na criação de estratégias para a conservação desses animais e dos ecossistemas associados a eles.
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The environmental impacts caused by anthropic action and nature's actions have alerted to the loss of anuran biodiversity. Thus conservation biology, conservation medicine, and ecology have presented results on intrinsic and extrinsic factors aimed at evaluating the physiological state of anurans. Among the intrinsic parameters, we can highlight the analysis of the blood count, serum biochemistry, as well as the investigation of the occurrence of blood parasites while the description of the defensive repertoire has been considered as an extrinsic factor for the investigation of antipredatory behavioral displays presented by anurans. In this way, the objective of this PhD thesis was to evaluate the physiological state of males Leptodactylus vastus Lutz, 1930 in fragments of Semideciduous Atlantic Forest in northeastern Brazil. For the analysis of intrinsic factors 30 males of L. vastus were collected in the Botanical Garden and Dois Irmãos State Park. To describe the defensive repertoire 30 males were captured in the Mata do Camocim Conservation Unit located in the municipality of São Lourenço da Mata. The three areas are located in the metropolitan region of Recife. Males of L. vastus had an average of hematological and serum biochemical variables close to those reported for other anuran species. However, high hematocrit values may suggest dehydration/hemoconcentration problems, as well as increased basophil values and abnormalities in erythrocytes may suggest an immunological hypersensitivity in the specimens. In addition, enzyme values for liver functions suggest possible damage to the organ, but further diagnostic tests are necessary. Regarding defensive behaviors, males exhibited five types of behavior divided into visual mechanism: puffing up the body (100%), push movement (83.3%), hiding (23.3%), cloacal discharge (16.6%) and spine aggression (6.6%); and acoustic mechanism: distress call (33.3%). Thus analysis of anuran ecophysiology has been shown to be an important tool to assist in monitoring the physiological state of anurans, and in the creation of strategies for the conservation of these animals and the ecosystems associated with them.
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LAÍS CAROLINE DA SILVA SANTOS
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ASPECTOS IMUNOHISTOQUÍMICOS E MORFOFISIOLÓGICOS DO FÍGADO E RINS DE RATAS, SUBMETIDAS À SUPLEMENTAÇÃO DE CREATINA E NANDROLONA ASSOCIADOS OU NÃO A ATIVIDADE FÍSICA
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Orientador : VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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LEUCIO DUARTE VIEIRA FILHO
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ALVARO AGUIAR COELHO TEIXEIRA
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FRANCISCO DE ASSIS LEITE SOUZA
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ISMAELA MARIA FERREIRA DE MELO
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VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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Data: 24/02/2022
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A utilização indiscriminada dos esteroides anabólicos androgênicos como decanoato de nandrolona tornou-se problema mundial. Seus efeitos chamaram atenção de usuários não-atletas que buscam melhorar performance. Aliado a isso, a procura por suplementação alimentar, como creatina que pode promover maior desempenho, ganho de massa magra e força também vem sendo utilizado. Entretanto, o uso suprafisiológico dessas substâncias podem causar efeitos tóxicos à saúde humana. Assim, a presente pesquisa visou analisar os efeitos dessa associação aliada à atividade física sobre os níveis de peroxidação lipídica, citocinas inflamatórias, proliferação celular, bioquímica e a histomorfometria do fígado e rins em ratas wistar. Utilizou-se 50 ratas, as quais foram divididas nos seguintes grupos: I Ratas sem tratamento e treinamento (RC), II Ratas sem tratamento e treinadas (RT), III Ratas treinadas + nandrolona (RTN), IV Ratas treinadas + nandrolona + creatina (RTNCreat), V Ratas treinadas + creatina (RTCret). A nandrolona foi administrada por meio de injeções i.m., 5 dias/semana/30 dias, na concentração de 5 mg/kg. A creatina monoidratada foi administrada por gavagem (0,5g/kg). As ratas treinadas foram submetidas ao protocolo de natação. A análise histopatológica do fígado das ratas dos grupos RTN, RTNCreat e RTCreat revelou congestão da veia centro lobular, balonamento hepatocelular, aumento do parênquima lobular e redução do não lobular. Já nos rins foi observada glomerulonefrite proliferativa. Nos rins verificou-se ainda aumento do diâmetro e volume glomerular, e do diâmetro e volume da cápsula de Bowman. Houve aumento do índice organossomático tanto do fígado como nos rins, nas ratas que receberam nandrolona e/ou creatina, sendo mais expressivo no tratamento com creatina no fígado, porém sem diferir da sua associação com a nandrolona. Os níveis da peroxidação lipídica (TBARS) no fígado e rins foram bastante elevados nas ratas dos grupos RTN, RTNCret e RTCreat, sendo mais efetivo na associação nandrolona/creatina. Em contra partida o GSH apresentou redução significativa nesses grupos, sendo mais evidente também com a associação nandrolona/creatina. A expressão das citocinas pró-inflamatórias IL-6, TNFα e proliferação celular no fígado e rins dos grupos RTN e RTNCret foram elevadas. O VEGF-A revelaram níveis aumentados no fígado dos grupos RTN e RTNCret. As transaminases e fosfatase alcalina apresentaram maiores valores no fígado dos grupos RTN, RTCret e RTNCret. A creatinina foi aumentada nos grupos RTCret e RTNCret, e os da ureia nos grupos RTN, RTCreat e RTNCreat. Assim, conclui-se que o uso suprafisiológico da nandrolona e creatina ocasiona toxicidade hepática e renal independente de está ou não associado à atividade física o que deve servir de alerta para os usuários
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Mostrar Abstract
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The indiscriminate use of anabolic androgenic steroids such as nandrolone decanoate has become a worldwide problem. Its effects caught the attention of non-athlete users looking to improve performance. Allied to this, the search for food supplementation, such as creatine that can promote greater performance, lean mass gain and strength has also been used. However, the supraphysiological use of these substances can cause toxic effects to human health. Thus, the present research aimed to analyze the effects of this association combined with physical activity on the levels of lipid peroxidation, inflammatory cytokines, cell proliferation, biochemistry and the histomorphometry of the liver and kidneys in Wistar rats. Fifty rats were used, which were divided into the following groups: I Rats without treatment and training (RC), II Rats without treatment and trained (RT), III Rats trained + nandrolone (RTN), IV Rats trained + nandrolone + creatine (RTNCreat), V Trained rats + creatine (RTCret). Nandrolone was administered via i.m. injections, 5 days/week/30 days, at a concentration of 5 mg/kg. Monohydrate creatine was administered by gavage (0.5g/kg). The trained rats were submitted to the swimming protocol. Histopathological analysis of the liver of rats in the RTN, RTNCreat and RTCreat groups revealed central lobular vein congestion, hepatocellular ballooning, increased lobular parenchyma and reduced non-lobular parenchyma. In the kidneys, proliferative glomerulonephritis was observed. In the kidneys, there was also an increase in glomerular diameter and volume, and in the diameter and volume of Bowman's capsule. There was an increase in the organosomatic index both in the liver and in the kidneys, in the rats that received nandrolone and/or creatine, being more expressive in the treatment with creatine in the liver, but without differing from its association with nandrolone. The levels of lipid peroxidation (TBARS) in the liver and kidneys were quite high in the rats of the RTN, RTNCret and RTCreat groups, being more effective in the nandrolone/creatine association. On the other hand, GSH showed a significant reduction in these groups, which was also more evident with the nandrolone/creatine association. The expression of pro-inflammatory cytokines IL-6, TNFα and cell proliferation in the liver and kidneys of the RTN and RTNCret groups were high. VEGF-A revealed increased levels in the liver of the RTN and RTNCret groups. Transaminases and alkaline phosphatase showed higher values in the liver of the RTN, RTCret and RTNCret groups. Creatinine was increased in the RTCret and RTNCret groups, and urea in the RTN, RTCreat and RTNCreat groups. Thus, it is concluded that the supraphysiological use of nandrolone and creatine causes liver and 8 kidney toxicity regardless of whether or not it is associated with physical activity, which should serve as a warning to users
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TIAGO QUEIROZ DA MOTA BITTENCOURT
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Desenvolvimento e caracterização de nanopartículas contendo compostos de vanádio e metformina nanoencapsulados e sua toxicidade em modelo de zebrafish
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Orientador : PABYTON GONCALVES CADENA
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MEMBROS DA BANCA :
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PABYTON GONCALVES CADENA
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FABRICIO BEZERRA DE SA
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ANISIO FRANCISCO SOARES
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MARCELA ARAÚJO PEREIRA
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MARIANE CAJUBÁ DE BRITTO LIRA NOGUEIRA
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Data: 25/02/2022
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Este trabalho propôs o desenvolvimento de nanopartículas de policaprolactona (PCL) e poloxâmero 188 contendo uma associação de metformina e metavanadato de sódio nanoencapsulados como uma alternativa para o tratamento de modelo de zebrafish (Danio rerio) com com condições semelhantes à diabetes, utilizando uma incubadora com fotoperíodo e temperatura controlados para desenvolver os animais. A incubadora foi desenvolvida e constatou-se que os estágios de desenvolvimento embrionário do zebrafish não foram afetados, indicando a possibilidade para testes toxicológicos com o modelo. As nanopartículas foram produzidas utilizando uma fase orgânica, contendo o polímero e solventes, e uma fase aquosa, contendo o surfactante e fármacos antidiabéticos, na proporção de 1:2, sob agitação magnética. As formulações apresentaram tamanho médio que variaram entre ≈ 200 nm, índice de polidispersão de ≈ 0,1 e potencial zeta > -10 mV. Para avaliação toxicológica, embriões de zebrafish foram expostos a diferentes concentrações (1, 5 e 10 mL) das nanopartículas de PCL e poloxâmero 188 contendo metformina e metavanadato nanoencapsulados e avaliados quanto aos efeitos subletais e letais. Os efeitos subletais típicos observados (p < 0,05) foram edema de pericárdio e saco vitelínico e deformação de coluna e os efeitos letais foram atribuídos a coagulação e ausência de batimentos cardíacos, na concentração de 1 mL não foi observado subletalidade ou letalidade (p > 0,05). Após determinação de uma concentração segura, embriões, eleuthero-embriões e larvas de zebrafish foram expostos a D-glicose a fim de simular as condições de indução à diabetes e tratados com as nanopartículas de PCL. As nanopartículas foram produzidas através da técnica de deposição de polímero pré-formado e suas características físico-químicas foram analisadas quanto às concentrações dos compostos químicos utilizados. Já os embriões, eleuthero-embriões e larvas de zebrafish foram avaliados quanto aos efeitos subletais, letais e resposta optomotora. Quanto as características físico-químicas das nanopartículas, o tamanho médio (p < 0,05) foi influenciado pelas concentrações de PCL, metformina e metavanadato de sódio, já o PDI (p < 0,05) foi influenciado pelas concentrações de PCL e metformina. Quanto aos embriões e eleuthero-embriões de zebrafish, nos grupos expostos sem a adição de glicose não foram observados nenhuma subletalidade ou letalidade. Nos grupos expostos com adição de glicose, os efeitos subletais observados (p < 0,05) foram retardo de crescimento geral em 1 dia pós-fertilização (embrião) e edema de pericárdio em 3 dia pós-fertilização (eleuthero-embrião). No grupo tratado com as nanopartículas de PCL e poloxâmero 188 com associação de metformina e metavanadato de sódio nanoencapsulados não foi observado a subletalidade edema de pericárdio (p > 0,05) indicando um caráter protetivo das nanopartículas contendo os fármacos antidiabéticos, podendo fornecer uma alternativa terapêutica para o tratamento à diabetes.
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This work proposed the development of polycaprolactone (PCL) and poloxamer 188 nanoparticles containing an association of metformin and nanoencapsulated sodium metavanadate as an alternative for the treatment of a zebrafish (Danio rerio) model with conditions similar to diabetes, using an incubator with photoperiod and temperature controlled to develop the animals. The incubator was developed and it was found that the stages of embryonic development of the zebrafish were not affected, indicating the possibility for toxicological tests with the model. The nanoparticles were produced using an organic phase, containing the polymer and solvents, and an aqueous phase, containing the surfactant and antidiabetic drugs, in a 1:2 ratio, under magnetic stirring. The formulations had an average size that varied between ≈ 200 nm, polydispersity index of ≈ 0.1 and zeta potential > -10 mV. For toxicological evaluation, zebrafish embryos were exposed to different concentrations (1, 5 and 10 mL) of PCL and poloxamer 188 nanoparticles containing nanoencapsulated metformin and metavanadate and evaluated for sublethal and lethal effects. The typical sublethal effects observed (p < 0.05) were pericardium and yolk sac edema and spinal deformation and the lethal effects were attributed to coagulation and absence of heartbeat, at a concentration of 1 mL no sublethal or lethality was observed (p > 0.05). After determining a safe concentration, zebrafish embryos, eleuthero-embryos and larvae were exposed to D-glucose in order to simulate diabetes-inducing conditions and treated with PCL nanoparticles. The nanoparticles were produced using the preformed polymer deposition technique and their physicochemical characteristics were analyzed in terms of the concentrations of the chemical compounds used. Zebrafish embryos, eleuthero-embryos and larvae were evaluated for sublethal and lethal effects and optomotor response. As for the physicochemical characteristics of the nanoparticles, the mean size (p < 0.05) was influenced by the concentrations of PCL, metformin and sodium metavanadate, whereas the PDI (p < 0.05) was influenced by the concentrations of PCL and metformin. As for zebrafish embryos and eleuthero-embryos, no sublethality or lethality was observed in the groups exposed without the addition of glucose. In the exposed groups with added glucose, the observed sublethal effects (p < 0.05) were general growth retardation at 1 day post-fertilization (embryo) and pericardial edema at 3 day post-fertilization (eleuthero-embryo). In the group treated with PCL nanoparticles and poloxamer 188 with the combination of metformin and nanoencapsulated sodium metavanadate, sublethal pericardial edema (p > 0.05) was not observed, indicating a protective character of nanoparticles containing antidiabetic drugs, which may provide an alternative therapy for the treatment of diabetes.
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JOYCI TORRES DE PAULA
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ESTADIAMENTO CLÍNICO E CONFRONTO DO PERFIL DOS TESTES SOROLÓGICOS NA EVOLUÇÃO DOS DIFERENTES ESTÁGIOS CLÍNICOS DA LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA
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Orientador : LEUCIO CAMARA ALVES
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIELA DA SILVA PEREIRA CAMPINHO
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EDNA MICHELLY DE SA SANTOS
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LEUCIO CAMARA ALVES
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RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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RENATA PIMENTEL BANDEIRA DE MELO
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Data: 25/02/2022
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O estadiamento clínico pode auxiliar a entender melhor o prognóstico do paciente e na tomada de decisão do tratamento de cães com Leishmaniose Visceral Canina (LVC). Assim, objetivou-se realizar estadiamento clínico de cães com infecção natural por Leishmania infantum e confrontar o perfil dos testes sorológicos com os diferentes estágios da LVC. Para tanto foram utilizados cães domiciliados, de ambos os sexos e idades variadas, com diagnóstico positivo para LVC por meio da biopsia de medula óssea. O estadiamento clínico foi realizado pela avaliação dos sinais clínicos, alterações hematológicas e de bioquímica sérica, além da titulação de anticorpos. Foram considerados 5 estágios: Estágio 1 – sem doença; Estágio 2 – doença branda; Estágio 3 – doença moderada; Estágio 4 – doença grave; e Estágio 5 – doença muito grave. Verificou-se que 73,7% (59/80) dos cães apresentavam doença moderada, 19% (15/80) doença branda, 6% (5/80) estavam no estágio de doença grave e 1,3% (1/80) com doença muito grave. O nível de anticorpos apresentou diferença significativa entre estes estágios (p<0,05), mas não foi determinante para a classificação dos animais nas diferentes fases da doença. Entretanto, animais com níveis elevados de Proteína Total (>12g/dL) e azotemia foram enquadrados nos estágios mais graves da doença, independente dos sinais clínicos e do perfil de anticorpos apresentado. Correlacionando o nível de anticorpos avaliados por diferentes técnicas sorológicas, RIFI e ELISA, com os sinais clínicos, apenas na RIFI foi identificada diferença estatística entre os estágios, porém o estágio 3 foi o que apresentou maior mediana de titulação. Conclui-se que é possível realizar o estadiamento clínico de cães naturalmente infectados por L. infantum a partir de um conjunto de dados, incluindo sinais clínicos, análises clínico-patológicas e testes sorológicos, enquadrando-os em estágios com diferentes níveis de gravidade. Contudo, a falta de uniformidade na sorologia dificultou sua aplicação no estadiamento.
Palavras-chave: Classificação
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Clinical staging can help to better understand the patient's prognosis and decision making in the treatment of dogs with Canine Visceral Leishmaniasis (CVL). Thus, the objective was to perform clinical staging of dogs with natural infection by Leishmania infantum and compare the profile of serological tests with the different stages of CVL. For that, domiciled dogs of both sexes and different ages were used, with a positive diagnosis for CVL through bone marrow biopsy. Clinical staging was performed by evaluating clinical signs, hematological and serum biochemical changes in addition to antibody titration. There were five stages considered: Stage 1 (no disease), Stage 2 (mild disease), Stage 3 (moderate disease), Stage 4 (severe disease), and Stage 5 (extremely severe disease). It was found that 73.7% (59/80) of the dogs had moderate disease, 19% (15/80) had mild disease, 6% (5/80) were in the stage of severe disease, and 1.3% (1/80) were in the stage of severe disease. 80) with a very serious illness. The level of antibodies showed a significant difference between these stages (p<0.05), but it was not a determinant for the classification of animals in the different stages of the disease. However, animals with high levels of Total Protein (>12g/dL) and azotemia were classified in the most severe stages of the disease, regardless of clinical signs and antibody profile. In correlating the levels of antibodies evaluated by different serological techniques, IFAT and ELISA, with the clinical signs, only in the IFAT was a statistical difference between the stages identified, but stage 3 was the one with the highest median titration. It is concluded that it is possible to perform the clinical staging of dogs naturally infected with L. infantum from a set of data, including clinical signs, clinical-pathological analyses, and serological tests, placing them in stages with different levels of severity. However, the lack of uniformity in serology makes its application in staging difficult.
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MARCIA PEREIRA DA SILVA
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Análise de memória em cinética de canais iônicos. Teoria e aplicação.
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Orientador : ROMILDO DE ALBUQUERQUE NOGUEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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ROMILDO DE ALBUQUERQUE NOGUEIRA
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RAMON ENRIQUE RAMAYO GONZALEZ
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THIAGO DE SALAZAR E FERNANDES
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DIJANAH COTA MACHADO
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LUIZ BEZERRA DE CARVALHO JÚNIOR
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Data: 28/02/2022
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Os canais iônicos são proteínas integrais presentes nas membranas celulares responsáveis pelas trocas iônicas entre os meios intra e extracelulares e entre as organelas e o citoplasma. Eles estão envolvidos em muitos processos fisiológicos, como a geração de impulsos nervosos, secreção hormonal, batimento cardíaco, entre inúmeros outros processos. A cinética dos canais iônicos é classicamente tratada como um processo aleatório, conhecido como processo de Markov. Mais recentemente, no entanto, vários estudos mostraram que esse processo não é aleatório, mas sim determinístico, ou seja, é histórico-dependente. Essa propriedade é chamada de memória longa ou correlação de longo alcance. No entanto, ainda há muita controvérsia a respeito de como essa propriedade se origina e qual região do canal é responsável por essa propriedade. Na presente tese de doutorado realizamos uma revisão da literatura sobre memória em cinética de canais iônicos e publicamos no periódico Acta Biotheoretica, no ano de 2021. Nesta revisão são discutidos quais os fatores intrínsecos e extrínsecos relacionados com a origem da memória longa na cinética dos canais iônicos, quais modelos reproduzem melhor o efeito memória, quais métodos matemáticos são utilizados para sua análise, como também a ubiquidade dessa propriedade em diferentes tipos de canais iônicos. Nas nossas análises experimentais, aplicamos o método de Entropia Aproximada para investigar a existência de aleatoriedade no processo cinético dos canais de α-hemolisina de Staphylococcus aureus, bem como o método de Análise de Flutuação Destendenciada (Detrended Fluctuation Analysis-DFA) para investigar a existência de memória longa nesse processo. Esses canais foram incorporados em bicamadas lipídicas compostas por difitanoilfosfatidilcolina construídas pela aposição de duas monocamadas lipídicas a um orifício de uma partição que separa dois compartimentos aquosos. Todos os experimentos foram realizados nas seguintes condições: solução tamponada de NaCl 1M, pH 4,5; voltagem de 40 mV e temperatura de 25 ± 1 ° C. As correntes no canal unitário foram registradas em tempo real na memória de um microcomputador acoplado a um conversor A/D e um amplificador de patch-clamp. O valor médio da condutância dos canais de α-hemolisina foi de 0,82 ± 0,0025 𝑛𝑆 (𝑛=128). Nossos resultados mostraram que a cinética dos canais é um processo determinístico, com presença de memória longa (𝐷𝐹𝐴𝛼= 0,63 ± 0,04) e que o expoente de Hurst após a aleatorização dos dados foi de 0,51 (± 0,03), comprovando que a presença de memória longa é uma característica do processo cinético dos canais e não um artefato da série numérica. Os resultados obtidos através do método de entropia aproximada (𝐴𝑝𝐸𝑛𝐴=0.55142 (± 0,28; 𝐴𝑝𝐸𝑛𝐹 = 0.114472 ±0.082541) corroboram com os resultados do método DFA, eles mostraram que a complexidade das séries originais do estado aberto, tendem a aumentar após randomização dos dados, o que demostra que o comportamento das séries possui repetições de padrões ao longo do tempo, sendo um indicativo de presença de uma dinâmica determinística. Nossos resultados demonstraram que mesmo canais iônicos simples, que não são formados por grandes domínios de proteínas e não possuem domínios de gating, também apresentam um comportamento determinístico, com presença de memória longa.
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Ion channels are integral proteins present in cell membranes responsible for ionic flux between intra and extracellular environment and between organelles and the cytoplasm. They are involved in many physiological processes, such as the generation of nerve impulses, hormone secretion, heartbeat, among countless other processes. The kinetics of ion channels is classically treated as a random process, known as the Markov process. More recently, however, several studies have shown that this process is not random, but deterministic, that is, it is history dependent. This property is called long memory or long-term correlation. However, there is still a lot of controversy as to how this property originates and which region of the channel is responsible for this property. In the present doctoral thesis, we carried out a review of the literature on memory in ion channel kinetics and published it in the journal Acta Biotheoretica, in the year 2021. In this review, the intrinsic and extrinsic factors related to the origin of long memory in channel kinetics are discussed. which models best reproduce the memory effect, which mathematical methods are used for its analysis, as well as the ubiquity of this property in different types of ion channels. In our experimental analyses, we applied the Approximate Entropy method to investigate the existence of randomness in the kinetic process of the α-hemolysin channels of Staphylococcus aureus, as well as the Detrended Fluctuation Analysis-DFA method to investigate the existence long memory in this process. These channels were incorporated into lipid bilayers composed of difitanoylphosphatidylcholine constructed by apposition of two lipid monolayers to an orifice of a partition that separates two aqueous compartments. All experiments were performed under the following conditions: 1M NaCl buffered solution, pH 4.5; voltage of 40 mV and temperature of 25 ± 1 ° C. Ionic currents in the single-channel were recorded in real time in the memory of a microcomputer coupled to an A/D converter and a patch-clamp amplifier. The mean value of the conductance of the α-hemolysin channels was 0.82 ± 0.0025 𝑛𝑆 (𝑛=128). Our results showed that the channel kinetics is a deterministic process, with the presence of long memory (𝐷𝐹𝐴𝛼= 0.63 ± 0.04) and that the Hurst exponent after data randomization was 0.51 (± 0.03), proving that the presence of long memory is a characteristic of the kinetic process of the channels and not an artifact of the numerical series. The results obtained through the approximate entropy method (𝐴𝑝𝐸𝑛𝐴=0.55142 (± 0,28; 𝐴𝑝𝐸𝑛𝐹 = 0.114472 ±0.082541) corroborate the results of the DFA method, they showed that the complexity of the original open state series tend to increase after randomization of the data, which shows that the behavior of the series has repetitions of patterns over time, indicating the presence of a deterministic dynamics. Our results showed that even simple ion channels, which are not formed by large protein domains and are not have gating domains, they also have a deterministic behavior, with the presence of long memory.
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GYL EVERSON DE SOUZA MACIEL
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EFEITO DO TREINAMENTO FÍSICO SOBRE A MORFOFISIOLOGIA CARDIOVASCULAR, RENAL, ESTRESSE OXIDATIVO E COMPORTAMENTO EM RATOS SUBMETIDOS AO USO CRÔNICO DE ESTEROIDES ANABOLIZANTES.
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Orientador : ANISIO FRANCISCO SOARES
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MEMBROS DA BANCA :
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ANISIO FRANCISCO SOARES
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ANNA MYRNA JAGUARIBE DE LIMA
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LEUCIO CAMARA ALVES
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MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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NATALIE EMANUELLE RIBEIRO RODRIGUES
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Data: 22/06/2022
Ata de defesa assinada:
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A cada década o estanozolol o uso indiscriminado vem aumentando nas academias, pelo fato de promover aumento de força sem ganho de peso extra, não se converter em estrógeno, não causar retenção de água em excesso, além de ajudar na perda de gordura preservando a massa muscular. No entanto, o uso indiscriminado e sem prescrição medica, pode causar complicações cardiovasculares, disfunção hepática, lesão renal, distúrbios psiquiátricos, redução da tiroide e infertilidade. Objetivamos investigar os efeitos do estanozolol sobre a pressão sistólica, parâmetros renais, hepaticos e comportamentais em ratos sedentários e treinados, além de Descrever o perfil de praticantes de musculação de Pernambuco que fazem uso de esteroides (EAA). Tendo em vista que a literatura aborda apenas durante atividades físicas. Para tanto, foram selecionados 40 animais, com 90 dias e divididos em quatro grupos: grupo controle veiculo (n=5) que recebeu solução salina, via intramuscular e o grupo controle estanozolol (n=5) no qual foi administrado estanozolol, grupo controle treinado (n=5) recebeu solução salina, via intramuscular e treinou natação, grupo treinado estanozolol (n=5) recebeu estanozolol intramuscular e treinou natação. O estanozolol apresentou aumentos significativos, na pressão artéria e estresse oxidativo. Além de promover alterações comportamentais entre ratos que cresceram juntos, acarretando na elevação da agressividade durante e após o uso do esteroide. 30,2% da amostra foi composta por usuários de EAA. O uso de estanozolol compromete os sistemas cardiovascular, renal, hepático e promove aumento no comportamento agressivo, em elevadas doses. Algo que precisa ser contornado, tendo em vista o impacto negativo na saúde, quando não prescrito adequadamente.
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With each decade, stanozolol indiscriminate use has been increasing in gyms, because it promotes strength increase without extra weight gain, does not convert into estrogen, does not cause excess water retention, in addition to helping with fat loss while preserving mass. muscle. However, indiscriminate use and without medical prescription, can cause cardiovascular complications, liver dysfunction, kidney damage, psychiatric disorders, thyroid reduction and infertility. We aim to investigate the effects of stanozolol on systolic pressure, renal, hepatic and behavioral parameters in sedentary and trained rats, in addition to describing the profile of bodybuilders in Pernambuco who use steroids (ASA). Considering that the literature addresses only during physical activities. For that, 40 animals were selected, aged 90 days and divided into four groups: vehicle control group (n=5) that received saline solution, intramuscularly and the stanozolol control group (n=5) in which stanozolol was administered, control group trained group (n=5) received saline solution intramuscularly and trained swimming, trained stanozolol group (n=5) received intramuscular stanozolol and trained swimming. Stanozolol showed significant increases in arterial pressure and oxidative stress. In addition to promoting behavioral changes among rats that grew up together, resulting in increased aggressiveness during and after steroid use. 30.2% of the sample consisted of EAA users. The use of stanozolol compromises the cardiovascular, renal and hepatic systems and promotes an increase in aggressive behavior at high doses. Something that needs to be circumvented, given the negative impact on health, when not properly prescribed.
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JULIANNE MOURA DA SILVA
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Relações ecológicas, aspectos ecofisiológicos e comportamentais da espécie Alouatta belzebul (Linnaeus, 1766) em fragmentos de Mata Atlântica de Pernambuco.
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Orientador : MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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CARLA SORAIA SOARES DE CASTRO
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DILMAR ALBERTO GONÇALVES DE OLIVEIRA
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LEUCIO CAMARA ALVES
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MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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VALDIR LUNA DA SILVA
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Data: 27/06/2022
Ata de defesa assinada:
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Os primatas neotropicais do gênero Alouatta se distinguem dos demais por emitirem altas vocalizações (roncos) e por apresentarem um comportamento sedentário em função da dieta frugívora-folívora, que pela grande quantidade de folhas consumidas, requer um longo processo digestivo. Esses primatas escolhem pontos específicos para defecar e abaixo desses locais são vistos bancos de sementes acumuladas no solo, bem como besouros utilizando as fezes como recurso alimentar e reprodutivo. Do ponto de vista endoparasitário, essa dieta frugívora-folívora diversificada é favorável para os guaribas, pois as espécies vegetais podem ter ação antiparasitária. A situação das populações nordestinas de Alouatta belzebul é crítica, devido ao intenso processo de fragmentação de áreas florestais e caça. Em Pernambuco, só se tem registro da presença dessa espécie em uma área. Desta forma, o presente estudo se baseou na ecologia fecal da espécie Alouatta belzebul para elucidar os aspectos da dispersão de sementes, associações com besouros escarabeídeos e parasitologia fecal dos grupos, para com esses dados trazer recomendações que venham a contribuir para a conservação da população no Estado. Foram monitorados mensalmente, entre os períodos de junho de 2018 a fevereiro de 2020 e de dezembro de 2020 a setembro de 2021, os sítios de defecaçação dos grupos de guaribas-de-mãos-ruivas habitantes de dois fragmentos da Mata de Sacramento para a coleta de amostras fecais. Em 13 sítios de defecação foram coletadas 349 amostras fecais, que continham 8.600 sementes de 33 morfoespécies diferentes. Sementes de Schefflera morototoni e a Sloanea obtusifolia representaram 67% das sementes, ambas associadas com recente impacto antrópico, visto que comumente ocorrem em estágios iniciais de sucessão na Mata Atlântica. Plântulas de Sloanea obtusifolia foram encontradas em dois sítios de defecação, indicando que sementes excretadas nas fezes dos guaribas-de-mãos-ruivas são viáveis em termos de germinação. As análises parasitológicas de 250 amostras de fezes pela técnica de Mini-FLOTAC associada ao Fill-FLOTAC e pelo exame coproparasitológico direto apontaram positividade para algum tipo de endoparasito no total de amostras (29/250), sendo encontrados nemátodas da Família Ascarididae (1/250), dos Gêneros Platynosomum (5/250), Strongyloides (7/250), Ancylostoma (9/250) e da espécie Trypanoxyuris minutus (12/250), não sendo observada diferença significativa no perfil parasitário dos grupos. Comprovando a associação dos grupos de A.belzebul com besouros escarabeídeos nas duas matas, foram encontrados 304 besouros nas fezes dos guaribas (n= 545), distribuídos em 10 táxons, incluindo os gêneros Canthidium, Onthophagus e a espécie Eurysternus hirtellus. As armadilhas de queda coletaram 878 espécimes, distribuídos em 32 táxons (quase três vezes o das fezes), incluindo uma espécie exótica. Diante disso, podemos confirmar a importância ecológica dos guaribas para os dois fragmentos estudados, bem como podemos concluir que apesar do distanciamento entre os grupos, eles apresentam uma dieta e perfil parasitários similares. Isto consolida os argumentos necessários para a confecção de corredores e restauração dos ambientes da área de estudo que abriga a única população de guariba no Estado de Pernambuco.
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Neotropical primates of the genus Alouatta are distinguished from others primates by emitting high vocalizations (howl) and a sedentary behaviour due to the frugivorous-folivore diet, which, due to the large amount of leaves consumed, requires a long digestive process. These primates choose specific places to defecate and below these places are seen banks of seeds accumulated in the soil, and dung beetles using the faces as a food and reproductive resource. In relation to endoparasites, this diversified frugivorous-folivore diet is favorable for howler monkeys, because the plant species may have antiparasitic action. The situation of the Northeastern populations of Alouatta belzebul is critical, due to the intense process of fragmentation of forest areas and hunting. In Pernambuco, the presence of this species is only recorded in one area. The present study was based on the fecal ecology of the Alouatta belzebul species to elucidate aspects of seed dispersal, associations with dung beetles and fecal parasitology of the groups, in order to provide recommendations that will contribute to the conservation of the population in the State. From June 2018 to February 2020 and from December 2020 to September 2021, the defecation sites of groups of red-handed howler monkeys inhabiting two fragments of Mata de Sacramento were monitored monthly for collection of fecal samples. In 13 defecation sites, 349 fecal samples were collected, which contained 8,600 seeds of 33 different morphospecies. Schefflera morototoni and Sloanea obtusifolia represented 67% of the seeds, both associated with recent anthropic impact, as they commonly occur in early successional stages in the Atlantic Forest. Seedlings of Sloanea obtusifolia were found in two defecation sites, indicating that seeds excreted in the faces of red-handed howler monkeys are viable in terms of germination. The parasitological analysis of 250 stool samples using the Mini-FLOTAC technique associated with the Fill-FLOTAC and by direct coproparasitological examination showed positivity for some type of endoparasites in the total of samples (29/250), being found nematodes of the Ascarididae Family (1/ 250), the genera Platynosomum (5/250), Strongyloides (7/250), Ancylostoma (9/250) and the species Trypanoxyuris minutus (12/250), with no significant difference being observed in the parasite profile of the groups. Proving the association of A.belzebul groups with scarab beetles in the two forests, 304 beetles were found in the faces of howler monkeys (n= 545), distributed in 10 taxa, including the genera Canthidium, Onthophagus and the species Eurysternus hirtellus. The pitfall traps collected 878 specimens, distributed in 32 taxa (almost three times that of faces), including one exotic species. Therefore, we can confirm the ecological importance of red-handed howler monkeys for the two fragments studied, as well as we can conclude that despite the distance between the groups, they have a similar diet and prevalence of gastrointestinal parasites. This consolidates the arguments necessary for the creation of corridors and the restoration of environments in the study area, which houses the only population of howler monkeys in the State of Pernambuco.
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TATIENE ROSSANA MÓTA SILVA
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Distribuição espacial e caracterização molecular das linhagens de Trypanosoma cruzi em triatomíneos em municípios do Agreste de Pernambuco
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Orientador : GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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MEMBROS DA BANCA :
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GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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LEUCIO CAMARA ALVES
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CARLOS ALBERTO DO NASCIMENTO RAMOS
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VALÍRIA CERQUEIRA DUARTE
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EDYNIESKY FERRER MIRANDA
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Data: 28/06/2022
Ata de defesa assinada:
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Trypanosoma cruzi apresenta população heterogênea com sete linhagens reconhecidas, denominadas de Discrete Typing Units (DTU’s). O conhecimento das DTUs de T. cruzi pode contribuir para melhor compreensão da epidemiologia da Doença de Chagas e os possíveis fatores de risco de infecção ao homem. O objetivo deste estudo foi realizar levantamento entomológico de triatomíneos, detectar a frequência da infecção por T. cruzi e identificar as linhagens presentes em municípios do agreste de Pernambuco, Brasil. A partir de dados do Programa Nacional de Controle da Doença de Chagas (PNCDch), foi realizado um estudo retrospectivo (2008-2017) para avaliar a ocorrência e distribuição de triatomíneos em 21 municípios. Durante o período de julho de 2018 a junho de 2019, triatomíneos foram coletados no intradomicílio e peridomicílio e identificados, para posterior extração de DNA. A pesquisa de T. cruzi foi realizada por meio de exames parasitológicos e moleculares. Para a pesquisa de DNA de Trypanossoma spp. foi realizada PCR, os produtos amplificados foram purificados e sequenciados. A genotipagem de T. cruzi foi realizada por Multiplex PCR. Para avaliar a distribuição espaço-temporal de triatomíneos infectados por tripanossomatídeos foram usados dados do PNCDch (2008-2018), incluindo o número total de triatomíneos capturados nas áreas intra e peridomiciliares, bem como a taxa de infecção (TI) por tripanossomatídeos. O método por Getis–Ord foi usado para identificar agrupamentos de concentração estatisticamente significativos e a TI. O modelo de regressão linear generalizado com distribuição binomial foi usado para avaliar a probabilidade de detectar a taxa de infecção por tripanossomatídeos. Através do estudo retrospectivo, um total de 4694 triatomíneos foram coletados, sendo 94,5% no intradomicílio e 5,5% no peridomicílio. As espécies mais frequentes foram Panstrongylus lutzi (30,36%), Triatoma brasiliensis (26,12%), Triatoma pseudomaculata (22,43%) e Panstrongylus megistus (20,54%). Um total de 117 triatomíneos foram coletados, sendo 93,16% e 6,84% em ambientes intradomiciliar e peridomiciliar, respectivamente. As espécies capturadas foram P. lutzi (37,60%), Triatoma pseudomaculata (26,50%), T. brasiliensis (23,08%) e P. megistus (12,82%). A taxa de infecção por T. cruzi foi de 5,49% e 12,09% em exames parasitológicos e moleculares, respectivamente. A análise molecular detectou 70,59% de genótipo TcI, em todas as espécies de triatomíneos identificadas e 29,41% de TcIII/TcIV em P. megistus e P. lutzi. A análise da distribuição espaço-temporal de triatomíneos infectados por tripanossomatídeos foi realizada com 4.800 triatomíneos, formas flagelares semelhantes a T. cruzi foram detectadas em 10,29% deles, e a maioria das amostras positivas (98,17%) foram coletadas no intradomicílio. As análises geoespaciais identificaram aglomerados de triatomíneos em ambientes intradomiciliares e peridomiciliares. A regressão logística para as espécies (P. lutzi, P. megistus, Triatoma brasiliensis e T. pseudomaculata) demonstrou que a probabilidade de detecção da infecção por T. cruzi permanece constante em até 50 espécimes examinados ou mais. A presença de triatomíneos infectados em áreas de intra e peridomicílio alerta para a implementação de ações de vigilância, como educação em saúde nas áreas de maior vulnerabilidade de ocorrência desses vetores. E, adoção de medidas de controle entomológico sistemático para reduzir os riscos de infestação e, consequentemente, da doença de Chagas.
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Trypanosoma cruzi presents a heterogeneous population with seven lineages recognized, called Discrete Typing Units (DTU's). The knowledge of T. cruzi DTUs can contribute to a better understanding of the epidemiology of Chagas Disease and the possible risk factors for infection to man. The aim of this study was to carry out an entomological survey of triatomines, detect the frequency of T. cruzi infection and identify the lineages present in municipalities in the rural region of Pernambuco, Brazil. Based on data from the the Brazilian National Chagas Disease Control Program (PNCDCh), a retrospective study (2008-2017) was carried out to assess the occurrence and distribution of triatomines in 21 municipalities. In addition, during the period from July 2018 to June 2019, triatomines were collected in intradomicile and peridomicile area and identified for subsequent DNA extraction. The search for T. cruzi was carried out through parasitological and molecular exams. For the DNA research of Trypanosoma spp. PCR was performed, the amplified products were purified and sequenced. T. cruzi genotyping was performed by Multiplex PCR. To evaluate the spatiotemporal distribution of triatomines infected by trypanosomatid parasites, data from the PNCDch (2008-2018) were used, the total number of triatomines captured from intradomicile and peridomicile areas, as well as the infection rate (IR) by trypanosomatid. The method by Getis–Ord method was used to statistically identify significant concentration clusters and the IR of triatomines by trypanosomatids. A generalized linear regression model with a binomial distribution was used to evaluate the probability of of finding an IR by trypanosomatids. Through the retrospective study, a total of 4694 triatomines were collected, 94.5% and 5.5% from the intradomiciliary and peridomiciliary environments. The most frequent species were Panstrongylus lutzi (30.36%), Triatoma brasiliensis (26.12%), Triatoma pseudomaculata (22.43%) and Panstrongylus megistus (20.54%). A total of 117 triatomines were collected, 93.16% and 6.84% from the intradomiciliary and peridomiciliary environments, respectively. The captured species were P. lutzi (37.60%), T. pseudomaculata (26.50%), T. brasiliensis (23.08%) and P. megistus (12.82%). The T. cruzi infection rate was 5.49% and 12.09% in parasitological and molecular tests, respectively. The analysis molecular detected 70.59% of the TcI genotype in all triatomine species identified and 29.41% of the TcIII/TcIV in P. megistus and P. lutzi. The analysis of the spatiotemporal distribution of triatomines infected by trypanosomatids was performed with 4,800 triatomines, flagellar forms similar to T. cruzi were detected in 10.29% of them, the majority of positive specimens (98.17%) were collected at intradomicile. The geospatial analyses identified triatomines clusters in intradomicile and peridomicile environments. The logistic regression for species (P. lutzi, P. megistus, T. brasiliensis and T. pseudomaculata) showed that the probability of detection of T. cruzi infection remains constant in up to 50 specimens examined or more. The presence of infected triatomines in intra and peridomicile areas calls for the implementation of surveillance actions, such as health education in areas where these vectors are most vulnerable. In addition, adoption of systematic entomological control measures to reduce the risks of infestation and, consequently, of Chagas disease.
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ANA CLAUDIA CARVALHO DE SOUSA
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ATUAÇÃO DA MELATONINA SOBRE O FÍGADO E RINS EM RATOS HIPERLIPIDÊMICOS INDUZIDOS PELO TYLOXAPOL
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Orientador : VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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ALVARO AGUIAR COELHO TEIXEIRA
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ANISIO FRANCISCO SOARES
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FERNANDA DAS CHAGAS ÂNGELO MENDES TENÓRIO
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ISMAELA MARIA FERREIRA DE MELO
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VALERIA WANDERLEY TEIXEIRA
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Data: 29/06/2022
Ata de defesa assinada:
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Hiperlipidemia se caracteriza pelas concentrações anormais de lipoproteínas no plasma, tendo como principais causa o consumo de dietas ricas em gorduras e o sedentarismo. A elevação plasmática de lipoproteínas aumenta o risco de desenvolvimento de doença cardiovascular, que pode levar a morte ou incapacidade física, tornando-se assim um problema de saúde pública. A peroxidação de lipídios leva a formação de espécies reativas de oxigênio, que quando em excesso podem levar a ativação de genes para produção de mediadores inflamatórios, tais como TNF-α e interleucinas, que pode gerar uma desregulação na homeostase celular, em especial em órgãos de alto teor metabólico como fígado e rins. A melatonina também apresenta um papel protetor contra o estresse oxidativo, sendo um potente captador de radicais livres, protegendo deste modo células e tecidos de danos. Desta forma, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar os efeitos da melatonina sobre o fígado e os rins de ratos hiperlipidêmicos, induzidos pelo tyloxapol. Utilizou-se 15 animais em 3 grupos: Controle; Tyloxapol; Tyloxapol+Melatonina. A hiperlipidemia foi induzida através da aplicação tyloxapol (Sigma Aldrich), durante quinze dias alternados, por via intraperitoneal, na dose de 400mg/Kg de peso corporal. Já a melatonina foi administrada simultaneamente ao tyloxapol em injeções diárias, por 15 dias, via intraperitoneal na dosagem de 20 mg/Kg. O tratamento com melatonina demonstrou ter um efeito atenuador sobre os parâmetros bioquímicos de animais hiperlipidêmicos, reduzindo em média 80% os níveis de triglicerídeos e VLDL quando em relação ao grupo tyloxapol, após 15 dias de tratamento, apresentando também efeito protetivo no parênquima hepático que se mostrou sem alterações. Além disso, a administração de melatonina reduziu a expressão de citocinas pró-inflamatórias e aumentou a expressão das anti-inflamatórias. Nos rins a melatonina também apresentou efeitos protetivos, promovendo uma normalização dos biomarcadores da função renal e do parênquima renal, que não apresentou anormalidades. Nos rins também foi observado que a melatonina reduziu a expressão de citocinas pró-inflamatórias e aumentou a expressão das anti-inflamatórias. Portanto, é possível afirmar que este hormônio apresenta efeitos protetivos sobre o fígado e rins durante a hiperlipidemia.
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Hyperlipidemia, also known as dyslipidemia, is characterized by an increase in triglyceride and LDL levels and a reduction in HDL levels, which may be a result of primary factors, of a genetic nature, or secondary, as a result of external causes such as a diet rich in fat, sedentary lifestyle, smoking, and obesity. The relationship with cardiovascular diseases makes hyperlipidemia a public health problem, which can lead to death or physical disability. The liver is the organ responsible for lipid and cholesterol homeostasis, being extremely important in biochemical regulation and lipid homeostasis. The peroxidation of these lipids leads to the formation of reactive oxygen species (ROS), which when in excess can lead to the activation of genes for the production of inflammatory mediators, such as tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and interleukins (IL), that can lead to dysregulation of cellular homeostasis, especially in high metabolic organs such as liver and kidneys. Melatonin has a protective role against oxidative stress, being a potent free radical scavenger, thus protecting cells and tissues from damage. Thus, the present research aimed to evaluate the effects of melatonin on the liver and kidneys of hyperlipidemic rats induced by tyloxapol. Fifteen animals were used in 3 groups: Control Group (CG): animals without hyperlipidemia induction; Hyperlipidemic group (TG); Hyperlipidemic group treated with Melatonin (GTM). Hyperlipidemia was induced by intraperitoneal injection, for fifteen interleaved days, of Triton WR 1339, also known as tyloxapol (Sigma Aldrich), at a dose of 400mg/Kg. Melatonin was administered in daily injections for 15 days, intraperitoneally at a dose of 20 mg/kg. Biochemical analyzes at 7 days of treatment revealed that there were no significant differences between the GT and GTM groups in relation to LDL and VLDL, although treatment with melatonin reduced serum levels of triglycerides, cholesterol, alkaline phosphatase, TGP, and TGO. At 15 days of treatment, it was found that treatment with melatonin led to a reduction in the levels of all biochemical parameters. The histopathological analysis showed that in the group treated only with tyloxapol, steatosis and leukocyte infiltrate were observed, while the group treated with tyloxapol and melatonin showed no changes in the liver parenchyma. non-lobular, present in the GT group. Melatonin treatment also considerably reduced lobular and hepatocyte inflammation, which was observed in the hyperlipidemic group. Immunohistochemical analysis revealed a reduction in the expression of inflammatory cytokines and an increase in anti-inflammatory in the group treated with melatonin.
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CYNTHIA MARIA MORAIS DE QUEIROZ GALVÃO
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Soroprevalência da infecção por Toxoplasma gondii, Neospora caninum, Leishmania spp. e Leptospira spp. em cães, caprinos e ovinos naturalmente expostos em aldeias indígenas no estado de Pernambuco
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Orientador : RINALDO APARECIDO MOTA
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MEMBROS DA BANCA :
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RINALDO APARECIDO MOTA
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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MÜLLER RIBEIRO ANDRADE
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KARLA PATRICIA CHAVES DA SILVA
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WAGNNER JOSE NASCIMENTO PORTO
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Data: 29/06/2022
Ata de defesa assinada:
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Estudos sobre agentes infeciosos que circulam em comunidades indígenas são escassos, não apenas no Brasil, mas em diversas partes do mundo. Os povos originários, até os dias atuais, ainda vivem sobre uma conjuntura de exclusão histórica, e as consequências são observadas nas condições de precariedade e desigualdades nos índices sociais, sobretudo entre os indicadores de saúde. Investigações sorológicas acerca de agentes infeciosos que circulam em animais das comunidades indígenas representam importantes ferramentas para traçar o perfil epidemiológico das doenças, além de contribuir para implementação de programas de sanidade e melhoria na produção animal nestas populações, uma vez que grande parte das famílias residentes nas aldeias possui a pecuária como fonte de subsistência. Adicionalmente, também auxiliam no controle e prevenção de enfermidades nestas populações, pois mais de 70% das doenças mundialmente diagnosticadas em humanos são de origem animal. Desta forma, este trabalho objetivou pesquisar a presença de agentes infecciosos em duas populações indígenas no Nordeste do Brasil, estado de Pernambuco. Na etnia Xukuru, no município de Pesqueira; e etnia Fulni-ô, localizada no município de Águas Belas. Na comunidade Xukuru foram analisados 180 soros ovinos (Ovis aries) e 108 soros caprinos (Capra aegagrus hircus), onde a presença de Toxoplasma gondii e Neospora spp foi investigada através da técnica de Imunofluorescência Indireta (RIFI), enquanto para Leptospira spp., as análises foram executadas por Aglutinação Microscópica (MAT). Na etnia Fulni-ô, a pesquisa foi realizada em 66 soros caninos (Canis Lupus familiaris), e o diagnóstico realizado através da RIFI para T. gondii e N. caninum, MAT para Leptospira spp. e o kit TR DPP® 7 Leishmaniose Visceral Canina da Bio-Manguinhos para Leishmania spp. Os resultados obtidos na população Xukuru demonstraram uma frequência de anticorpos para T. gondii de 16,6% em ovinos e 11,1% em caprinos; para N. caninum 10,5% dos ovinos e 20,73% apresentaram reações positivas, enquanto 15% dos ovinos e 19,4% dos caprinos foram reagentes para Leptospira spp. Na comunidade Fulni-ô, as análises demonstraram uma frequência de 9,09% para T. gondii; 22,72% para N. caninum; 22,72% para Leishmania spp. e 18,8% para Leptospira spp. nos caninos. Os resultados evidenciam que agentes infecciosos de relevância para a Medicina Veterinária e Humana circulam em populações indígenas do estado de Pernambuco, e ressaltam a relevância do monitoramento dos animais residentes nas aldeias, bem como, a necessidade de programas de saúde nestas populações.
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Research about infectious agents in indigenous population are scarce not only in Brazil, but around the world. Historically, indigenous people are marginalized, and until nowadays, face disproportionately high rates of poverty and diseases. Serological investigation regarding infectious agents in animals that live in indigenous communities can work as important tools to demonstrate epidemiological diseases parameters and can support to design policies animal programs to improve livestock quality, since most of indigenous families use livestock as food supply. In addition, contribute to control and prevent illness in this population, considering that 70% of the diagnosed disease in human arose from animals. The aim of this study was to investigate infectious agents in two indigenous populations, Northeast of Brazil, Pernambuco estate, Xukuru ethnic, in Pesqueira country and Fulni-ô ethnic located in Águas Belas country. In the Xukuru community, 180 sheeps (Ovis aries) sera and 108 goats (Capra aegagrus hicus) sera were analyzed, diagnosis for Toxoplasma gondii and Neospora caninum was performed using Indirect Immunofluorescence Assay (IFA), whereas for Leptospira spp. Microscopic Aagglutination Test (MAT) was employed. In the Fulni-ô population the research was executed in 66 canine sera by IFA for T. gondii and N. caninum, for the diagnosis of Leptospira spp. MAT, whereas Leishmania spp. kit TR DPP® 7 Canine Visceral Leishmaniosis Bio-Manguinhos was used. The results obtained in the Xukuru ethnic demonstrated that 16,6% of the sheeps and 11,1% goats showed antibodies against T. gondii; 10,5% of the sheeps and 20,73 of the goats were seropositive for N. caninum, while 15% of the sheeps and 19,4% of the goats were Leptospira spp. positive reaction. In the Fulni-ô population the analyses showed a frequency of 46,9% for T. gondii; 9,09% for N. caninum; 22,72% for Leishmania spp. and 18,18% for Leptospira spp. in the dogs. The results obtained in this study evidenced that important infectious agents for animal and human medicine are propagated in indigenous populations in Pernambuco estate and evidence the requirement of animal monitoring, besides the necessity of health programs in this population.
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ELAINE CRISTINA DA SILVA
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Otimização de produção de Exopolissacarideo por bactérias ácido láticas e sua atividade antioxidante
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Orientador : MARIA TACIANA HOLANDA CAVALCANTI
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MEMBROS DA BANCA :
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MARIA TACIANA HOLANDA CAVALCANTI
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KEILA APARECIDA MOREIRA
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RAQUEL PEDROSA BEZERRA
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TATIANA SOUZA PORTO
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PAULO ANTONIO GALINDO SOARES
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Data: 29/06/2022
Ata de defesa assinada:
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RESUMO Os exopolissacarídeos (EPS) sintetizados por bactérias ácido lácticas (BAL) têm despertado muito interesse devido as suas várias características funcionais em diversos setores. O objetivo deste trabalho foi produzir, caracterizar e aplicar biotecnologicamente exopolissacarídeos produzidos por bactérias ácido láticas através da fermentação do soro de queijo. Mais de sessenta BAL, entre elas cepas probióticas, compostas por Lactobacillus, Enterococcus, Strepctococcus e Lactococcus foram cultivadas em soro de queijo e avaliadas quanto a produção de EPS. Para otimizar a produção do EPS pela BAL selecionada, foi utilizado um delineamento experimental estatístico em que o pH, temperatura e tempo de fermentação foram avaliados. A prévia caracterização do polímero foi realizada através de testes, como: açúcares totais, ácido urônico, proteína e identificação de grupos funcionais. Por fim, para avaliar a capacidade de sequestrar radicais livres, o EPS foi testado em concentrações de 0.2 a 2 mg/ml, quanto a atividade antioxidante e nela utilizou-se radicais como DPPH, ABTS, hidroxila e superóxido. Os resultados obtidos revelaram que a BAL selecionada para produção do EPS foi a Enterococcus spp. (133v) com 6.58 mg/ml. A máxima produção do EPS133v, após delineamento experimental, foi de 21.74 mg/ml sob a condição de fermentação em temperatura de 42 °C e 14 horas de cultivo em soro de queijo. Os dados para a caracterização do EPS indicam que o polímero apresenta 1,86% de ácido urônico e 5,28% de proteinas, além dos grupos hidroxila, típicos de carboidratos. Os ensaios in vitro de atividade antioxidante mostraram que os radicais DPPH, ABTS e superóxido tiveram sua capacidade reduzida em todas as concentrações de EPS com máximo de 27.72%, 72.20% e 43.23%, respectivamente. A capacidade de sequestro da hidroxila por EPS foi expressa a partir da concentração máxima de 2 mg/ml com apenas 1.29%. Em resumo, este trabalho mostra que o soro de queijo provou ser uma boa alternativa para fermentação de Enterococcus spp. resultando na produção de um composto bioativo como o EPS com potencial para ser um antioxidante natural ou aditivo funcional na indústria alimentícia.
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Exopolysaccharides (EPS) synthesized by lactic acid bacteria (LAB) have aroused much interest due to their various functional characteristics in several industries. The aim of this work was to produce, characterize and biotechnologically apply exopolysaccharides produced by lactic acid bacteria through cheese whey fermentation. More than sixty LAB, including probiotic strains Lactobacillus, Enterococcus, Streptococcus and Lactococcus were cultivated in cheese whey and evaluated for high EPS production. To optimize the production of EPS by the selected BAL, a statistical experimental design was used in which pH, temperature and fermentation time were evaluated. Prior characterization of the polymer was performed through tests such as: total sugars, uronic acid, protein, and identification of functional groups by FTIR. Finally, to evaluate the ability to scavenging free radicals, the EPS was tested in concentrations from 0.2 to 2 mg/ml, for antioxidant activity, using radicals such as DPPH, ABTS, hydroxyl and superoxide. The results obtained revealed that the BAL selected for EPS production was Enterococcus spp. (133v) with 6.58 mg/ml. The maximum production of EPS133v, after experimental design, was 21.74 mg/ml under the condition of fermentation at 42 °C of temperature and 14 hours of cultivation in cheese whey. The data for EPS characterization indicate that the polymer presents 1.86% of uronic acid and 5.28% of proteins. FTIR results showed typical functional groups of carbohydrates. In vitro antioxidant activity assays showed that DPPH, ABTS and superoxide radicals had their capacity reduced at all EPS concentrations with maximum of 27.72%, 72.20% and 43.23%, respectively. The hydroxyl scavenging capacity by EPS was obtained from the maximum concentration of 2 mg/ml with 1.29%. In summary, this work shows that cheese whey proved to be a good alternative for fermentation of Enterococcus spp. resulting in the production of EPS with potential to be a natural antioxidant or functional additive in the food industry.
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EVA LUANA ALMEIDA DA SILVA
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Efeito do campo magnético de baixa frequência na atividade elétrica cortical de ratos após indução de status epilepticus.
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Orientador : ROMILDO DE ALBUQUERQUE NOGUEIRA
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MEMBROS DA BANCA :
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ROMILDO DE ALBUQUERQUE NOGUEIRA
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EMMANUEL VIANA PONTUAL
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ISVÂNIA MARIA SERAFIM DA SILVA LOPES
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JULIANA OLIVEIRA DE CARVALHO
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EDBHERGUE VENTURA LOLA COSTA
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Data: 30/06/2022
Ata de defesa assinada:
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A sociedade atual utiliza constantemente inúmeros recursos elétricos em seu cotidiano. Quando a corrente elétrica é colocada em movimento é gerado um campo magnético em torno da corrente, quando se trata da fiação elétrica comum o Campo Eletromagnético (CEM) correspondente possui a frequência extremamente baixa de até 60 Hz. A literatura apresenta inúmeros estudos dedicados a descobrir quais as influências da exposição ao CEM em indivíduos saudáveis ou em face de algum distúrbio. Entretanto existem contradições entre os reais efeitos desta exposição, não há consenso quanto a causa, prejuízos à saúde, possibilidades no tratamento de enfermidades ou se o mesmo não causa qualquer influência aos organismos. E, os dados que relacionam a exposição ao CEM de até 60 Hz na atividade elétrica cerebral são escassos. A epilepsia é a doença neurológica mais comum no mundo, e a disfunção elétrica cortical torna o indivíduo epiléptico sensível a convulsões em vários aspectos, entre eles o ambiental. Desta forma, seria o paciente com epilepsia sujeito a exposição ao CEM mais propenso a desencadear alterações em sua dinâmica elétrica cortical? Em caso afirmativo, tais alterações causam prejuízo ou benefício ao paciente? No presente trabalho, buscou-se verificar os efeitos da exposição ao CEM de 60 Hz sobre os parâmetros da atividade elétrica cortical antes e após modelo animal de status epilepticus de ratos adultos machos. Para o registro da atividade elétrica cerebral dos animais foi utilizado o eletrocorticograma (ECoG). O ECoG foi analisado pelos métodos matemáticos: Densidade Espectral (DE), Análise de Flutuação Destendenciada (DFA). Dezoito ratos Wistar de 90 dias foram registrados antes e após indução por pilocarpina ao status epilepticus. Após o primeiro registro os animais foram divididos em (G1 antes e G2 antes), em seguida um grupo recebeu apenas a droga (G1 depois) e o outro grupo recebeu a droga e foi submetido ao CM (G2 depois). O segundo registro foi obtido após 24 horas da administração de pilocarpina e comparado ao obtido antes da indução ao status epilepticus. O DFA do segmento do ECoG não apresentou diferença significativa em nenhum dos grupos. A DE apresentou diferença entre G1 antes e G1 depois apenas na onda delta. Enquanto que o DFA das ondas alfa, delta e teta apresentaram diferenças significativas entre G1 antes e G1 depois. Este estudo sugere que a exposição de 24 horas ao CM com intensidade de 1 mT e frequência 60 Hz foi capaz de amenizar os efeitos do status epilepticus sobre a atividade elétrica cerebral.
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Today's society constantly uses numerous electrical resources in their daily lives. When the electric current is set in motion, a magnetic field is generated around the current, when it comes to common electrical wiring the corresponding Electromagnetic Field (EMF) has an extremely low frequency of up to 60 Hz. The literature presents numerous studies dedicated to discovering the influences of exposure to EMF in healthy individuals or in the face of some disorder. However, there are contradictions between the real effects of this exposure, there is no consensus as to the cause, damage to health, possibilities in the treatment of diseases or if it does not cause any influence to organisms. And, data linking EMF exposure up to 60 SHz on brain electrical activity are scarce. Epilepsy is the most common neurological disease in the world, and cortical electrical dysfunction makes the epileptic individual sensitive to seizures in several aspects, including the environment. In this way, would the epilepsy patient exposed to EMF be more likely to trigger changes in their cortical electrical dynamics? If so, do such changes cause harm or benefit to the patient? In the present work, we sought to verify the effects of exposure to EMF at 60 Hz on the parameters of cortical electrical activity before and after an animal model of status epilepticus in adult male rats. The electrocorticogram (ECoG) was used to record the electrical brain activity of the animals. The ECoG was analyzed by mathematical methods: Spectral Density (SD), Detrended Fluctuation Analysis (DFA). Eighteen 90-day-old Wistar rats were recorded before and after pilocarpine induction of status epilepticus. After the first record, the animals were divided into (G1 before and G2 before), then one group received only the drug (G1 after) and the other group received the drug and underwent CM (G2 after). The second record was obtained 24 hours after pilocarpine administration and compared to that obtained before status epilepticus induction. The DFA of the ECoG segment showed no significant difference in any of the groups. DE showed a difference between G1 before and after G1 only in the delta wave. While the DFA of alpha, delta and theta waves showed significant differences between G1 before and after G1. This study suggests that 24-hour exposure to MC with an intensity of 1 mT and a frequency of 60 Hz was able to attenuate the effects of status epilepticus on brain electrical activity.
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ELINE ALMEIDA RODRIGUES DE SOUZA
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Investigação epidemiológica e fatores de risco de infecção pela Coxiella burnetii, agente da Febre Q, em população predisponente e animais oriundos do semiárido pernambucano
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Orientador : MAURICIO CLAUDIO HORTA
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MEMBROS DA BANCA :
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ALEXSANDRA RODRIGUES DE MENDONÇA FAVACHO
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DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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MARCELO BAHIA LABRUNA
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MARCOS ROGÉRIO ANDRÉ
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MAURICIO CLAUDIO HORTA
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Data: 07/07/2022
Ata de defesa assinada:
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A febre Q é uma zoonose conhecida mundialmente, causada por uma γ-proteobactéria Gram-negativa, Coxiella burnetii, que possui uma alta transmissibilidade e pode se espalhar por longas distâncias através do vento, sendo a inalação de poeira aerossolizada contaminada sua principal via de infecção. A ingestão de leite ou queijo não pasteurizado é considerada um risco adicional, e os carrapatos podem contribuir para a transmissão de C. burnetii entre animais selvagens e domésticos. Caprinos, ovinos e bovinos são considerados as principais fontes de infecção humana, por poderem liberar alta carga bacteriana para o ambiente através de secreções vaginais, produtos de parto, urina, fezes, sêmen e leite. A doença pode ocorrer de forma assintomática, no entanto, quando presente, a sintomatologia ocorre de forma inespecífica tanto em humanos quanto em animais, sendo necessário o conhecimento de sua epidemiologia principalmente em áreas onde a criação de caprinos e ovinos possui grande importância para a economia local, como ocorre no Nordeste do Brasil, região responsável por grande parte da criação desses animais. Dessa forma, o objetivo do estudo foi investigar a presença de infecção por C. burnetii em amostras de humanos susceptíveis à doença, pequenos ruminantes e carrapatos, em uma área considerada fator de risco localizada no semiárido do Nordeste brasileiro. Assim, a sorologia foi realizada através da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) com amostras de soro de caprinos, ovinos e humanos, e detecção de DNA de C. burnetii foi realizada pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em amostras de sangue, leite, swab vaginal e fezes. Não foram encontrados carrapatos nos animais. Amostras com DNA positivo para C. burnetii, foram submetidas ao sequenciamento desse material genético e posteriormente foi realizada a análise filogenética. Primeiramente, foram visitadas cinco propriedades, onde foram encontrados anticorpos anti-C. burnetii em 4,8% (7/145) dos caprinos e 1,5% (1/66) dos ovinos estudados. A presença de DNA foi observada em 0,7% (1/134) das amostras de leite caprino. Das amostras de soro de humanos susceptíves avaliados, 4,5% (3/66) foram sororreagentes para C. burnetii. A titulação variou entre 64 e 4.096 em animais, e entre 128 e 256 em humanos. Posteriormente, foi avaliada a propriedade que foi observada maior positividade para C. burnetii, e dos animais avaliados, foi encontrada a presença de DNA de C. burnetii em 18,9% (7/37) de amostras sanguíneas, em 7,7% (2/26) de amostras de leite e em 7,7% (2/26) de amostras de swab vaginal, todas de caprinos. As amostras positivas na PCR foram submetidas ao sequenciamento e análise filogenética, resultando na identificação da cepa de C. burnetii em swab vaginal com similaridade entre 97,4-99,1% de outras cepas encontradas no Brasil. Não foram encontrados fatores de risco relacionados a infecção por C. burnetii. Por fim, concluiu-se que a circulação da bactéria está presente na região, sendo sugestivo aos profissionais de saúde a inserção da febre Q como diagnóstico diferencial para um tratamento adequado, e, também, alertar os produtores de ruminantes domésticos sobre as medidas de prevenção nas propriedades rurais.
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Q fever is a zoonosis known worldwide, caused by a Gram-negative γ-proteobacterium, Coxiella burnetii, which has a high transmissibility and can spread over long distances by wind, being the inhalation of contaminated aerosolized dust its main route of infection. Ingestion of unpasteurized milk or cheese is considered an additional risk, and ticks may contribute to the transmission of C. burnetii between wild and domestic animals. Goats, sheep and cattle are considered the main sources of human infection, as they can release a high bacterial load into the environment through vaginal secretions, birth products, urine, faeces, semen and milk. The disease can occur asymptomatically, however, when present, the symptoms occur nonspecifically in both humans and animals, requiring knowledge of its epidemiology, especially in areas where goat and sheep farming is of great importance for the economy local, as in the Northeast of Brazil, the region responsible for a large part of the creation of these animals. Thus, the aim of the study was to investigate the presence of C. burnetii infection in samples of humans susceptible to the disease, small ruminants and ticks, in an area considered a risk factor located in the semi-arid region of Northeast Brazil. Thus, serology was performed using the Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) with serum samples from goats, sheep and humans, and detection of C. burnetii DNA was performed by the Polymerase Chain Reaction (PCR) in blood samples, milk, vaginal swab and faeces. No ticks were found on the animals. Samples with positive DNA for C. burnetii were submitted to the sequencing of this genetic material and phylogenetic analysis. First, five farms were visited, where were observed antibodies anti-C. burnetii in 4.8% (7/145) of the goats and 1.5% (1/66) of the sheep studied. The presence of DNA was observed in 0.7% (1/134) of goat milk samples. Of the serum samples from susceptible humans evaluated, 4.5% (3/66) were seroreactive for C. burnetii. The titers ranged between 64 and 4,096 in animals, and between 128 and 256 in humans. Subsequently, the farm that was more positive for C. burnetii was evaluated, and the presence of C. burnetii DNA was found in 18.9% (7/37) of blood samples, in 7.7% (2/26) of milk samples and in 7.7% (2/26) of vaginal swab samples, all from goats. The PCR positive samples were submitted to sequencing and phylogenetic analysis, resulting in the identification of the C. burnetii strain in vaginal swab with similarity between 97.4-99.1% of other strains found in Brazil. No risk factors related to C. burnetii infection were found. Finally, it was concluded that the circulation of the bacteria is present in the region, suggesting that health professionals should insert Q fever as a differential diagnosis for an adequate treatment, and also alert domestic ruminant producers about preventive measures on rural farms.
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GABRIELA HÉMYLIN FERREIRA MOURA
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Estudo da infecção por Toxoplasma gondii e outros protozoários da família Sarcocystidae em aves e mamíferos silvestres na região Nordeste do Brasil
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Orientador : RINALDO APARECIDO MOTA
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MEMBROS DA BANCA :
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RINALDO APARECIDO MOTA
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RENATA PIMENTEL BANDEIRA DE MELO
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CECILIA IRENE PEREZ CALABUIG
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DÉBORA COSTA VIEGAS DE LIMA
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DEBORA ROCHELLY ALVES FERREIRA
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Data: 28/07/2022
Ata de defesa assinada:
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Objetivou-se avaliar a ocorrência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii e o DNA de protozoários da família Sarcoscystidae em aves e mamíferos silvestres do bioma Caatinga e do Centro de Triagem de Animais Silvestres de Pernambuco (CETRAS-Tangara) na Mata Atlântica. No primeiro estudo realizou-se a pesquisa de anticorpos anti T. gondii e DNA de protozoários da família Sarcocystidae em 55 animais de vida livre do bioma Caatinga por meio da técnica de MAT e nested PCR seguida do sequenciamento, respectivamente em 55 amostras de mamíferos de três espécies silvestres. No segundo estudo realizou-se a pesquisa do DNA de protozoários da família Sarcocystidae em 96 aves de cativeiro do CETRAS-Tangara e aves de vida livre do bioma Caatinga, totalizando 96 animais de 41 espécies. No terceiro estudo realizou-se a pesquisa de DNA da família Sarcocystidae em 79 mamíferos de cinco espécies do bioma Caatinga e do CETRAS-Tangara. Para identificar os protozoários da família Sarcocystidae nos três estudos empregou-se a nested PCR para o gene 18s rDNA seguido do sequenciamento genético. No primeiro estudo, detectou-se anticorpos em 7/29 (24,13%) tatus-peba, 6/16 (37,5%) catetos e ausência de anticorpos nas cutias 0/10 e o DNA de Toxoplasma gondii em 6/19 (31,57%) dos tatus-peba e nenhum cateto foi positivo. No segundo estudo, 25% (24/96) das amostras das aves foram positivas para os protozoários: Isospora spp., Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii em oito espécies de aves (Amazona aestiva, Coereba flaveola, Egretta thula, Paroaria dominicana, Sporophila nigricollis, Cariama cristata, Columbina talpacoti, Crypturellus parvirostris). No terceiro estudo, 25,31% (20/79) das amostras de nove espécies de mamíferos (Conepatus semistriatus, Didelphis albiventris, Tamandua tetradactyla, Bradypus variegatus, Sapajus libidinosus, Thrichomys laurentius, Monodelphis domestica, Galea spix e Callithrix jaccus) foram positivas para T. gondii. A ocorrência de anticorpos e DNA da família Sarcocystidae nas aves e mamíferos silvestres do bioma Caatinga e do CETRAS-Tangara, demonstra a participação destas espécies no ciclo silvestre dos protozoários identificados e a necessidade de intensificar as pesquisas nessa área para a conservação de animais silvestres nos biomas Caatinga e Mata Atlântica.
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The objective was to evaluate the occurrence of IgG anti-Toxoplasma gondii antibodies and the DNA of protozoa of the Sarcoscystidae family in birds and wild mammals from the Caatinga biome and from the Pernambuco Wild Animal Screening Center (CETRAS-Tangara) in the Atlantic Forest. In the first study, the investigation of antibodies against T. gondii and DNA of protozoa of the family Sarcocystidae was carried out in 55 free-living animals from the Caatinga biome using the MAT technique and nested PCR followed by sequencing, respectively in 55 samples of mammals from three wild species. In the second study, the DNA research of protozoa of the Sarcocystidae family was carried out in 96 captive birds from CETRAS-Tangara and free-living birds from the Caatinga biome, totaling 96 animals from 41 species. In the third study, DNA research of the Sarcocystidae family was carried out in 79 mammals of five species from the Caatinga biome and the CETRAS-Tangara. To identify the protozoa of the Sarcocystidae family in the three studies, nested PCR was used for the 18s rDNA gene followed by genetic sequencing. In the first study, antibodies were detected in 7/29 (24.13%) armadillos, 6/16 (37.5%) collared peccaries and absence of antibodies in agoutis 0/10 and Toxoplasma gondii DNA in 6/ 19 (31.57%) of the giant armadillos and no collared peccary were positive. In the second study, 25% (24/96) of the bird samples were positive for the protozoa: Isospora spp., Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in eight bird species (Amazona aestiva, Coereba flaveola, Egretta thula, Paroaria dominicana, Sporophila nigricollis, Cariama cristata, Columbina talpacoti, Crypturellus parvirostris). In the third study, 25.31% (20/79) of samples from nine species of mammals (Conepatus semistriatus, Didelphis albiventris, Tamandua tetradactyla, Bradypus variegatus, Sapajus libidinosus, Thrichomys laurentius, Monodelphis domestica, Galea spix and Callithrix jaccus) were positive, for T. gondii. The occurrence of antibodies and DNA of the Sarcocystidae family in birds and wild mammals of the Caatinga and CETRAS-Tangara biomes demonstrates the participation of these species in the wild cycle of the identified protozoa and the need to intensify research in this area for the conservation of wild animals in the Caatinga and Atlantic Forest biomes.
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POLLYANNE RAYSA FERNANDES DE OLIVEIRA
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Patógenos emergentes, um desafio de Saúde Única: contaminação de ambientes públicos e insular por oocistos de Toxoplasma gondii e diversidade genética de Sporothrix spp. de humanos e animais
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Orientador : RINALDO APARECIDO MOTA
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MEMBROS DA BANCA :
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RINALDO APARECIDO MOTA
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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JAQUELINE BIANQUE DE OLIVEIRA
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WAGNNER JOSE NASCIMENTO PORTO
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THAIS FERREIRA FEITOSA
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Data: 29/07/2022
Ata de defesa assinada:
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Os estudos epidemiológicos das doenças emergentes e reemergentes devem considerar, de maneira integrada, os componentes da tríade epidemiológica e a emergência sanitária, como um problema compartilhado de Saúde Única. Nesse contexto, estão inseridos os agentes infeciosos Toxoplasma gondii e Sporothrix spp., onde humanos e animais suscetíveis podem se infectar pelo contato com ambiente contaminado e/ou amimais infectados. Diante disso, objetivou-se avaliar a contaminação por oocistos de T. gondii em amostras de solo de ambientes públicos da cidade do Recife e da Ilha de Fernando de Noronha e aplicar a Modelagem de Distribuição de Espécies para prever a adequabilidade ambiental do Arquipélago para a permanência do coccídio, além de investigar estrutura populacional de espécies do gênero Sporothrix em humanos e animais, assim como a distribuição espacial de casos de Esporotricose em gatos da Região Metropolitana do Recife. Para isso, foram realizados três experimentos que compuseram três capítulos da qualificação referentes ao estudo de T. gondii no solo e os resultados parciais sobre a diversidade genética de isolados de Sporothrix spp. No primeiro estudo, foram analisadas 120 amostras de solo coletadas em 24 locais como praças, parques, universidade e hospitais da cidade do Recife, nas quais foi identificado o gene de protozoários Apicomplexa em nove locais amostrados, com similaridade no sequenciamento para T. gondii. O segundo estudo contemplou os 15 bairros da Ilha de Fernando de Noronha e suas quatro principais praças, totalizando 19 locais. Em 4/19 locais amostrados foram obtidas amostras positivas e em dois deles confirmou-se a viabilidade dos oocistos de T. gondii. Também se comprovou a adequação de toda a extensão do Arquipélago para a manutenção do coccídio por meio de modelos de nicho ecológico. No terceiro estudo, demonstrou-se que Sporothrix brasiliensis é a espécie prevalente assim como o idiomorfo de acasalamento MAT1,2. Um total 1176 casos de Esporotricose em gatos foram registrados no período de seis anos na Região Metropolitana do Recife com uma parcela maior de casos de gatos procedente das cidades de Olinda, Jaboatão dos Guararapes e Recife. Os resultados obtidos nesses estudos contribuem com informações epidemiológicas importantes que servem como base para o desenvolvimento de políticas públicas direcionadas à Toxoplasmose e Esporotricose.
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Epidemiological studies of emerging and reemerging diseases must consider the components of the epidemiological triad in an integrated manner and consider the health emergency as a shared problem of One Health. In this context, the infectious agents Toxoplasma gondii and Sporothrix spp. are inserted, where humans and susceptible animals can become infected through contact with a contaminated environment and/or infected animals. Therefore, the objective was to evaluate the contamination by oocysts of T. gondii in soil samples from public environments in the city of Recife and the Fernando de Noronha Island and apply the Ecological Niche Modeling to predict the environmental suitability of the archipelago for coccidia permanence. In addition to investigating population structure of species of the genus Sporothrix in humans and animals, as well as the spatial distribution of sporotrichosis cases in cats in the Metropolitan Region of Recife. For this, three experiments were carried out that composed three chapters of the qualification referring to the study of T. gondii in the soil and the partial results on the genetic diversity of Sporothrix spp. In the first study, 120 soil samples collected in 24 places such as squares, parks, universities and hospitals in the city of Recife, were analyzed in which the Apicomplexa protozoan gene was identified in nine sampled sites, with similarity in the sequencing for T. gondii.. The second study included the 15 neighborhoods of the Fernando de Noronha island and its four main squares, totaling 19 locations. In four of the 19 sampled sites, positive samples were obtained and in two of them we confirmed the viability of T. gondii oocysts. It was also confirmed the suitability of the entire length of the Archipelago for the maintenance of coccidia through ecological niche models. In the third study, it was demonstrated that Sporothrix brasiliensis is the prevalent species as well as the mating idiomorph MAT1,2. A total of 1176 cases of sporotrichosis in cats were recorded in the period of six years in the Metropolitan Region of Recife, with a greater share of cases of cats coming from the cities of Olinda, Jaboatão dos Guararapes and Recife. The results obtained in these studies contribute with important epidemiological information that serve as a basis for the development of public policies aimed at Toxoplasmosis and Sporotrichosis.
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AILA FABIANE PEIXOTO
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ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E ANTIBIOFILME DA PRÓPOLIS VERMELHA E DA RESINA DE Amburana Cearensis SOBRE Staphylococcus coagulase POSITIVA CAUSADORES DE MASTITE SUBCLINICA EM VACAS
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Orientador : ELIZABETH SAMPAIO DE MEDEIROS
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MEMBROS DA BANCA :
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ALDA VERÔNICA SOUZA LIVERA
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ELIZABETH SAMPAIO DE MEDEIROS
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MARIA BETANIA DE QUEIROZ ROLIM
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MATEUS MATIUZZI DA COSTA
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RINALDO APARECIDO MOTA
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Data: 02/08/2022
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Objetivou-se com este estudo avaliar a atividade antimicrobiana e antibiofilme da própolis vermelha e da resina de Amburana Cearensis sobre SCP causadores de mastite subclínica, isolados de amostras de leite bovino provenientes de rebanhos das Bacias Leiteiras dos Estados de Alagoas e Pernambuco. Foram selecionadas 14 propriedades, sendo 10 situadas em municípios da bacia leiteira do Estado de Alagoas e 4 em municípios da bacia leiteira do Estado de Pernambuco, que forneciam leite para laticínio sob inspeção federal. Foi realizado o teste CMT em 1405 vacas e coletadas as amostras CMT positivo a partir de 2+, totalizando 1289 amostras submetidas ao exame microbiológico para isolamento e identificação de SCP, totalizando 179 isolados. SCP foram submetidos ao teste de sensibilidade ao antibiótico padrão (Oxacilina), pelo método de difusão em disco e os isolados resistentes, foram submetidos ao teste de aderência em microplacas para quantificação do biofilme. Nos isolados de SCP, classificados como fortes e moderado formadores de biofilme, foi realizada a pesquisa dos genes nuc, blaZ, mecA, mecC, icaA e icaD e avaliou-se a atividade antimicrobiana e antibiofilme da própolis vermelha e da resina de Amburana Cearenses pelo método de microdiluição em caldo, sendo realizada a determinação das Concentrações Inibitória (CIM) e Bactericida (CBM) das substâncias e a ação antibiofilme. Os valores de CIM variaram de 3,125 até 781,25 μg/mL para a própolis vermelha e de 195,31 até 390,62 μg/mL para a resina de umburana. A própolis vermelha apresentou uma CBM variando de 3,125 até 1.565,50 μg/mL, enquanto a CBM para a resina de umburana variou de 195,31 até 781,25 μg/mL. As duas substâncias também apresentaram eficácia na redução do biofilme em formação e consolidado, sugerindo uma ação promissora dessas substâncias contra essa estrutura de resistência microbiana e sendo uma possível alternativa a futura utilização das mesmas como drogas com ação antimicrobiana.
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The objective of this study was to evaluate the antimicrobial and antibiofilm activity of red propolis and Amburana Cearensis resin on SCP that cause subclinical mastitis, isolated from bovine milk samples from dairy herds in the states of Alagoas and Pernambuco. Fourteen properties were selected, 10 located in municipalities in the dairy basin of the State of Alagoas and 4 in municipalities in the dairy basin of the State of Pernambuco, which supplied milk for dairy under federal inspection. The CMT test was performed in 1405 cows and positive CMT samples from 2+ were collected, totaling 1289 samples submitted to microbiological examination for SCP isolation and identification, totaling 179 isolates. SCP were submitted to the standard antibiotic (Oxacillin) sensitivity test, by the disk diffusion method and the resistant isolates were submitted to the microplate adhesion test to quantify the biofilm. In the SCP isolates, classified as strong and moderate biofilm formers, the search for nuc, blaZ, mecA, mecC, icaA and icaD genes was carried out and the antimicrobial and antibiofilm activity of red propolis and Amburana Cearenses resin was evaluated by microdilution method in broth, being carried out the determination of Inhibitory Concentrations (MIC) and Bactericidal (CBM) of the substances and the antibiofilm action. MIC values ranged from 3.125 to 781.25 μg/mL for red propolis and from 195.31 to 390.62 μg/mL for umburana resin. The red propolis presented a CBM ranging from 3,125 to 1,565.50 μg/mL, while the CBM for the umburan resin ranged from 195.31 to 781.25 μg/mL. Both substances were also effective in reducing the formation and consolidation of biofilms, suggesting a promising action of these substances against this structure of microbial resistance and being a possible alternative for their future use as drugs with antimicrobial action.
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QUESIA JEMIMA DA SILVA
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Obtenção de proteases por particionamento dos resíduos de Tainha (Mugil liza) visando sua aplicação biotecnológica
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Orientador : ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO
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MEMBROS DA BANCA :
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ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO
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JUANIZE MATIAS DA SILVA BATISTA
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MARCIA NIEVES CARNEIRO DA CUNHA
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RAQUEL PEDROSA BEZERRA
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VAGNE DE MELO OLIVEIRA
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Data: 11/08/2022
Ata de defesa assinada:
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Nos últimos anos, a produção mundial de pescado aumentou substancialmente para atender a demanda do consumidor, tendo em vista a mudança no comportamento alimentar da população. Com isso, as indústrias de processamento de pescado têm gerado quantidades significativas de material orgânico a partir dos subprodutos do processamento diário. As enzimas extraídas de vísceras têm vantagens técnicas sobre as químicas e têm amplas aplicações industriais, principalmente, medicamentos, cosméticos, alimentos, têxteis e alimentação animal, devido a sua propriedade de alta atividade em uma ampla faixa de pH e em diferentes temperaturas. Desta forma, este trabalho objetivou particionar proteases obtidas dos resíduos de tainha (Mugil Liza) visando sua aplicação biotecnológica. Ainda, realizar uma revisão de literatura sobre as atualizações da temática. Para tanto, foram utilizados como métodos de particionamento os sistemas de fases bisáfico técnica de semipurificação por sistema de duas fases aquosa (SDFA) que foi aplicada no extrato bruto obtido a partir de vísceras negligenciados da Tainha (Mugil liza) para obtenção de enzimas com atividade colagenolíticas. No sistema de duas fases aquosa PEG/citrato, de acordo com o planejamento fatorial 23, utilizando as variáveis Coeficiente de partição (K), Rendimento (Y), e Fator de purificação (PF) foi possível observar que os rendimentos da extração (Y) obtidos variaram de 89 a 124,34% e de 242,11 a 435,61% para protease e proteases com atividade colagenolítica, respectivamente. Os resultados mostraram a vantagem desta técnica de semipurificação no que se refere a extração e purificação de enzimas colagenolíticas com aplicação industrial. Na revisão integrativa foi descrita a importância dos peptídeos de colágeno e a demanda por maior produção deste biocomposto. Na revisão integrativa é tratado os aspectos que devem fornecer conhecimento substancial sobre a produção, purificação e identificação de peptídeos de colágeno recuperados de peixe com aplicação em diferentes industrias. Apresentando uma visão geral das publicações sobre peptídeos de colágeno de peixe, com foco em sua produção, purificação, métodos de identificação bem como em suas atividades biológicas relatadas em estudos nos últimos 5 anos.
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The fishing industry is responsible for the production of 196 million tons of fish and the consequent generation of waste (skin, viscera, bones, scales, heads, fins, etc.) which are generally discarded or transformed into products with low market value, such as flour of fish, fish oil, animal feed or fertilizer. These by-products, or residues, hold up to about 50% of the raw material's total weight and are potential sources of essential amino acids, collagen, gelatin, polyunsaturated lipids, and enzymes such as pepsin, trypsin, chymotrypsin, and collagenase proteases. In recent years the interest in marine proteins for the production of collagen peptides has increased, due to their bioactivity, biocompatibility, high bioavailability and safety. Thus, compound recovery is of great interest to different industries such as pharmaceuticals, food and nutraceuticals. Thus, this work aimed to produce collagen bioactive peptides extracted from the skin of Neotropical fish for possible biotechnological applications and a review on the subject. Various techniques for the recovery, identification and purification of enzymes capable of cleaving collagen molecules as peptide bonds and subsequently degrading them into small peptides from the residues have been used, such as the semi-purification technique of the aqueous two-phase system (SDFA). ) which was applied to the neglected residue (viscera) of Mullet (Mugil liza) for the treatment of enzymes with collagenolytic activity. In the two-phase aqueous PEG / citrate system, according to the 23 factorial design, using as variables Partition coefficient (K), Yield (Y), and Purification factor (FP) it was possible to observe that the extraction adjustments (Y ) ranged from 89 to 124.34% and from 242.11 to 435.61% for protease and proteases with collagenolytic activity, respectively. The results differentiated the advantage of this semi-purification technique with regard to the extraction and purification of collagenolytic enzymes with industrial application for the production of collagen peptides.
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GESIKA MARIA DA SILVA
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Intoxicações exógenas: análise situacional e educação em saúde na V Região de Saúde no estado de Pernambuco
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Orientador : DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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JULIANA ARENA GALHARDO
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REGIA MARIA BATISTA LEITE
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Data: 26/08/2022
Ata de defesa assinada:
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Objetivou-se neste estudo fortalecer a vigilância das intoxicações exógenas para detecção e prevenção das intoxicações por agrotóxicos nos municípios pertencentes à V Gerência Regional de Saúde (V GERES). Foi realizado um estudo epidemiológico descritivo quantitativo e qualitativo. Na primeira etapa foram analisados os dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação-SINAN e do Sistema de Informação sobre Mortalidade-SIM, de 2008 a 2018 sobre intoxicações exógenas. Para descrição da percepção dos profissionais de saúde sobre as intoxicações exógenas foi utilizado questionário autoaplicado, com questões sobre detecção e notificação das intoxicações exógenas, com base nos questionários foi realizado uma capacitação com os profissionais de saúde sobre o tema. Para o perfil dos Agentes de Combate as Endemias-ACE, outro questionário auto aplicado foi utilizado. Como principais resultados foi identificado 46,57% do sexo masculino e 53,43% sexo feminino. A faixa etária com maior percentual e significância estatística foi em jovens de 10 a 19 anos. O agente tóxico mais frequente foram os medicamentos (35,12%), a principal via de exposição foi digestiva (77,58%) e circunstância foram as tentativas de suicídio (29,86%), 47% das exposições foram aguda-única. No SINAN 44 casos registrados que evoluíram a óbito e registrados no SIM há 68 óbitos por intoxicações, mesmo período. Dos 142 profissionais de saúde 74,64% afirmaram conhecer a ficha de notificação de intoxicação exógena, 95,07% relataram que a mesma é de notificação obrigatória e 98,59% reconheceram a importância do preenchimento da variável ocupação. Um total de 705 profissionais de saúde de diferentes categorias participaram das capacitações sobre intoxicações exógenas. Sobre os questionários dos ACEs, participaram 137 profissionais, 62,05% do sexo masculino, 99,27% utilizam agrotóxico/produto químico nas atividades de trabalho, 64,24% são da faixa etária de 21 a 40 anos, 40,87% com mais de 10 anos de trabalho, 83,22% afirmaram utilizar Equipamentos de Proteção Individual e 75,18% realizaram exame para dosagem de colinesterase. Para a vigilância e prevenção de todo agravo ou doença é necessário além das ações de vigilância passiva pelo monitoramento dos dados de notificação, instituir parcerias com a Atenção Básica e agir nos territórios de forma proativa, uma vez que os dados apresentados neste estudo subsidiam o planejamento em saúde e reafirmam a necessidade de atuação e monitoramento em uma rede de atenção a saúde orientada e integrada, por meio de ações intersetoriais entre Vigilância em Saúde e Atenção Básica.
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The objective of this study was to strengthen the surveillance of exogenous intoxications for the detection and prevention of intoxications by pesticides in the municipalities belonging to the V Regional Health Management (V GERES). A descriptive quantitative and qualitative epidemiological study was carried out. In the first stage, data from the Information System on Notifiable Diseases-SINAN and the Information System on Mortality-SIM, from 2008 to 2018 on exogenous intoxications, were analyzed. To describe the perception of health professionals about exogenous intoxications, a self-administered questionnaire was used, with questions about detection and notification of exogenous intoxications. Based on the questionnaires, training was carried out with health professionals on the subject. For the profile of the Agents for Combating Endemic Diseases-ACE, another self-applied questionnaire was used. As main results, 46.57% were male and 53.43% were female. The age group with the highest percentage and statistical significance was in young people aged 10 to 19 years. The most frequent toxic agent was drugs (35.12%), the main route of exposure was digestive (77.58%) and circumstances were suicide attempts (29.86%), 47% of exposures were acute-only . In the SINAN 44 registered cases that evolved to death and registered in the SIM there are 68 deaths due to intoxications, in the same period. Of the 142 health professionals, 74.64% claimed to know the exogenous intoxication notification form, 95.07% reported that it is mandatory notification and 98.59% recognized the importance of filling in the occupation variable. A total of 705 health professionals from different categories participated in training on exogenous intoxications. 137 professionals participated in the ACE’s questionnaires, 62.05% were male, 99.27% used pesticides/chemicals in their work activities, 64.24% were aged between 21 and 40 years, 40.87% with more than 10 years of work, 83.22% said they used Personal Protective Equipment and 75.18% underwent examination for cholinesterase dosage. For surveillance and prevention of any disease or illness, it is necessary, in addition to passive surveillance actions by monitoring notification data, to establish partnerships with Primary Care and proactively act in the territories, since the data presented in this study support planning in health and reaffirm the need for action and monitoring in a oriented and integrated health care network, through intersectoral actions between Health Surveillance and Primary Care.
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MARIA CLAUDIA RIBEIRO AGRA
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ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS DOS ÓBITOS SUSPEITOS POR ARBOVÍRUS URBANOS – DENGUE, ZIKA E CHIKUNGUNYA, NO ESTADO DE PERNAMBUCO, BRASIL
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Orientador : DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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RITA DE CASSIA CARVALHO MAIA
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ADERALDO ALEXANDRINO DE FREITAS
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ALBANITA GOMES DA COSTA DE CEBALLOS
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Data: 26/08/2022
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Esta tese teve como objetivo analisar os fatores de risco associados a frequência dos óbitos suspeitos por arboviroses urbanas - Dengue, Zika e Chikungunya, no estado de Pernambuco durante o período epidêmico e pós-epidêmico – 2015 a 2018. Foi realizado um estudo epidemiológico, transversal e descritivo, dos óbitos confirmados pelo comitê estadual de discussão de óbitos por Arboviroses nas 12 regiões de desenvolvimento do Estado de Pernambuco. Os dados (casos e óbitos por região; faixa etária, sexo, período de evolução clínica; presença de comorbidades; sintomas antes do óbito, itinerário terapêutico. diagnóstico e monitoramento entomológico) foram coletados de forma secundária no banco de dados do setor de epidemiologia da Gerência das Arboviroses da Secretaria Estadual de Saúde de Pernambuco. No período, Pernambuco apresentou a frequência de 239.956 casos de Arboviroses, sendo 183.078 casos de dengue, 56.769 de chikungunya e 109 de zika. 726 óbitos foram notificados e 225 confirmados, sendo 88 (39,1%) por dengue; 126 (56,0%) por chikungunya, 11 (4,9%) com coinfecção por dengue e chikungunya, não havendo confirmação de óbitos por zika. Os óbitos ocorreram em 10 das 12 regiões de desenvolvimento, não havendo confirmação no Sertão do Araripe e Sertão do São Francisco. A Região Metropolitana apresentou a maior ocorrência com 145 óbitos (64,5%) e a maior letalidade (0,13%). A região da Mata Norte apresentou o maior coeficiente geral de mortalidade (3,96/100 mil habitantes). Os óbitos por coinfecção se distribuíram na Região Metropolitana (N: 09/ 82,0%); na Região do Agreste Setentrional (N: 01/ 9%) e no Agreste Central (N: 01/ 9,0%) e 121 (53,8%) dos pacientes que foram a óbitos eram do sexo masculino e 104 (46,2%) do sexo feminino. 34,0% (N: 76) estavam na faixa etária de 60 a 79 anos. 74,0% (N: 166) apresentavam algum tipo de comorbidade, sendo a hipertensão arterial a mais frequente (N: 48 / 29,0%). O período de evolução clínica da doença a ocorrência do óbito, variou de 0 – 168 dias, com média de 34,7 dias, em relação ao total de óbitos (N: 225). Os óbitos confirmados por dengue tiveram uma evolução clínica de 0 - 48 dias, com média de 12,3 dias; por chikungunya de 0 – 168 dias, com média de 34,5 dias e por coinfecção de 0 – 34 dias, com média de 15,2 dias. Entre os sintomas apresentados pelos pacientes durante a evolução clínica antes da ocorrência do óbito, a febre foi a mais frequente, notificada em 86,2% (N: 194), seguida de mialgia (N: 137/ 60,8%) e artralgia (N: 133/ 59,1%). Os sintomas hemorrágicos foram notificados em 32,8% (N: 74) sendo relatados em 47,2% (N: 42) dos óbitos por dengue; 23,8% (N: 30) dos óbitos por chikungunya e 18,1% (N: 02) dos óbitos por coinfecção. Os sintomas neurológicos foram notificados em 44,4% (N: 100) dos óbitos confirmados, distribuídos em 34,0 % (N: 30) dos óbitos de dengue; 50,7% (N: 64) dos óbitos de chikungunya e 54,5% (N: 06) dos óbitos confirmados com coinfecção. Em relação ao itinerário terapêutico percorrido pelos pacientes durante a evolução clínica das doenças, 23,6% (N: 53) foram assistidos apenas com 01 atendimento hospitalar antes da ocorrência do óbito, 2,6% (N: 06) foram assistidos em algum momento pela Atenção Primária, 35,5% foram internados e 2,2% (N: 05) dos óbitos ocorreram em domicílio. 47,0% (N: 106) do total de óbitos foram notificados exclusivamente por meio do Serviço de Verificação de Óbito (SVO), 7,7% (N: 17) foram notificados pela Unidade de Ocorrência do Óbito (UOO) e pelo SVO; 36,0% (N:81) exclusivamente pela Unidade de Ocorrência do Óbito e 9,5% (N: 21) pelas Vigilâncias em Saúde dos municípios. Verificou-se que 82,2% (N: 185) dos óbitos tinham diagnóstico laboratorial, e que 56,75% (105) foram solicitados pelo SVO e a imuno-histoquímica foi o método de avaliação com resultado reagente para as arboviroses mais frequente (N: 55 /29,7 %). Nos anos de 2015 e 2016 foram isolados os sorotipos da dengue: DENV- 1 e DENV- 3, em 2017 foi isolado o DENV-2 não havendo registo de isolamento em 2018. O monitoramento entomológico não revelou nenhuma correlação entre o índice de infestação predial do Aedes aegypti e a ocorrência das arboviroses, não rejeitando-se a hipótese nula. Os dados permitem concluir que a compreensão do perfil epidemiológico da ocorrência de óbitos em epidemias com circulação simultânea de arbovírus é de grande relevância para a qualificação dos serviços de saúde, tanto na assistência a pacientes acometidos como nas ações de prevenção e controle vetorial.
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This thesis aimed to analyze the risk factors associated with the frequency of suspected deaths from urban arboviruses - Dengue, Zika and Chikungunya, in the state of Pernambuco during the epidemic and post-epidemic period - 2015 to 2018. An epidemiological, cross-sectional and descriptive study was carried out on the deaths confirmed by the state committee for discussing deaths from arboviruses in the 12 development regions of the State of Pernambuco. Data (cases and deaths by region; age group, sex, period of clinical evolution; presence of comorbidities; symptoms before death, therapeutic itinerary. diagnosis and entomological monitoring) were collected secondarily from the database of the epidemiology sector of the Arboviruses Management of the Pernambuco State Health Department. In the period, Pernambuco presented a frequency of 239,956 cases of arboviruses, with 183,078 cases of dengue, 56,769 of chikungunya and 109 of zika. 726 deaths were reported and 225 confirmed, 88 (39.1%) due to dengue; 126 (56.0%) had chikungunya, 11 (4.9%) had co-infection with dengue and chikungunya, with no confirmed deaths from zika. The deaths occurred in 10 of the 12 development regions, with no confirmation in Sertão do Araripe and Sertão do São Francisco. The Metropolitan Region had the highest occurrence with 145 deaths (64.5%) and the highest lethality (0.13%). The Mata Norte region had the highest overall mortality rate (3.96/100,000 inhabitants). Deaths from coinfection were distributed in the Metropolitan Region (N: 09/ 82.0%); in the Northern Agreste Region (N: 01/ 9%) and in the Central Agreste (N: 01/ 9.0%). and 121 (53.8%) of the patients who died were male and 104 (46.2%) were female. 34.0% (N: 76) were between 60 and 79 years old. 74.0% (N: 166) had some type of comorbidity, with arterial hypertension being the most frequent (N: 48 / 29.0%). The period of clinical evolution of the disease to the occurrence of death ranged from 0 - 168 days, with an average of 34.7 days, in relation to the total number of deaths (N: 225). Deaths confirmed by dengue had a clinical course of 0 - 48 days, with a mean of 12.3 days; by chikungunya from 0 – 168 days, with a mean of 34.5 days and by co-infection from 0 – 34 days, with a mean of 15.2 days. Among the symptoms presented by patients during the clinical course before death, fever was the most frequent, reported in 86.2% (N: 194), followed by myalgia (N: 137/60.8%) and arthralgia. (N: 133/59.1%). Bleeding symptoms were reported in 32.8% (N: 74) and were reported in 47.2% (N: 42) of dengue deaths, 23.8% (N: 30) of chikungunya deaths and 18.1% (N: 02) of deaths from coinfection. Neurological symptoms were reported in 44.4% (N: 100) of confirmed deaths, distributed in 34.0% (N: 30) of dengue deaths; 50.7% (N: 64) of chikungunya deaths and 54.5% (N: 06) of deaths confirmed with co-infection. Regarding the therapeutic itinerary followed by the patients during the clinical evolution of the diseases, 23.6% (N: 53) were assisted with only 01 hospital care before the occurrence of death, 2.6% (N: 06) were assisted in some At the moment by Primary Care, 35.5% were hospitalized and 2.2% (N: 05) of the deaths occurred at home. 47.0% (N: 106) of the total number of deaths were reported exclusively through the Death Verification Service (SVO), 7.7% (N: 17) were reported by the Death Occurrence Unit (UOO) and the SVO; 36.0% (N: 81) exclusively by the Death Occurrence Unit and 9.5% (N: 21) by the Municipal Health Surveillance. It was found that 82.2% (N: 185) of the deaths had a laboratory diagnosis, and that 56.75% (105) were requested by the SVO and immunohistochemistry was the evaluation method with a reagent result for the most frequent arboviruses (N: 55/29.7%). In 2015 and 2016, dengue serotypes were isolated: DENV-1 and DENV-3, in 2017 DENV-2 was isolated, with no record of isolation in 2018. Entomological monitoring did not reveal any correlation between the rate of Aedes aegypti building infestation and the occurrence of arboviruses, not rejecting the null hypothesis. The data allow us to conclude that the understanding of the epidemiological profile of the occurrence of deaths in epidemics with simultaneous circulation of arbovirus is of great relevance for the qualification of health services, both in the care of affected patients and in the prevention and vector control actions.
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MARIA CLAUDIA RIBEIRO AGRA
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Morbimortalidade por arbovírus urbanos – dengue, zika e chikungunya, no estado de Pernambuco, Brasil
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Orientador : DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIEL FRIGUGLIETTI BRANDESPIM
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JOSE WILTON PINHEIRO JUNIOR
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RITA DE CASSIA CARVALHO MAIA
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ADERALDO ALEXANDRINO DE FREITAS
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ALBANITA GOMES DA COSTA DE CEBALLOS
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Data: 26/08/2022
Ata de defesa assinada:
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Esta tese teve como objetivo analisar os fatores de risco associados a frequência dos óbitos suspeitos por arboviroses urbanas - Dengue, Zika e Chikungunya, no estado de Pernambuco durante o período epidêmico e pós-epidêmico – 2015 a 2018. Foi realizado um estudo epidemiológico, transversal e descritivo, dos óbitos confirmados pelo comitê estadual de discussão de óbitos por Arboviroses nas 12 regiões de desenvolvimento do Estado de Pernambuco. Os dados (casos e óbitos por região; faixa etária, sexo, período de evolução clínica; presença de comorbidades; sintomas antes do óbito, itinerário terapêutico. diagnóstico e monitoramento entomológico) foram coletados de forma secundária no banco de dados do setor de epidemiologia da Gerência das Arboviroses da Secretaria Estadual de Saúde de Pernambuco. No período, Pernambuco apresentou a frequência de 239.956 casos de Arboviroses, sendo 183.078 casos de dengue, 56.769 de chikungunya e 109 de zika. 726 óbitos foram notificados e 225 confirmados, sendo 88 (39,1%) por dengue; 126 (56,0%) por chikungunya, 11 (4,9%) com coinfecção por dengue e chikungunya, não havendo confirmação de óbitos por zika. Os óbitos ocorreram em 10 das 12 regiões de desenvolvimento, não havendo confirmação no Sertão do Araripe e Sertão do São Francisco. A Região Metropolitana apresentou a maior ocorrência com 145 óbitos (64,5%) e a maior letalidade (0,13%). A região da Mata Norte apresentou o maior coeficiente geral de mortalidade (3,96/100 mil habitantes). Os óbitos por coinfecção se distribuíram na Região Metropolitana (N: 09/ 82,0%); na Região do Agreste Setentrional (N: 01/ 9%) e no Agreste Central (N: 01/ 9,0%) e 121 (53,8%) dos pacientes que foram a óbitos eram do sexo masculino e 104 (46,2%) do sexo feminino. 34,0% (N: 76) estavam na faixa etária de 60 a 79 anos. 74,0% (N: 166) apresentavam algum tipo de comorbidade, sendo a hipertensão arterial a mais frequente (N: 48 / 29,0%). O período de evolução clínica da doença a ocorrência do óbito, variou de 0 – 168 dias, com média de 34,7 dias, em relação ao total de óbitos (N: 225). Os óbitos confirmados por dengue tiveram uma evolução clínica de 0 - 48 dias, com média de 12,3 dias; por chikungunya de 0 – 168 dias, com média de 34,5 dias e por coinfecção de 0 – 34 dias, com média de 15,2 dias. Entre os sintomas apresentados pelos pacientes durante a evolução clínica antes da ocorrência do óbito, a febre foi a mais frequente, notificada em 86,2% (N: 194), seguida de mialgia (N: 137/ 60,8%) e artralgia (N: 133/ 59,1%). Os sintomas hemorrágicos foram notificados em 32,8% (N: 74) sendo relatados em 47,2% (N: 42) dos óbitos por dengue; 23,8% (N: 30) dos óbitos por chikungunya e 18,1% (N: 02) dos óbitos por coinfecção. Os sintomas neurológicos foram notificados em 44,4% (N: 100) dos óbitos confirmados, distribuídos em 34,0 % (N: 30) dos óbitos de dengue; 50,7% (N: 64) dos óbitos de chikungunya e 54,5% (N: 06) dos óbitos confirmados com coinfecção. Em relação ao itinerário terapêutico percorrido pelos pacientes durante a evolução clínica das doenças, 23,6% (N: 53) foram assistidos apenas com 01 atendimento hospitalar antes da ocorrência do óbito, 2,6% (N: 06) foram assistidos em algum momento pela Atenção Primária, 35,5% foram internados e 2,2% (N: 05) dos óbitos ocorreram em domicílio. 47,0% (N: 106) do total de óbitos foram notificados exclusivamente por meio do Serviço de Verificação de Óbito (SVO), 7,7% (N: 17) foram notificados pela Unidade de Ocorrência do Óbito (UOO) e pelo SVO; 36,0% (N:81) exclusivamente pela Unidade de Ocorrência do Óbito e 9,5% (N: 21) pelas Vigilâncias em Saúde dos municípios. Verificou-se que 82,2% (N: 185) dos óbitos tinham diagnóstico laboratorial, e que 56,75% (105) foram solicitados pelo SVO e a imuno-histoquímica foi o método de avaliação com resultado reagente para as arboviroses mais frequente (N: 55 /29,7 %). Nos anos de 2015 e 2016 foram isolados os sorotipos da dengue: DENV- 1 e DENV- 3, em 2017 foi isolado o DENV-2 não havendo registo de isolamento em 2018. O monitoramento entomológico não revelou nenhuma correlação entre o índice de infestação predial do Aedes aegypti e a ocorrência das arboviroses, não rejeitando-se a hipótese nula. Os dados permitem concluir que a compreensão do perfil epidemiológico da ocorrência de óbitos em epidemias com circulação simultânea de arbovírus é de grande relevância para a qualificação dos serviços de saúde, tanto na assistência a pacientes acometidos como nas ações de prevenção e controle vetorial.
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This thesis aimed to analyze the risk factors associated with the frequency of suspected deaths from urban arboviruses - Dengue, Zika and Chikungunya, in the state of Pernambuco during the epidemic and post-epidemic period - 2015 to 2018. An epidemiological, cross-sectional and descriptive study was carried out on the deaths confirmed by the state committee for discussing deaths from arboviruses in the 12 development regions of the State of Pernambuco. Data (cases and deaths by region; age group, sex, period of clinical evolution; presence of comorbidities; symptoms before death, therapeutic itinerary. diagnosis and entomological monitoring) were collected secondarily from the database of the epidemiology sector of the Arboviruses Management of the Pernambuco State Health Department. In the period, Pernambuco presented a frequency of 239,956 cases of arboviruses, with 183,078 cases of dengue, 56,769 of chikungunya and 109 of zika. 726 deaths were reported and 225 confirmed, 88 (39.1%) due to dengue; 126 (56.0%) had chikungunya, 11 (4.9%) had co-infection with dengue and chikungunya, with no confirmed deaths from zika. The deaths occurred in 10 of the 12 development regions, with no confirmation in Sertão do Araripe and Sertão do São Francisco. The Metropolitan Region had the highest occurrence with 145 deaths (64.5%) and the highest lethality (0.13%). The Mata Norte region had the highest overall mortality rate (3.96/100,000 inhabitants). Deaths from coinfection were distributed in the Metropolitan Region (N: 09/ 82.0%); in the Northern Agreste Region (N: 01/ 9%) and in the Central Agreste (N: 01/ 9.0%). and 121 (53.8%) of the patients who died were male and 104 (46.2%) were female. 34.0% (N: 76) were between 60 and 79 years old. 74.0% (N: 166) had some type of comorbidity, with arterial hypertension being the most frequent (N: 48 / 29.0%). The period of clinical evolution of the disease to the occurrence of death ranged from 0 - 168 days, with an average of 34.7 days, in relation to the total number of deaths (N: 225). Deaths confirmed by dengue had a clinical course of 0 - 48 days, with a mean of 12.3 days; by chikungunya from 0 – 168 days, with a mean of 34.5 days and by co-infection from 0 – 34 days, with a mean of 15.2 days. Among the symptoms presented by patients during the clinical course before death, fever was the most frequent, reported in 86.2% (N: 194), followed by myalgia (N: 137/60.8%) and arthralgia. (N: 133/59.1%). Bleeding symptoms were reported in 32.8% (N: 74) and were reported in 47.2% (N: 42) of dengue deaths, 23.8% (N: 30) of chikungunya deaths and 18.1% (N: 02) of deaths from coinfection. Neurological symptoms were reported in 44.4% (N: 100) of confirmed deaths, distributed in 34.0% (N: 30) of dengue deaths; 50.7% (N: 64) of chikungunya deaths and 54.5% (N: 06) of deaths confirmed with co-infection. Regarding the therapeutic itinerary followed by the patients during the clinical evolution of the diseases, 23.6% (N: 53) were assisted with only 01 hospital care before the occurrence of death, 2.6% (N: 06) were assisted in some At the moment by Primary Care, 35.5% were hospitalized and 2.2% (N: 05) of the deaths occurred at home. 47.0% (N: 106) of the total number of deaths were reported exclusively through the Death Verification Service (SVO), 7.7% (N: 17) were reported by the Death Occurrence Unit (UOO) and the SVO; 36.0% (N: 81) exclusively by the Death Occurrence Unit and 9.5% (N: 21) by the Municipal Health Surveillance. It was found that 82.2% (N: 185) of the deaths had a laboratory diagnosis, and that 56.75% (105) were requested by the SVO and immunohistochemistry was the evaluation method with a reagent result for the most frequent arboviruses (N: 55/29.7%). In 2015 and 2016, dengue serotypes were isolated: DENV-1 and DENV-3, in 2017 DENV-2 was isolated, with no record of isolation in 2018. Entomological monitoring did not reveal any correlation between the rate of Aedes aegypti building infestation and the occurrence of arboviruses, not rejecting the null hypothesis. The data allow us to conclude that the understanding of the epidemiological profile of the occurrence of deaths in epidemics with simultaneous circulation of arbovirus is of great relevance for the qualification of health services, both in the care of affected patients and in the prevention and vector control actions.
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ISABELE ALBUQUERQUE ALCOFORADO FERREIRA
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PRODUÇÃO DE COLAGENASE POR Rhizopus microsporus UCP 1296 E SUA APLICAÇÃO NA OBTENÇÃO DE PEPTÍDEOS DE COLÁGENO
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Orientador : ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO
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MEMBROS DA BANCA :
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ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO
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KEILA APARECIDA MOREIRA
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JUANIZE MATIAS DA SILVA BATISTA
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THIAGO PAJEÚ NASCIMENTO
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ROMERO MARCOS PEDROSA BRANDÃO COSTA
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Data: 30/08/2022
Ata de defesa assinada:
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A busca de novas enzimas é um desafio constante, principalmente devido à necessidade de desenvolvimento de condições de produção mais sustentáveis e financeiramente viáveis. Com o avanço da biotecnologia, pesquisas que objetivam a descoberta de enzimas microbianas têm sido desenvolvidas principalmente devido às condições favoráveis de produção em relação aos outros organismos. Enzimas que possuam alta especificidade e que possam ser usadas em pequenas quantidades são extremamente interessantes sob o ponto de vista biotecnológico. Os fungos filamentosos têm se destacado quanto à produção de enzimas de interesse industrial com destaque para as colagenases, que são enzimas específicas capazes de degradar a tripla hélice do colágeno nativo ou desnaturado. Nesse contexto o fungo filamentoso Rhizopus microsporus (UCP1296) isolado do solo da Caatinga, foi selecionado para produção de colagenase. Nesse trabalho o sistema de fermentação submersa (FS) foi escolhido para obtenção do extrato bruto e o sistema duas fases aquosas (SDFA) como estratégia de purificação. O meio de cultura de gelatina foi utilizado como fonte de carbono e nitrogênio. A produção da enzima colagenolítica atingiu o ápice com 120 horas de fermentação com 550 U/mL, biomassa de 0,42 g/L e atividade colagenolítica específica de 808,23 U/mg. Um planejamento fatorial foi aplicado e um aumento de 32% foi registrado na produção enzimática, sendo equivalente a 727,50 U/mL de atividade colagenolítica. A purificação por Sistema Duas Fases Aquosas (SDFA) foi eficiente para a colagenase produzida por R. microsporus UCP 1296. Sendo os maiores valores de rendimento e coeficiente de partição obtidos no planejamento fatorial com PEG 8000 g/mol a 12,5% (m/m) de concentração, pH= 8 e concentração de fosfato a 10,0% (m/m). Os parâmetros, pH e temperatura ótima, bem como a influência dos inibidores foram determinados para a caracterização da enzima purificada. Neste contexto, o pH ótimo foi 8,0 e a temperatura ótima foi 37 ºC. Em relação aos inibidores, a enzima apresentou parcial inibição em relação ao ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA) e ao ácido iodo acético (IAA), desta forma, podendo ter porções de metalo e cisteíno proteases. Os resultados sugerem que a enzima produzida apresenta-se como um produto biotecnológico promissor com aplicabilidade em diversas áreas.
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The search for new enzymes is a constant challenge, mainly due to the need to develop more sustainable and financially viable production conditions. With the advancement of biotechnology, research aimed at the discovery of microbial enzymes has been developed mainly due to the favorable conditions of production in relation to other organisms. Enzymes that have high specificity and that can be used in small amounts are extremely interesting from a biotechnological point of view. Filamentous fungi have stood out in terms of the production of enzymes of industrial interest, especially collagenases, which are specific enzymes capable of degrading the triple helix of native or denatured collagen. In this context, a strain of the filamentous fungus Rhizopus microsporus (UCP1296) isolated from the soil of the Caatinga, an exclusively Brazilian biome, was selected for collagenase production. In this work, we used the submerged fermentation system (FS) to obtain the crude extract and aqueous two-phase system (ATPS) as a purification strategy. We used the gelatine culture medium as a source of carbon and nitrogen. The production of collagenolytic enzyme reached a peak after 120 hours of fermentation with 550 U/mL of collagenolytic enzyme, biomass of 0.42 g/L and specific collagenolytic activity of 808.23 U/mg. A factorial design was applied and as a result we obtained a 32% increase in enzyme production, equivalent to 727.50 U/mL of collagenolytic activity. Purification by ATPS was efficient for collagenase produced by R. microsporus UCP 1296. The highest values of yield and partition coefficient were obtained in the factorial design with PEG 8000 g/mol at 12.5% (m /m) of concentration, pH = 8 and phosphate concentration at 10.0% (m/m). The parameters, optimum pH and temperature, as well as the influence of inhibitors were determined for the characterization of the purified enzyme. In this context, the optimum pH was 8.0 and the optimum temperature was 37 °C. Regarding inhibitors, the enzyme showed partial inhibition towards ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and iodoacetic acid (IAA), thus, it may have portions of metallo and cysteine proteases. The results suggest that the enzyme produced presents itself as a promising biotechnological product with applicability in several areas.
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SÂMARA DA SILVA GOMES
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Toxicidade das misturas dos agrotóxicos sulfentrazona, fipronil e carbendazim em embriões e larvas de zebrafish (Danio rerio)
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Orientador : PABYTON GONCALVES CADENA
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MEMBROS DA BANCA :
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PABYTON GONCALVES CADENA
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ANISIO FRANCISCO SOARES
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MARIA ADELIA BORSTELMANN DE OLIVEIRA
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PIERRE CASTRO SOARES
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EDUARDO PACHECO RICO
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Data: 10/10/2022
Ata de defesa assinada:
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O Brasil é o maior consumidor de agrotóxicos do mundo. A contaminação das águas superficiais por agrotóxicos é comumente associada a uma combinação de substâncias ao invés de um único composto, pois vários ingredientes ativos são comumente aplicados simultaneamente às culturas e/ou uma variedade de culturas que normalmente utilizam as mesmas bacias hidrográficas. A avaliação atual dos efeitos tóxicos destes agrotóxicos é predominantemente com base nas substâncias isoladas, portanto, a relevância ecológica pode estar subestimada. Mediante a isto, o presente estudo teve como objetivo investigar os efeitos do uso combinado de um herbicida, o Sulfentrazona, um inseticida, o Fipronil e um fungicida, o Carbendazim. Para atingir este objetivo, foram analisados a epibolia e teratogenicidade em embriões de zebrafish, e alterações comportamentais em larvas de zebrafish, realizando os testes de Tigmotáxia, Sensibilidade ao toque, resposta optomotora, Bolas-saltitantes e atividade exploratória. Os três pesticidas isolados foram teratogênicos para os embriões de zebrafish. Na análise da epibolia os pesticidas individuais reduziram o percentual epibólico, as misturas não causaram diferenças significativas. Porém, houve alterações significativas no desempenho de larvas expostas aos pesticidas e suas misturas em três testes comportamentais (Resposta optomotora, Bolas-saltitantes e Atividade exploratória). Nos testes de resposta optomotora e atividade exploratória foi possível observar o efeito sinérgico das misturas binárias. No teste das Bolas-saltitantes todos os grupos expostos apresentaram diferença significativa em relação ao controle. Através dos nossos resultados observamos que a toxicidade das misturas difere dependendo dos endpoints analisados, e que os testes comportamentais foram sensíveis para avaliar a interação das misturas dos pesticidas utilizados nesta pesquisa. Por isso trabalhos que busquem entender os efeitos das misturas de pesticidas são importantes, porque ajudarão a entender os efeitos forma mais realista e próxima do que acontece no meio ambiente. Pois os efeitos aditivos destas misturas ainda são pouco compreendidos e dificultam a sua avaliação toxicológica.
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Mostrar Abstract
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Brazil is the largest consumer of agrochemicals in the world. Contamination of surface waters by pesticides is commonly associated with a combination of substances rather than a single compound because several active ingredients are commonly applied simultaneously to crops and/or a variety of crops that typically use the same watersheds. The current evaluation of the toxic effects of these pesticides is predominantly based on single substances, so the ecological relevance may be underestimated. Given this, the present study aimed to investigate the effects of the combined use of a herbicide, Sulfentrazone, an insecticide, Fipronil, and a fungicide, Carbendazim. To achieve this goal, epiboly, teratogenicity in zebrafish embryos, and behavioral changes in zebrafish larvae were analyzed by performing the Thigmotaxis, Sensitive touch, Optomotor response, Bouncing balls, and Exploratory activity tests. The three isolated pesticides were teratogenic for zebrafish embryos. In the epiboly analysis, the individual pesticides reduced the epiboly percentage, and the mixtures caused no significant differences. However, there were significant changes in the performance of larvae exposed to the pesticides and their mixtures in three behavioral tests (Optomotor response, Bouncing balls, and Exploratory activity). In the optomotor response and exploratory activity tests, it was possible to observe the synergistic effect of the binary mixtures. In the bouncing ball test, all exposed groups showed a significant difference compared to the control group. Through our results, we observed that the toxicity of the mixtures differs depending on the endpoints analyzed and that the behavioral tests were sensitive to evaluate the interaction of the pesticide mixtures used in this research. Therefore, studies that seek to understand the effects of pesticide mixtures are important, because they will help to understand the effects more realistically and more closely to what happens in the environment. Because the additive effects of these mixtures are still poorly understood and make their toxicological evaluation difficult.
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RAPHAEL LUIZ ANDRADE SILVA
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AVALIAÇÃO DO POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO DO Aspergillus tamarii kita UCP1279 NA BIORREMEDIAÇÃO DE EFLUENTES TÊXTEIS
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Orientador : ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO
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MEMBROS DA BANCA :
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ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO
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RAQUEL PEDROSA BEZERRA
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JUANIZE MATIAS DA SILVA BATISTA
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MARCIA NIEVES CARNEIRO DA CUNHA
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ROMERO MARCOS PEDROSA BRANDÃO COSTA
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Data: 04/11/2022
Ata de defesa assinada:
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A indústria têxtil é uma das maiores consumidoras de água, que por sua vez utiliza uma grande quantidade de corantes no processo de tingimento de tecidos, liberando assim, volumes massivos de efluentes contendo inúmeros sais, pigmentos, metais pesados, agentes tóxicos, além de substâncias coloridas que reduzem a transparência e a dispersão de oxigênio no sistema, prejudicando tanto a biota aquática quanto populações ribeirinhas. Devido à complexidade estrutural e molecular, os corantes azo são resistentes a diversos tratamentos físicos e químicos. Portanto, o desenvolvimento de métodos de controle eficientes e de baixo custo contra essa poluição é vital para proteger os ecossistemas e os recursos naturais. Nesse sentido, avanços recentes na ciência impulsionaram a biorremediação como uma alternativa potencial aos métodos convencionais de tratamento, em termos de custo-benefício e sustentabilidade. A aplicação de fungos filamentosos se destaca dentre os micro-organismos utilizados, pois seu mecanismo de biossorção não utiliza apenas biodegradação como método de remediação desses corantes. A biossorção como um processo de adsorção em materiais biológicos, incluindo vivos e mortos, é mais considerada recentemente para a remoção de poluentes. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial biotecnonógico do fungo Aspergillus tamarii kita na biorremediação de corantes azo frequentemente usados no Polo de confecções do Agreste Pernambucano. A máxima descoloração (100%) do Direct Black 22 e do Marinho Direct 2R foi observada em um curto intervalo de tempo, enquanto a concentração de ambos os corantes permaneceu em 50mg/L. Em resumo, nosso estudo demonstrou que Aspergillus tamarii kita pode ser bem adequado para potenciais aplicações na biorremediação de efluentes têxteis.
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The textile industry is one of the largest consumers of water, which in turn uses a large amount of dyes in the fabric dyeing process, thus releasing massive volumes of effluents containing numerous salts, pigments, heavy metals, toxic agents, as well as substances colors that reduce the transparency and dispersion of oxygen in the system, harming both aquatic biota and riverine populations. Due to structural and molecular complexity, azo dyes are resistant to various physical and chemical treatments. Therefore, the development of efficient and low-cost control methods against this pollution is vital to protect ecosystems and natural resources. In this sense, recent advances in science have boosted bioremediation as a potential alternative to conventional treatment methods, in terms of cost-effectiveness and sustainability. The application of filamentous fungi stands out among the microorganisms used, as their biosorption mechanism does not only use biodegradation as a method of remediation of these dyes. Biosorption as an adsorption process on biological materials, including living and dead, is most recently considered for the removal of pollutants. Therefore, the present study aimed to evaluate the biotechnological potential of the fungus Aspergillus tamarii kita in the bioremediation of azo dyes frequently used in the garment industry in Agreste Pernambucano. Maximum discoloration (100%) of Direct Black 22 and Marinho Direct 2R was observed in a short time, while the concentration of both dyes remained at 50mg/L. In summary, our study demonstrated that Aspergillus tamarii kita may be well suited for potential applications in textile effluent bioremediation.
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LUCIA OLIVEIRA DE MACEDO
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Estudo epidemiológico da infecção por nematódeos broncopulmonares em ruminantes no estado de Pernambuco
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Orientador : RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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MEMBROS DA BANCA :
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RAFAEL ANTONIO DO NASCIMENTO RAMOS
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GILCIA APARECIDA DE CARVALHO
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LEUCIO CAMARA ALVES
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CARLA LOPES DE MENDONCA
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MARCIA PAULA DE OLIVEIRA FARIAS
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Data: 24/11/2022
Ata de defesa assinada:
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O presente estudo fornece dados epidemiológicos da infecção por nematódeos broncopulmonares em ruminantes no estado de Pernambuco contemplando os seguintes aspectos: 1) Dados epidemiológicos, morfológicos e moleculares sobre o nematódeo broncopulmonar de uma espécie de Protostrongylus em caprinos. Amostras fecais de caprinos (n = 217) foram analisadas pela técnica de Baermann e larvas foram detectadas em 18,9% (41/217) das amostras. As larvas apresentaram comprimento médio de 339μm (±52,99μm) e largura média de 18μm (±1,46μm). Morfologicamente eram semelhantes a Protostrongylus sp. e molecularmente revelaram forte identidade (98,7%) com sequências homólogas de Protostrongylus rufescens disponíveis no GenBank. 2) Visão abrangente dos dados históricos e atuais publicados entre janeiro de 1980 a dezembro de 2020, sobre a infecção por nematódeos broncopulmonares de ruminantes domésticos no Brasil. Neste período foram publicados 24 artigos, sendo em bovinos (n = 16), caprinos (n = 6), ovinos (n = 1) e um estudo (n = 1) com caprinos e ovinos. No geral, 12 estudos foram baseados apenas em exame post-mortem, cinco na detecção de espécimes em amostras fecais e sete foram baseados em análise fecal seguida de exame post-mortem. De todos os estudos, 66,7% (n = 16) artigos registraram Dictyocaulus viviparus, 4,2% (n = 1) D. filaria, 8,3% (n = 2) P. rufescens, 16,7% (n = 4) Muellerius capillaris, e 4,2% (n = 1) co-infecção por Dictyocaulus filaria e M. capillaris. 3) Prevalência de parasitos pulmonares em ruminantes do semiárido, nordeste do Brasil. Um total de 429 amostras fecais foram coletadas de bovinos (n = 219), caprinos (n = 122) e ovinos (n = 88) e analisadas pela técnica de Baermann. Bovinos e ovinos foram negativos. Larvas de Protostrongylus sp. foram detectadas em 8,19% (10/122) dos caprinos. Elas apresentaram comprimento médio de 351μm (±29,06μm) e largura média de 19μm (±1,46μm). Todos os animais positivos eram mantidos em sistema de criação semi-intensivo e não apresentavam sinais clínicos sugestivos da infecção por nematódeos pulmonares. 4) Infecção por nematódeos pulmonares em rebanhos bovinos de corte criados em uma importante área de produção pecuária na região Nordeste do Brasil. De setembro de 2020 a agosto de 2021, foram coletadas mensalmente amostras fecais mensais (n = 493) de 46 bovinos de corte. Larvas de nematódeos broncopulmonares foram detectadas em 8,7% (4/46) dos animais. Vinte larvas foram recuperadas, com o número mínimo (n = 1) detectado em outubro e dezembro, e o número máximo (n = 13) em novembro. Apresentavam comprimento médio de 363μm (±28,65μm), largura média de 19μm (±1,03μm) e eram morfologicamente semelhantes a Dictyocaulus sp.. A infecção por estes nematódeos tem sido relatada nas últimas quatro décadas no Brasil, mas a maioria das informações foi obtida no exame post-mortem. Por fim, relatamos a ocorrência destes parasitos em bovinos e caprinos da região nordeste. Apesar da ausência de sinais clínicos nos animais deste estudo, medidas sanitárias são preconizadas para prevenir a infecção por esses nematódeos e reduzir o impacto econômico que eles podem causar na produção pecuária.
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The present study provides epidemiological data on lungworm infection in ruminants in the state of Pernambuco, including the following aspects: 1) Epidemiological, morphological, and molecular data on the lungworm larva of a species of Protostrongylus from goats. Fecal samples from goats (n = 217) were analyzed by the Baermann technique and larvae were detected in 18.9% (41/217) of the samples. These larvae had a mean length of 339μm (±52.99μm) and a mean width of 18 μm (±1.46μm). Morphologically they were similar to Protostrongylus sp. and molecularly they revealed strong identity (98.7%) with Protostrongylus rufescens homologous sequences available in GenBank. 2) To provide a comprehensive overview of historical and current data published between January 1980 and December 2020 on lungworm infection of domestic ruminants in Brazil. In this period, 24 articles were published, being in cattle (n = 16), goats (n = 6), sheep (n = 1) and one study (n = 1) with goats and sheep. Overall, 12 studies were based on post-mortem examination only, five on detection of specimens in fecal samples, and seven were based on fecal analysis followed by post-mortem examination. Of all studies, 66.7% (n = 16) articles recorded Dictyocaulus viviparus, 4.2% (n = 1) Dictyocaulus filaria, 8.3% (n = 2) P. rufescens, 16.7% (n = 4) M. capillaris, and 4.2% (n = 1) co-infection by D. filaria and Muellerius capillaris. 3) To determine the prevalence of lungworms in ruminants from the semi-arid region of northeastern Brazil. A total of 429 fecal samples were collected from cattle (n = 219), goats (n = 122) and sheep (n = 88) and analyzed by the Baermann technique. Cattle and sheep were negative. Larvae of Protostrongylus sp. were detected in 8.19% (10/122) of goats. They had an average length of 351μm (±29.06μm) and an average width of 19μm (±1.46μm). All infected goats were raised in a semi-intensive production system and did not exhibit any clinical signs suggestive of the infection by lungworms. 4) Lungworms infection in beef cattle herds reared in an important livestock production area in the northeastern region of Brazil. From September 2020 to August 2021, monthly fecal samples (n = 493) were collected from 46 beef cattle. Out of all animals assessed, lungworm larvae were detected in 8.7% (4/46). Animals did not present any clinical sign suggestive of the infection by lungworms parasites. Twenty larvae were retrieved, with the minimal number (n = 1) detected in October and December, and the maximum number (n = 13) in November. They presented a mean length of 363μm (± 28.65μm), mean width of 19 μm (±1.03μm) and were morphologically similar to Dictyocaulus sp.. Infection by these nematodes has been reported in the last four decades in Brazil, but most of the information was obtained from post-mortem examination. Finally, we report the occurrence of these parasites in cattle and goats in the northeastern region. Despite the absence of clinical signs in the animals in this study, sanitary measures are recommended to prevent infection by these nematodes and reduce the economic impact they can cause in livestock production.
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STELIANE LIMA SANTOS
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Produção, extração e purificação integrada de protease com atividade fibrinolítica produzida por fungos do gênero Rhizopus e sua caracterização bioquímica
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Orientador : TATIANA SOUZA PORTO
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MEMBROS DA BANCA :
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TATIANA SOUZA PORTO
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AMANDA EMMANUELLE SALES CONNIFF
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CAMILA SOUZA PORTO
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MARLLYN MARQUES DA SILVA
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THIAGO PAJEÚ NASCIMENTO
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Data: 28/11/2022
Ata de defesa assinada:
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Enzimas com atividade fibrinolítica são obtidas de diferentes fontes e possuem a capacidade de degradar a fibrina, o principal componente proteico dos coágulos sanguíneos. O acúmulo de fibrina nos vasos pode gerar trombose, uma doença que ocorre quando há um desequilíbrio no sistema hemostático. Nesse sentido, o objetivo deste artigo foi selecionar fungos filamentosos do gênero Rhizopus, produzir por proteases fibrinolíticas por fermentação submersa e extrair por sistema de duas fases aquosas (PEG/Citrato) e fermentação extrativa, além de caracterizar bioquimicamente a enzima. Para a seleção foi realizada uma fermentação submersa com fungos do gênero Rhizophus. Em seguida um planejamento fatorial 2³ completo para determinar as melhores condições de produção. A influência das variáveis tipo de substrato (TS), concentração do substrato (CS) e concentração de glicose (CG) foram avaliadas sobre a produção da protease fibrinolítica. A enzima produzida foi extraída por sistema de duas fases aquosas (SDFA) constituído de polietilenoglicol (PEG) e citrato de sódio, sendo realizado de acordo com um planejamento fatorial 24, para avaliar a influência das variáveis: massa molar de PEG (MPEG), concentração de PEG (CPEG), concentração de citrato de sódio (Ccit) e pH, sobre o coeficiente de partição (K), recuperação(Y%) e fator de purificação (FP). Em seguida a enzima foi caracterizada em parâmetros bioquímicos cinéticos. Um planejamento fatorial 24 também foi realizado para avaliar a influência de MPEG, CPEG, Ccit e pH sobre o K e Y na fermentação extrativa. A protease fibrinolítica de Rhizopus arrhizus UCP 1605 foi produzida nas condições de 3% de soja, e 0,5% de glicose, sob agitação de 120 rpm, a 30ºC por 96 horas de fermentação submersa, apresentando uma atividade proteásica de 10,37 U/mL e uma atividade fibrinolítica com um halo de 31 mm, correspondendo a uma atividade de 850,60 U/mL. Quanto à extração em SDFA, os melhores resultados foram obtidos no ensaio formado por PEG 8000 g/mol 24,0 % (m/m), 15 % (m/m) de citrato de sódio e pH 8. Nesta condição a enzima particionou preferencialmente para fase rica em PEG, com um K de 1,58, FP 4,07, Y de 97,0% e uma atividade fibrinolítica com um halo de 16 mm, correspondendo a uma atividade de 44,39 U/mL. No processo de fermentação extrativa a enzima particionou para ambas as fases, tendo a melhor condição no ensaio composto por PEG 8000 g/mol, na concentração de 20%, 15% de citrato e pH 8,0, apresentando um K de 2,4 recuperação de atividade (Y) = 71,5% e 3,83 U/mL de atividade proteásica. A enzima presente no extrato enzimático e no SDFA apresentaram temperatura ótima de 50ºC e pH ótimo 8. Quanto aos parâmetros cinéticos a enzima apresentou constante de Michaelis Menten (Km) de 4,06 mg/mL com velocidade máxima de 45,05 U/mL. Esses resultados demonstram o potencial da produção de Rhizopus arrhizus UCP 1605 em fermentação submersa e dos processos de extração da protease fibrinolítica e sua possibilidade para ser explorado em aplicações industriais como candidatos a agentes trombolíticos.
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Enzymes with fibrinolytic activity are obtained from different sources and can degrade fibrin, the main protein component of blood clots. The accumulation of fibrin in vessels can lead to thrombosis, a disease that occurs when there is an imbalance in the hemostatic system and plasmin, the enzyme responsible for breaking and removing clots, cannot dissolve them. The work in question has as its objectives to produce and purify proteases with fibrinolytic activity from filamentous fungi by submerged fermentation; carry out purification processes through an aqueous two-phase system (PEG/Citrate), in addition to biochemically characterize the fibrinolytic enzyme obtained from Rhizopus arrhizus UCP 1605. For production, a submerged fermentation was carried out with fungi of the genus Rhizophus. Then a complete 2³ factorial design to determine the best conditions for cultivation of the selected microorganism, for this, the influence of the variables substrate type (TS), substrate concentration (CS) and glucose concentration (GC) were evaluated under the production of fibrinolytic proteases, resulting in the best production condition (3% soybean MS-2 medium, and 0.5% glucose, submitted to 30ºC under stirring at 120 rpm for 96 hours of fermentation). The enzyme produced was partially purified by aqueous two-phase systems (SDFA) consisting of polyethylene glycol (PEG) and sodium citrate, being carried out according to a factorial design 24, to evaluate the influence of the independent variables: molar mass of PEG (MPEG), PEG concentration (CPEG), sodium citrate concentration (Ccit) and pH on the partition coefficient (K), yield (Y%) and purification factor (PF). Then the enzyme was characterized in kinetic biochemical parameters. A 24 factorial design was also carried out to evaluate the influence of MPEG, CPEG, Ccit and pH on K and Y in extractive fermentation. The fibrinolytic protease from Rhizopus arrhizus UCP 1605 was produced under conditions of 3% soybean and 0.5% glucose, under agitation of 120 rpm, at 30ºC for 96 hours of submerged fermentation, presenting a protease activity of 10.37 U /mL and a fibrinolytic activity with a halo of 31 mm, corresponding to an activity of 850.60 U/mL. As for the extraction in SDFA, the best results were obtained in the assay formed by PEG 8000 g/mol 24.0 % (m/m), 15 % (m/m) of sodium citrate, and pH 8. In this condition, the enzyme partitioned preferably for the PEG-rich phase, with a K of 1.58, FP 4.07, Y of 97.0% and a fibrinolytic activity with a halo of 16 mm, corresponding to an activity of 44.39 U/mL. In the extractive fermentation process, the enzyme partitioned for both phases, having the best condition in the test composed of PEG 8000 g/mol, at a concentration of 20%, 15% of citrate and pH 8.0, presenting a K of 2.4 activity recovery (Y) = 71.5% and 3.83 U/mL of protease activity. The enzyme presents in the enzymatic extract and in the SDFA presented an optimal temperature of 50ºC and an optimal pH of 8. As for the kinetic parameters, the enzyme presented a Michaelis-Menten constant (Km) of 4.06 mg/mL with a maximum velocity of 45.05 U/mL. These results demonstrate the potential of the production of Rhizopus arrhizus UCP 1605 in submerged fermentation and of the fibrinolytic proteases extraction processes and their possibility to be explored in industrial applications as candidates for thrombolytic agents.
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